黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10531005)
- 作品数:6 被引量:15H指数:3
- 相关作者:李广兴王衡刘博奇张瑞莉郭明明更多>>
- 相关机构:东北农业大学华南农业大学浙江大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 抗鸡传染性支气管炎病毒多克隆抗体的制备及其生物活性的鉴定被引量:3
- 2010年
- 本试验将商品化疫苗株H120鸡传染性支气管炎病毒(IBV)直接免疫大白兔进行抗IBV全病毒粒子多克隆抗体的制备,通过琼扩试验及酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,同时利用免疫组织化学、免疫荧光及Western blotting技术检测了所制备多抗血清的生物活性。试验结果表明,制备得到的多抗血清具有很高的抗体效价,同时能够与不同形式的IBV相关抗原发生特异性结合。
- 王衡刘博奇尹航唐丽任晓峰李广兴
- 关键词:传染性支气管炎病毒多克隆抗体活性检测
- 传染性支气管炎病毒S-ChIL-15融合基因真核表达质粒的构建及其体外表达被引量:2
- 2009年
- 通过一段编码(G3S)4多肽的碱基linker将传染性支气管炎病毒(IBV)S基因和鸡IL-15(ChIL-15)基因连接,构建了pcDNA3.1-IBVS-ChIL-15融合基因重组质粒。将该重组质粒转染Vero细胞,并通过RT-PCR、免疫组织化学及免疫荧光试验对重组质粒的体外瞬时表达情况进行检测。结果显示,成功构建了S-ChIL-15融合基因,转染24 h后能检测到IBVS-ChIL-15融合基因和该融合基因瞬时表达的产物。
- 王衡李广兴刘博奇任晓峰
- 关键词:传染性支气管炎病毒S基因融合基因
- 牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备被引量:2
- 2011年
- 根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+-)rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白。用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料。
- 盖仁华王衡郎跃深李广兴张瑞莉马德星张国庆杨贵君
- 关键词:白细胞介素-2原核表达多克隆抗体
- 测定猪肉中土霉素及金霉素残留的HPLC法建立被引量:4
- 2011年
- 文章建立了测定猪肉组织中土霉素及金霉素残留量的HPLC法。该方法按照国家检测标准采用了5%高氯酸50 mL为样品提取液;乙腈+0.01 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(用30%硝酸调节pH2.5)=35 65为流动相;检测波长为355 nm,进行测定。在此色谱条件下,土霉素、金霉素标准品浓度在0.1~1.0μg·mL-1、0.2~2.0μg·mL-1范围内线性关系良好,在3个不同浓度添加水平的回收率为78.06%~87.21%,变异系数为3.02%~7.72%,金霉素的回收率为76.45%~85.62%,变异系数为3.46%~6.32%。土霉素及金霉素的最低检测线为20和10μg·kg-1。该检测方法简便、快速且灵敏度高,适用于土霉素、金霉素残留的定性定量分析。
- 智若岚刘中成李广兴张瑞莉
- 关键词:高效液相色谱法土霉素金霉素猪肉
- 雏鸡免疫鸡IL-15基因质粒和新城疫病毒F基因质粒后免疫细胞数量的动态变化被引量:2
- 2009年
- 鸡白细胞介素15(ChIL-15)是一种新发现的细胞因子,在禽类疫苗领域中具有很大的研究潜力。本试验以新城疫病毒(NDV)F基因质粒为参照对象,借助酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)染色法及甲基绿-派络宁染色法(PMG)对ChIL-15基因质粒与NDV F基因质粒联合免疫组(I组)以及NDV F基因质粒单独免疫组(F组)试验鸡免疫细胞数量进行检测,以研究ChIL-15是否具有免疫增强作用。试验结果表明:不同质粒免疫后,28日龄时I组鸡免疫器官中的ANAE+T细胞数量及PMG+浆细胞数量均高于F组试验鸡,说明ChIL-15对于T淋巴细胞及浆细胞具有增强作用。
- 王衡郭明明刘博奇李广兴
- 兽用核酸疫苗的研究进展被引量:3
- 2006年
- 核酸疫苗是近年来发展起来的一种新型疫苗,它应用现代生物工程和分子生物学技术,克服传统疫苗存在的问题,具有传统疫苗不可比拟的优点,呈现出良好的发展势头和应用前景。在兽用领域中,新城疫、禽流感、传染性支气管炎、传染性法氏囊炎等疾病的核酸疫苗得到了较为深入的研究,为兽用核酸疫苗乃至其他领域核酸疫苗的进一步研究提供了有益的参考。
- 郭明明
- 关键词:核酸疫苗核酸免疫兽用