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国家自然科学基金(30271242)

作品数:15 被引量:39H指数:4
相关作者:郑启昌宋自芳郭兴军熊俊舒晓刚更多>>
相关机构:华中科技大学上海交通大学附属第六人民医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 15篇中文期刊文章

领域

  • 15篇医药卫生

主题

  • 8篇细胞
  • 5篇血管
  • 5篇基因
  • 4篇动脉
  • 4篇血管生成
  • 4篇血管生成抑制
  • 4篇ARREST...
  • 3篇血管生成抑制...
  • 3篇移植动脉
  • 3篇增生
  • 3篇增殖
  • 3篇内膜
  • 3篇内膜增生
  • 3篇基因表达
  • 2篇胆管
  • 2篇蛋白
  • 2篇动脉移植
  • 2篇他汀
  • 2篇平滑肌
  • 2篇平滑肌细胞

机构

  • 13篇华中科技大学
  • 2篇上海交通大学...

作者

  • 13篇郑启昌
  • 12篇宋自芳
  • 7篇郭兴军
  • 4篇左克强
  • 4篇熊俊
  • 4篇舒晓刚
  • 3篇卢昕
  • 3篇尚丹
  • 3篇陈立波
  • 2篇管思明
  • 2篇屈新才
  • 2篇胡青钢
  • 2篇艾开兴
  • 2篇张磊
  • 2篇李伟
  • 1篇龙淼云
  • 1篇汪谢丹
  • 1篇胡安斌
  • 1篇田元
  • 1篇朱林

传媒

  • 4篇中华实验外科...
  • 3篇中国病理生理...
  • 3篇华中科技大学...
  • 2篇肿瘤
  • 2篇Journa...
  • 1篇中国普通外科...

年份

  • 2篇2008
  • 6篇2007
  • 2篇2006
  • 3篇2005
  • 1篇2004
  • 1篇2003
15 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
移植动脉新生内膜平滑肌细胞来源于受体骨髓细胞的实验依据
2007年
目的:研究大鼠移植动脉新生内膜平滑肌细胞Sry基因表达,探讨移植物动脉硬化新生内膜平滑肌细胞的来源。方法:将雄性Wistar大鼠骨髓细胞移植到雌性大鼠体内,制备嵌合体大鼠;4周后建立大鼠腹主动脉移植慢性排斥反应模型,分为4组:雌性同系移植组、雌性异系移植组、雄性异系移植组、嵌合体异系移植组。移植术后8周,取移植动脉组织标本,进行病理组织学观察与免疫组化染色,分析移植动脉新生内膜增生及新生内膜细胞α-SMA的表达;采用显微切割技术收集新生内膜平滑肌细胞,用PCR扩增方法检测细胞Sry基因表达,分析新生内膜平滑肌细胞与受体骨髓细胞的关系。结果:异系移植组移植动脉新生内膜中α-SMA表达阳性平滑肌细胞大量增生,致动脉内膜显著增厚,动脉壁新生内膜面积及新生内膜/中膜面积比均显著高于同系移植组(P<0.01)。PCR分析显示,嵌合体异系移植组和雄性异系移植组一致,在约225bp处均有1条特异性扩增条带,而雌性异系移植组则无相应的核酸扩增条带。结论:受体骨髓细胞作为移植物血管新生内膜平滑肌细胞的来源,参与移植物动脉硬化发生和发展。
宋自芳李伟郑启昌管思明尚丹郭兴军
关键词:动脉移植新生内膜增生平滑肌细胞骨髓细胞
siRNA抑制肝癌细胞株HepG2 Survivin基因表达的研究被引量:7
2004年
目的 研究siRNA对肝癌细胞株HepG2中Survivin基因表达的抑制作用。方法 设计、合成一对Survivin编码基因的反向重复序列 ,中间间隔 9个核苷酸序列 ,通过定向克隆至载体Psilencer2 1,构建siRNA真核表达载体 ,经稳定转染HepG2细胞后应用RT PCR及流式细胞术检测肝癌细胞中Survivin基因mRNA及蛋白质表达的抑制情况。结果 测序证实siRNA真核表达载体构建成功。通过RT PCR及流式细胞术检测 ,siRNA在mRNA及蛋白质水平抑制Sur vivin基因表达分别达 73%和 75 %。结论 构建的Psilencer (+) Survivin重组质粒能有效抑制Survivin基因在肝癌细胞株HepG2中的表达。为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料。
卢昕郑启昌熊俊张勇秦涛
关键词:SURVIVIN基因肝癌细胞株HEPG2定向克隆
Prokaryotic Expression and Biological Activity Analysis of Human Arresten Gene被引量:4
2005年
To express recombinant arresten in Escherichia coli (E.Coli) and investigate its biological activity, prokaryotic expression vector of human arresten gene was constructed by gene engineering. Human arresten gene was amplified from recombinant plasmid pGEMArr by polymerase chain reaction (PCR), and inserted into prokaryotic expression vector pRSET containing T7 promoter. Restriction analysis and DNA sequencing verified that the arresten gene was correctly cloned into the expression vector. The recombinant plasmid pRSETAt was subsequently transformed into E.coli BL21 (DE3), and the target gene was expressed under induction of IPTG. SDS-PAGE analysis revealed that the recombinant protein with a molecular weight of 29 kD (1 kD=0.992 1 ku) amounted to 29 % of the total bacterial proteins. After purification and renaturation, the recombinant protein could significantly suppress the proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). These results suggested that the expression of a biologically active form of human arresten in the pRSET expression system laid a foundation for further study on the mechanistic insight into arresten action on angiogenesis and the development of powerful anti-cancer drugs.
宋自芳郑启昌李伟熊俊尚丹舒晓刚
关键词:ARRESTEN
阿托伐他汀对移植动脉硬化抑制作用的实验研究被引量:1
2006年
目的研究阿托伐他汀(atorvastatin)对大鼠移植动脉硬化的抑制作用。方法建立大鼠腹主动脉移植模型。动物分为3组:(1)异系移植对照组;(2)异系移植实验组;(3)同系移植对照组。6 0 d后对移植动脉行病理组织学检测,观察移植动脉内膜增生程度,并行免疫组织化学染色(SP法)检测移植动脉增殖细胞核抗原(PCNA)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果异系移植实验组血管内膜增厚程度显著低于异系移植对照组,(1),(2),(3)组移植动脉内膜增厚面积比分别为(3 5.2 0±6.3 5)%,(1 2.4 0±2.6 5)%,(1.2±1.1 0)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。PCNA在异系移植实验组表达明显低于异系移植对照组和高于同系移植对照组,(1),(2),(3)组分别为(1 7.2 0±1.6 5)%,(5.4 0±0.8 0)%,(1.1 0±0.2 5)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阿托伐他汀可抑制大鼠移植动脉硬化,PCNA基因表达的下调可能是阿托伐他汀抑制移植动脉硬化的机制之一。
郭兴军郑启昌宋自芳张磊左克强柯文波
关键词:基因表达
The Origin of Neointimal Smooth Muscle Cells in Transplant Arteriosclerosis from Recipient Bone-marrow Cells in Rat Aortic Allograft
2007年
In order to investigate the origin of neointimal smooth muscle cells in transplant arterio- sclerosis in rat aortic allograft, sex-mismatched bone marrow transplantation was performed from male Wistar rats to female Wistar rats. Four weeks after transplantation, the aortic transplant model was established by means of micro-surgery in rats. The recipients were divided into 4 groups: female Wistar-female Wistar aortic isografts, female SD-female Wistar aortic allografts, male SD-male Wis- tar aortic allografts, female SD-chimera Wistar aortic allografts. Eight weeks after transplantation, aortic grafts were removed at autopsy and processed for histological evaluation and immunohisto- chemistry. The results indicated that excessive accumulation of α-SMA-positive smooth muscle cells resulted in significant neointima formation and vascular lumen stricture in rat aortic allografts. Neointima assay revealed that the neointimal area and NIA/MA ratio of transplanted artery were sig- nificantly increased in all of aortic allograft groups as compared with those in aortic isograft group (P<0.01). Neointimal smooth muscle cells were harvested from cryostat sections of aortic allograft by microdissection method. The Sry gene-specific PCR was performed, and the result showed that a dis- tinct DNA band of 225 bp emerged in the male-male aortic allograft group and chimera aortic al- lograft group respectively, but not in the female-female aortic allograft group. It was suggested that recipient bone-marrow cells, as the origin of neointimal smooth muscle cells, contributed to the pathological neointimal hyperplasia of aortic allograft and transplant arteriosclerosis.
宋自芳李伟郑启昌尚丹舒晓刚管思明
血管生成抑制因子Arresten基因对裸鼠移植瘤的研究被引量:6
2005年
熊俊宋自芳舒晓钢卢昕屈新才郑启昌
关键词:血管生成抑制因子裸鼠移植瘤新生血管形成RT-PCR方法原核表达载体基因重组技术
阿托伐他汀对移植动脉慢性排斥反应的抑制作用及机制被引量:1
2007年
目的:研究阿托伐他汀(atorvastatin)对大鼠移植动脉慢性排斥的抑制作用及机制。方法:建立大鼠腹主动脉移植慢性排斥反应模型,分为3组:异系移植对照组、异系移植治疗组和同系移植组,60d后对移植动脉行病理组织学检测,观察移植动脉内膜增生程度;并行免疫组织化学染色(SP法),检测移植动脉增殖细胞核抗原(PCNA)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,行硝酸还原酶比色法测定移植动脉组织NO的含量。结果:异系移植治疗组血管内膜增厚程度(11.60%±2.40%)显著低于异系移植对照组(34.60%±6.40%,P<0.05),高于同系移植组(1.15%±0.65%,P<0.05);PCNA在异系移植治疗组(4.80%±0.80%)表达明显低于异系移植对照组(18.40%±1.80%,P<0.05),高于同系移植组(1.20%±0.40%,P<0.05)。结论:阿托伐他汀可抑制大鼠移植动脉慢性排斥反应,PCNA基因表达的下调可能是阿托伐他汀抑制移植动脉慢性排斥反应的机制之一。
郭兴军宋自芳郑启昌张磊左克强
关键词:阿托伐他汀移植物排斥增殖细胞核抗原
Survivin在胆管癌细胞核中的表达及其与预后的关系
2007年
目的探讨胆管癌细胞核中Survivin的表达及其在提示预后方面所起的作用。方法48例手术切除的胆管癌标本作为研究对象,应用免疫组织化学技术(SP法)检测Survivin在48例胆管癌中的表达情况。Survivin的表达分别描述为阴性、弱阳性和强阳性。结果Survivin在胞质和细胞核表达例数分别为26例和22例。细胞质中强阳性表达为12例,而细胞核强阳性表达的则有8例。细胞核强阳性表达的患者中位存活期为10个月,明显低于弱阳性表达的患者(19个月,P=0.035)。Cox比例风险模型的多因素分析证实存在2个独立的预后因素:Survivin细胞核表达(P=0.018)和远处转移(P=0.027)。结论胆管癌细胞核中Survivin的表达可能提示较差的预后。
左克强艾开兴郭兴军宋自芳陈立波郑启昌
关键词:SURVIVIN胆管癌预后
血管生成抑制因子arresten基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量:8
2003年
目的 :构建血管生成抑制因子arresten基因的原核表达载体 ,并在大肠杆菌中进行表达。方法 :利用聚合酶链式反应 (PCR) ,由我们构建的重组质粒pGEM -Arr中扩增出arresten基因 ;采用基因重组技术 ,将该基因定向克隆于原核表达载体pRSET中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,用IPTG诱导表达 ,并对表达产物行SDS -PAGE分析。结果 :酶切鉴定和DNA测序证实arresten基因正确地插入表达载体中。重组arresten在大肠杆菌中获得高效表达 ,其分子量约为 2 6kD ,表达量约占菌体总蛋白量的 30 %。结论 :Arresten基因原核表达载体的成功构建和重组arresten蛋白在大肠杆菌中的高效表达 。
宋自芳郑启昌朱林胡安斌李毅清舒晓刚田元
关键词:基因ARRESTEN基因表达
瞬时转染Arresten基因对血管内皮细胞迁移的影响被引量:3
2005年
目的研究瞬时转染Arresten基因对血管内皮细胞迁移的影响,并为后续动物实验探索最佳体内转染DNA-脂质体比例。方法以不同比例之质粒DNA-Lipofectamine 2000转染肝癌细胞系HepG-2细胞,瞬时转染经RT-PCR证实目的基因已转入细胞内48 h后收集上清,上清液与血管内皮细胞以划痕法共培养,计算迁移率。结果不同比例转染细胞的上清液均可抑制内皮细胞的迁移,以DNA-脂质体比例1:1,抑制率最高。结论瞬时转染Arresten基因可抑制血管内皮细胞的迁移, 并为后续动物实验奠一定的基础。
熊俊宋自芳卢昕胡青钢屈新才郑启昌
关键词:血管生成抑制因子转染ECV-304细胞
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