江苏省自然科学基金(BK2008067)
- 作品数：2 被引量：47H指数：2
- 相关作者：周国华景花宋沁馨杨会勇那广水更多>>
- 相关机构：中国药科大学国家海洋环境监测中心南京大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 利用线性指数PCR-焦磷酸测序技术快速检测3种海洋弧菌被引量：3
- 2009年
- 目的:建立一种基于线性指数聚合酶链式反应(linear-after-the-exponential PCR,LATE-PCR)焦磷酸测序技术快速检测致病性海洋弧菌的方法。方法:首先根据海洋弧菌的16S rRNA基因和外膜蛋白K(OmpK)基因的目的片段设计引物并优化反应条件进行LATE-PCR扩增,其次利用酶促反应处理PCR产物中干扰焦磷酸测序反应的副产物,最后加入退火引物后直接进行焦磷酸测序。结果:成功进行了LATE-PCR扩增,制备出足量单链DNA模板供焦磷酸测序反应;取1~2μL的PCR产物即可获得理想的焦磷酸测序信号。测序结果与Sanger法的结果一致,测得序列与GenBank所报道的相符合。通过对16S rRNA基因片段的检测,可以确认样品是否为海洋弧菌;通过对OmpK基因目的片段的检测可以初步区分弧菌种类,对3种常见弧菌:副溶血弧菌、哈维弧菌和溶藻弧菌成功地进行了检测。结论:本方法结果准确,灵敏度高,操作简便且成本低,可快速检测大量样品,在弧菌快速检测和诊断中具有很好的应用前景。
- 杨会勇那广水朱术会邹秉杰奚涛周国华
- 关键词：海洋弧菌焦磷酸测序RRNA基因
- MicroRNA定量检测方法的研究进展被引量：45
- 2010年
- MicroRNA是一类内源性的非编码小分子RNA,通过下调蛋白编码基因的表达而对不同的细胞发育过程起到重要的调控作用。分析组织或细胞样本中microRNA的表达可为研究这类分子的生物学功能提供重要的信息。近年来,研究者发展了许多方法检测不同的生理和病理学过程中microRNA的表达差异,并发现microRNA的异常表达与癌症、神经紊乱和心脏疾病等的发生相关。文章系统地介绍了最新发展的microRNA定量检测方法,详细阐述了基于探针杂交技术的Northern blotting法、微阵列芯片法、纳米金标记法、桥连同位素标记法,以及基于扩增技术的定量PCR检测法、滚环扩增法、引物入侵法和新一代大规模高通量测序法等,并对这些方法的优缺点进行了分析比较。
- 景花宋沁馨周国华
- 关键词：MICRORNA
