国家自然科学基金(30772422)
- 作品数：8 被引量：23H指数：4
- 相关作者：刘磊田卫东张勇李晓宇肖金刚更多>>
- 相关机构：四川大学四川大学华西口腔医院泸州医学院附属口腔医院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金四川省杰出青年学科带头人基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- microRNA-16在脂肪基质细胞脂向分化过程中的表达变化被引量：5
- 2009年
- 背景:触发和控制脂肪基质细胞脂向分化的调控研究将有助于人为控制脂肪基质细胞的分化方向,促进对细胞分化的深入了解。目的:了解脂肪基质细胞脂向分化过程中microRNA-16的表达变化情况。设计、时间及地点:观察对比试验,2007-10/2008-03在四川大学口腔疾病研究国家重点实验室完成。材料:出生30d雄性体健SD幼鼠8只。成脂诱导培养液[DMEM培养液中加入地塞米松(1μmol/L)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(0.5mmol/L)、胰岛素(10mg/L)]。方法:从SD幼鼠体内取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞,采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养,并以未诱导的细胞为对照。主要观察指标:应用microRNA芯片技术检测脂肪基质细胞脂向诱导后7d和未诱导microRNA-16的表达差异。采用实时定量PCR检测microRNA-16在脂肪基质细胞脂向分化前后表达量变化。结果:①成功获得纯度较高的脂肪基质细胞,成功诱导其脂向分化,诱导培养后7d观察到细胞形态学上表现出典型的脂肪细胞改变:细胞相互融合,成片生长,变为细长纺锤形;PPARγ免疫细胞化学染色呈阳性;油红O染色脂滴被染成橙红色。②成脂诱导前后microRNA-16表达明显下调,诱导前microRNA-16表达量为90.25。诱导后microRNA-16表达量为56.75,③实时定量PCR结果显示microRNA-16表达显著下调,与microRNA芯片结果一致。结论:PCR及芯片结果一致支持microRNA-16在脂肪基质细胞脂向分化过程中表达显著下调,可能在脂肪基质细胞脂向分化过程参与调控。
- 李明恒张勇李晓宇田卫东刘磊
- 关键词：脂肪基质细胞
- miRNA-22在脂肪基质细胞体外脂向分化过程中的表达被引量：1
- 2009年
- 背景:脂肪基质细胞在特定条件下可以向脂肪细胞分化,然而,脂肪基质细胞脂向分化的分子机制仍不明确!目的:明确miRNA在脂肪基质细胞脂向分化过程中是否发挥作用及其可能机制。设计、时间及地点:观察对照试验,于2007-10/2008-03在四川大学口腔疾病研究国家重点实验室完成。材料:出生30d健康雄性SD幼鼠8只,取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞。方法:采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养。建立脂肪基质细胞体外脂向分化细胞模型,采用miRNA芯片技术筛选脂肪基质细胞向脂肪细胞方向分化的相关miRNA,使用实时定量聚合酶链反应技术对芯片结果进行验证。主要观察指标:①细胞形态学。②PPARγ免疫细胞化学染色和油红O染色。③miRNA芯片结果。④实时定量聚合酶链反应结果。结果:①经显微镜下观察、油红O染色及PPARγ免疫细胞化学染色检测证实脂肪基质细胞已经脂向分化。②miRNA芯片发现诱导组中miRNA-22的表达量呈下降趋势。③实时定量聚合酶链反应结果证实miRNA-22的表达量与对照组相比显著减少(P<0.05)。结论:miRNA-22在脂肪基质细胞脂向分化后的表达有显著降低,提示miRNA-22可能参与脂肪基质细胞的脂肪分化调控过程,生物信息学分析提示,该过程可能通过对其靶基因MAPK7(ERK5)的调控而实现。
- 唐彦峰陈建霖肖金刚张勇李晓宇田卫东刘磊
- 关键词：脂肪基质细胞成脂分化
- 脂肪基质细胞脂向分化过程中MicroRNA-134的表达变化被引量：5
- 2009年
- 目的了解脂肪基质细胞(ADSCs)脂向分化过程中MicroRNA-134(miR-134)表达变化情况,深入了解ADSCs脂向分化的分子调控机制,为脂肪组织工程的研究和发展奠定基础。方法(1)采取出生30d的雄性体健SD(Sprague-Dawley)幼鼠的腹股沟脂肪组织,用密度梯度离心结合贴壁培养法分离、纯化后诱导培养大鼠脂肪基质细胞(ADSCs)7d,设置未诱导组以对照。(2)应用miRNA芯片技术比较诱导组和未诱导组的miR-134表达差异。(3)用实时定量PCR定量验证ADSCs脂向分化前后miR-134表达差异。结果(1)成功分离、纯化、培养ADSCs,诱导组培养7d后观察到典型脂肪细胞特征,细胞形态学上表现为细胞相互融合,成片生长,呈细长纺锤形,大量脂滴形成;PPARγ免疫细胞化学染色呈阳性;油红O染色脂滴被染成橙红色。(2)成脂诱导前后miR-134表达明显下调,其中诱导修正值2054.5,无诱导修正值2855.25。(3)实时定量PCR结果亦显示miR-134表达显著下调,与miRNA芯片结果一致。结论miR-134在ADSCs脂向分化过程中miR-134表达显著下调,可能参与调控ADSCs的脂向分化。
- 王黎张勇李晓宇刘磊
- 关键词：脂肪基质细胞MIRNA芯片实时定量PCR
- 脂肪干细胞脂向分化过程中miRNA-27b表达的研究被引量：7
- 2009年
- 目的:探讨与脂肪干细胞脂向分化密切相关的microRNA(miRNA)表达情况,为阐明脂肪干细胞脂向分化的调控机制提供新的线索。方法:采用Ⅰ型胶原酶消化法结合密度梯度离心获得脂肪干细胞,将第3代细胞采用脂向诱导液(α-MEM培养基内加入100mL/L胎牛血清、1μmol/L地塞米松、10μmol/L胰岛素、200μmol/L吲哚美辛和0.5mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)进行脂向诱导;分别应用miRNA芯片技术及实时定量PCR技术对脂肪干细胞脂向分化中的miRNA-27b表达情况进行检测,分析miRNA-27b的变化趋势,并结合生物信息学方法探讨miRNA-27b与脂肪干细胞脂向分化相关的生物学功能。结果:建立了脂肪干细胞体外脂向分化的模型,miRNA芯片及实时定量PCR结果均表明miRNA-27b在脂肪干细胞体外脂向分化过程中表达显著下调。结论:miRNA-27b可能与脂肪干细胞的脂向分化密切相关,并可能通过调控其靶基因PPARγ的表达而促进脂肪干细胞的脂向分化。
- 肖金刚陈建霖李晓宇张勇田卫东刘磊
- 关键词：干细胞脂肪组织小分子干扰聚合酶链反应
- PPARγ天然激动剂的研究进展被引量：6
- 2009年
- 过氧化物酶体增殖剂活化受体γ(PPARγ)是一个由配体激活的核转录因子,属于核激素受体(nuclear hormone receptor)超家族。它与脂肪形成、免疫应答以及脂质和糖类代谢等生理过程极其相关。尽管PPARγ的合成激动剂已广泛应用于胰岛素致敏剂,但是PPARγ的天然激动剂的鉴定一直不是很清楚,目前,PPARγ的天然激动剂主要有氧化的脂肪酸和硝基脂肪酸,包括9-羟十八碳二烯醇(9-HODE),13-羟十八碳二烯醇(13-HODE),5-脱氧前列腺素J2,油酸和亚油酸的硝基衍生物(分别为OA-NO2和LNO2)等.本文综述了近年的PPARγ的天然激动剂的研究进展。
- 廖丽姿刘磊田卫东
- 关键词：PPARΓ
- 脂肪基质细胞脂向分化过程中MicroRNA-21的表达变化被引量：3
- 2009年
- 目的:了解脂肪基质细胞(ADSCs)在脂向分化过程中MicroRNA-21(miRNA-21)表达变化情况。方法:从8只出生30d雄性体健SD幼鼠体内取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞,采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养,并以未诱导的细胞为对照。成脂诱导培养液[DMEM培养液中加入地塞米松(1μmol.L-1)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(0.5mmol.L-1)、胰岛素(10mg.L-1)]。应用microRNA芯片技术检测脂肪基质细胞脂向诱导后7d和未诱导microRNA-21的表达差异。采用实时定量PCR检测microRNA-21在脂肪基质细胞脂向分化前后表达量变化。结果:经显微镜下观察、油红O染色及PPARγ免疫细胞化学染色检测证实脂肪基质细胞已经脂向分化,miRNA芯片及实时定量PCR结果均表明miRNA-21在脂肪基质细胞体外脂向分化过程中表达显著下调。结论:miRNA-21在脂肪基质细胞脂向分化后的表达有显著降低,可能参与调控ADSCs的脂向分化过程。
- 王伟新张勇李晓宇龙洁田卫东汤炜王杭郑晓辉刘磊
- 关键词：MICRORNA-21脂肪基质细胞实时定量PCR
- 小鼠下颌切牙胚发育的动态组织学观察被引量：2
- 2009年
- 目的:牙齿发育生物学研究是当今口腔医学领域研究的热点,国内外对切牙胚发育机制的研究仍较少见。本研究对小鼠切牙胚发育过程进行动态观察,从细胞水平上了解切牙胚存在的时空位置和形态变化规律。方法:选取孕12、13、14、15、16、17、18天胎鼠及新生1、2、3天乳鼠,在体视显微镜下观察含有切牙胚的颌骨,并分离取得下颌骨,常规固定包埋,进行连续切片及HE染色,在光学显微镜下进行动态观察,了解切牙胚发育大小和形态的时空变化规律。结果:观察发现小鼠切牙胚位于下颌突内,牙胚由远中向近中斜向上前方走行,牙胚前端表面被一层矿化的硬组织覆盖;发现E13d胎鼠切牙胚发育进入蕾状期,E16d的胎鼠切牙胚处于帽状期,E18d的胎鼠切牙胚处于钟状早期,新生1d的乳鼠切牙胚处于钟状晚期。结论:本实验明确了小鼠切牙胚发育的时空变化规律,为进一步阐明小鼠切牙胚发生发育机制奠定了重要的实验基础。
- 冯志远刘磊杨苗苗张勇林云锋田卫东
- 关键词：牙齿发育口腔医学
- 脂肪基质细胞骨向诱导分化的研究进展
- 2008年
- 脂肪基质细胞(ADSCs)是目前骨组织工程的理想种子细胞,诱导其定向成骨分化是该领域的研究热点。脂肪基质细胞定向成骨诱导的方法主要有改变ADSCs所处的微环境、修饰ADSCs内部基因等。本文对脂肪基质细胞骨向诱导分化的研究进展进行综述。
- 管晓光刘磊
- 关键词：骨组织工程脂肪基质细胞骨向分化
