中国博士后科学基金(2011M500780)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 人脐带间充质干细胞半连续灌注培养:灌注启动时间及灌注频率和灌注体积
- 2013年
- 背景:人脐带间充质干细胞作为新的种子细胞来源,如何迅速提高其增殖以满足临床所需的数量和质量,是迫切需要解决的现实问题。目的:探讨不同的灌注启动时间、灌注频率和灌注体积对人脐带间充质干细胞扩增和代谢的影响,建立高密度培养的半连续灌注培养工艺。方法:培养传代人脐带间充质干细胞,以批培养方式为参照,半连续灌注培养分成3组。①灌注启动时间组:批培养24h和48h,分别开始换液,每2d更换75%。②灌注频率组:批培养48h开始换液,频率分别为每1,2,3d,换液体积比为75%。③灌注体积组:批培养48h开始换液,频率为每2d,换液体积比分别为25%,50%,75%,100%。结果与结论:相对于其他培养条件,灌注启动时间为48h、频率为每天、体积比为75%的静态培养条件下,稀释率较大,细胞密度较大,葡萄糖比消耗速率和乳酸比生成速率较高,谷氨酰胺比消耗速率较低,氨比生成速率较高,乳酸对葡萄糖的代谢系数较低,谷氨酰胺的代谢系数较高。这表明稀释率大,不仅葡萄糖和谷氨酰胺充足,而且细胞所需的微量元素和未知的因子也充足,满足了细胞生长的要求;同时排除乳酸和氨等对细胞的影响,去除条件培养基中某些因子对细胞的交互影响,提高了细胞的增殖。
- 张淑香陈彦田齐念民
- 关键词：干细胞脐带启动时间
- 葡萄糖和谷氨酰胺浓度对人脐带间充质干细胞体外培养的影响被引量：4
- 2012年
- 目的探索葡萄糖和谷氨酰胺浓度对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外培养的影响。方法分离、培养hUC-MSCs,光学显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面抗原。采用不同浓度葡萄糖和谷氨酰胺对hUC-MSCs进行体外培养,结晶紫计数法记录细胞增殖曲线,并检测培养液中营养物质及其代谢产物。结果传代的hUC-MSCs均一地高表达CD29、CD44、CD105和CD90,不表达CD14、CD45。葡萄糖浓度增加,会促进细胞的增殖,对葡萄糖消耗、乳酸生成和谷氨酰胺消耗没有影响,但增加了氨的生成;谷氨酰胺浓度增加,对细胞增殖的促进作用有限,但可提高细胞的生长速率,从而缩短培养时间,对葡萄糖和谷氨酰胺的消耗影响不大,但增加了乳酸和氨的生成。结论葡萄糖和谷氨酰胺都可促进细胞的增殖。葡萄糖缺失时其他氨基酸充当氮源,谷氨酰胺充足时谷氨酰胺转化成乳酸的通量增大。
- 张淑香陈彦田齐念民
- 关键词：脐带间充质干细胞葡萄糖谷氨酰胺
