国家自然科学基金(30300413)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- DOX-GA3对βG转染人肾癌GRC-1细胞的体外杀伤作用被引量：1
- 2005年
- 目的建立高表达β-葡萄糖醛酸苷酶(βG)基因的肾癌模型,并观察βG前体药葡萄糖醛酸化阿霉素(DOX-GA3)对βG转染人肾癌GRC-1细胞的体外杀伤作用.方法利用阳离子脂质体将已构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)转入肾癌细胞株GRC-1,用基因组PCR扩增,免疫荧光,免疫组化检测鉴定其转录和表达水平,分别用MTT及细胞计数法检测βG阳性细胞对DOX-GA3的体外敏感性和旁观者效应.结果经G418筛选后的阳性细胞克隆,在DNA和蛋白水平证实了转染细胞内有βG基因高表达,100μmol/L DOX-GA3作用于亲本细胞3d,生存率为82%,但可杀死全部转染细胞,IC50GRC-1/βG为1.24μmol/L,而IC50GRC-1为100μmol/L以上,将转染细胞和亲本细胞以不同比例混合时,转染细胞占20%,有80%的细胞被杀死.结论建立了稳定的βG基因高表达的肾癌模型.DOX-GA3对转染细胞有明显的杀伤作用,随时间延长和剂量增加作用增强,并显示较强的旁观者效应.
- 张世睿王禾秦卫军刘贺亮温伟红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶转染自杀基因治疗旁观者效应
- 一株新的人肾癌原代细胞系的建立及其生物学特性鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:取肾癌病人标本建立一株新的人肾癌细胞系,初步对该细胞系进行鉴定,为进一步的肾癌基础研究提供实验模型。方法:2008-2009年间共采集20例肾癌新鲜手术标本,于手术后1h内将每例标本切取四块0.5cm×0.5cm×0.5cm组织块,分别包埋于2只裸鼠的右后肢皮下及背部皮下,连续传代3次,取移植瘤体外培养,记录细胞株的生长曲线,测定细胞集落形成率,对细胞进行DNA含量测定,进行染色体分析及病理学检查。结果:其中1只裸鼠皮下移植瘤生长,继续传代,肿瘤生长速度明显加快。取移植瘤标本体外培养得到肾癌细胞系XJG-9201。形态结构,分化程度与原发瘤一致,染色体众数为65。细胞群体倍增时间为38.2h,细胞周期分析G1期62.7%,G2期11.2%,S1期25.3%,集落形成率为70%。结论:肾癌细胞系XJG-9201与原发癌保持相同的生物学特性,体外连续传代1年以上传115代。细胞形态不变,生长周期恒定,已成为一个稳定的细胞系。
- 郑甲王龙信师长宏秦卫军袁建林王禾
- 关键词：肾细胞癌细胞系细胞
