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Immune Responses to Six Synthetic Peptides of Capsid Protein with Sera from HIV-1 Infected Individuals被引量：1: 2005年; Many B cell epitopes within p24 of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) were identified, while most of them were determined by using murine monoclonal antibodies reacting with overlapping peptides of p24.Therefore these epitopes may not represent the actual epitopes recognized by the HIV-1 infected individuals. In the present study, immune responses of 67 HIV-1 positive sera from Yunnan Province, China to five peptides on p24 of HIV-1 and one of HIV-2 were analyzed. All of 67 sera did not recognize peptide GA-12 on HIV-1 and peptide AG-23 on HIV-2, which indicated that GA-12 was not human B cell epitope and AG-23 did not cross-react with HIV-1 positive serum. Except 13 sera (19.4%), all remaining sera did not recognize peptides NI-15, DR-16, DC-22and PS-18, which indicated that these four peptides represented B cell linear epitopes of HIV-1 p24 in some HIV-1infected individuals but not the immuno-dominant epitopes in most individuals.; Guangjie LiuLiumeng YangJianhua WangGaohong ZhangXiangmei ChenYongtang Zheng; 关键词：缩氨酸衣壳蛋白 HIV-1 爱滋病病毒

蛋白激酶C在H IV复制中的作用与药物发现被引量：7: 2005年; 蛋白激酶C(PKC)是一类磷脂依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,PKC在中枢神经系统疾病及心血管紊乱等多种人类疾病中都发挥了重要作用。研究发现,PKC可以通过多种途径刺激H IV病毒的活化,并磷酸化病毒复制周期中的多种蛋白,如P17gag、Nef、Rev和V if等,这些蛋白的磷酸化在病毒复制周期中起到了不可忽视的作用。了解PKC与H IV及细胞间的复杂关系,开发抑制PKC蛋白激酶的药物从而达到抑制H IV复制的目的,或激活PKC从而减少或消除体内潜伏的H IV病毒库是对PKC在抗H IV研究中应用提出的两个主要方向,对于开发新型抗H IV药物有重要意义。; 张高红唐宏郑永唐; 关键词：蛋白激酶C HIV 信号转导磷酸化

红花五味子甲素的分离纯化及其抗HIV-1活性的研究被引量：14: 2006年; 目的:从红花五味子果实中寻找活性代谢产物,研究其抗HIV1活性和作用机制。方法:通过合胞体抑制、HIV1感染细胞保护、HIV1p24抗原测定、融合阻断、逆转录酶和蛋白酶活性分析等实验,检测分离化合物的抗HIV1活性并探讨其作用机制。结果:红花五味子甲素能够抑制病毒诱导的合胞体形成,保护病毒感染细胞,抑制病毒在细胞内的复制。对HIV1感染细胞与正常CD+4细胞间的融合,逆转录酶活性有一定的抑制作用。但是红花五味子甲素不抑制病毒在慢性感染细胞中的复制,也不抑制蛋白酶的活性。结论:首次从天然产物中分离得到红花五味子甲素,它对HIV1病毒复制早期具有抑制作用。; 田仁荣肖伟烈杨柳萌王睿睿孙汉董刘乃发郑永唐; 关键词：天然化合物抗HIV药物 HIV-1

高效液相色谱法测定桔梗中皂苷类物质被引量：3: 2009年; 采用高效液相色谱法测定桔梗中10种主要的皂苷类物质，桔梗样品经甲醇（60＋40）溶液超声振荡提取后，过WatersSpe-Pak—C18固相萃取柱富集浓缩，以10mL·minl的流速，用甲醇（60＋40）溶液将皂苷类物质从固相萃取柱上洗脱下来。以ZORBAXStableBoundC18（4．6mmX100mm，1．8μm）为快速分离柱，水和乙腈为流动相梯度洗脱，用蒸发光散射检测器检测。峰面积与10种皂苷类物质的质量浓度呈线性关系，方法检出限（3S／N）在0．3～O．8mg·L-1之间。采用标准加入法做回收率试验，回收率在84％～106％之间，相对标准偏差（n=5）小于5％。; 冯伟博杨光宇雷春胡秋芬戴云; 关键词：高效液相色谱固相萃取皂苷桔梗

具有避孕作用的杀微生物剂被引量：13: 2005年; 杀微生物剂是近年来发展起来的一种阴道或宫颈局部用药以防止性传播疾病的药物制剂。理想的杀微生物剂应安全、高效、廉价和稳定。杀微生物剂不一定都具有杀精子作用,兼有杀精子作用的杀微生物剂是目前的研究热点。目前研制中的杀微生物剂共有62种,其中大约有22种兼有杀精子和避孕作用,根据作用机制将这些具有避孕作用的杀微生物剂分为5类。杀微生物剂的研发面临着一些困难,但具有潜在的应用前景和广泛市场。; 王睿睿葛争鸣马丽郑永唐; 关键词：杀微生物剂避孕杀精子剂

HIV-1蛋白酶的表达、纯化及其抑制剂体外筛选方法的建立被引量：4: 2006年; 从HIV-1IIIB病毒RNA经RT-PCR得到HIV-1蛋白酶编码序列,克隆到pet28a质粒中构建HIV-1蛋白酶表达载体。阳性克隆转染E.coliBL21DE3,经IPTG诱导,蛋白酶以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白量的40%。包涵体经TritonX-100洗涤后溶解于8M尿素,溶解后的蛋白溶液经sephacyls-200H.R分子筛柱纯化后纯度达到90%以上,收集蛋白酶峰稀释复性并通过超滤进行浓缩。经检测,纯化的蛋白酶具有较高的活性。用荧光标记的蛋白酶底物检测不同浓度indinavir对蛋白酶活性的影响,表明该方法可以用于蛋白酶抑制剂的筛选。; 王云华王睿睿杨柳萌李健峰徐维明郑永唐; 关键词：HIV-1 蛋白酶纯化抑制剂

小花五味子中抗HIV活性的木脂素类化合物(英文)被引量：10: 2005年; 目的:从小花五味子中发现具有抗HIV活性的化学成分。方法:采用多种柱层析分离进行化合物的分离和纯化,通过波谱分析鉴定化合物的结构,化合物的抗HIV 1活性通过对HIV 1感染C8166细胞致细胞病变的抑制试验得到。结果:从小花五味子的茎藤部分分离得到了4个木脂素,分别鉴定为micrantherinA(1),gomisinK3(2),gomisinG(3)和vladinolF(4)。化合物4具有显著的抗HIV 1活性,IC50=3.51μg/mL,选择指数为27.45。结论:化合物1为新的木脂素, 化合物4的抗HIV 1活性值得进一步研究。; 李蓉涛韩全斌郑永唐王睿睿杨柳萌彭丽艳肖伟烈孙汉董; 关键词：五味子科木脂素抗HIV活性

顶体反应抑制剂4'-乙酰胺苯基4-胍基苯甲酸酯(AGB)具有阻断HIV-1进入细胞的作用被引量：1: 2005年; 目的:研究4'-乙酰胺苯基4-胍基苯甲酸酯(AGB)抗HIV-1活性及作用靶点。方法:通过AGB对宿主细胞的毒性实验、合胞体抑制实验、融合阻断实验、对HIV-1感染细胞的保护作用实验和对HIV-1急性感染细胞p24抗原产生的抑制作用等试验,观察AGB对HIV-1复制的影响和作用机制。结果:AGB抑制HIV-1IIIB诱导C8166细胞形成合胞体,EC50为39.5μg/ml;抑制HIV-1感染细胞上清中HIV-1p24抗原的表达,EC50为33.36μg/ml;阻断HIV-1慢性感染H9细胞与正常C8166细胞间融合的作用。结论:AGB具有阻断HIV-1进入宿主细胞的作用,是一种有前景的具杀精子作用的杀微生物剂。; 王睿睿王茜葛争鸣郑永唐; 关键词：AGB HIV-1 杀微生物剂

槐花提取化合物K3体外抗HIV-1活性的研究被引量：17: 2006年; 目的:研究槐花提取化合物K3的体外抗H IV-1活性,并对其抗H IV-1机制进行初步探讨。方法:采用MTT比色法检测化合物对各种细胞的毒性。用合胞体形成计数法,p24抗原捕获ELISA法及RT-PCR等多种方法研究化合物体外抗H IV-1活性。结论:槐花提取化合物K3体外有较好的抗H IV-1活性,能够抑制病毒实验株(H IV-1ⅢB,耐药株(H IV-174V)和临床分离株(H IV-1KM018)等多种病毒株的复制,且其作用机制是多靶点的,不仅可以抑制病毒的进入,还可以抑制H IV-1逆转录酶活性。; 张高红郑永唐; 关键词：HIV-1 进入抑制剂逆转录酶

基质固相分散-高效液相色谱法测定五味子中尼哥纳乐酸被引量：1: 2009年; 提出了基质固相分散-高效液相色谱法测定五味子中的尼哥纳乐酸的方法。将样品与硅胶以质量比1比4混合研磨后装入固相萃取柱，用纯的二氯甲烷以5mL·min^-1的流量淋洗，以除去共存干扰物。用二氯甲烷-丙酮（9＋1）混合液将尼哥纳乐酸从固相萃取柱上洗脱，吹氮浓缩后，以ZORBAX Stable Bound C_18（4．6mm×100mm，1．8μm）快速分离柱为固定相，甲醇-水（82＋18）为流动相，用蒸发光散射检测器检测。峰面积与尼哥纳乐酸的质量浓度在2．0～400．0mg·L^-1范围内呈线性关系，检出限（3S／N）为20μg·L^-1。用此法分析五味子样品，所得结果的相对标准偏差（n=7）小于2．0％，标准加入回收率在96．8％～101．5％之间。; 冯伟博杨光宇雷春胡秋芬戴云; 关键词：高效液相色谱法蒸发光散射检测器五味子

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国家高技术研究发展计划(2003AA219142)

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