湖南省教育厅重点项目(06A028)
- 作品数：4 被引量：24H指数：2
- 相关作者：刘毅徐平源刘国华李芬陈文承更多>>
- 相关机构：湖南农业大学湖南生物机电职业技术学院湖南省畜禽水产品质量检验检测中心更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅重点项目长沙市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 湖南地区边缘无浆体的MSP4基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2010年
- 本研究旨在阐明边缘无浆体(A.marginale)MSP4基因的遗传变异情况。应用PCR扩增A.marginale虫株的MSP4基因的部分序列(pMSP4),将其克隆至pGEM-T载体,重组质粒经菌落PCR鉴定及序列分析,结果表明来自湖南省的6株边缘pMSP4的序列长度均为530bp,与GenBank中登录的A.marginale相应序列相似性在98.3%以上,与其它无浆体的差异大于9.7%。由于A.marginale pMSP4序列种内相对保守,种间差异较大,因此,可作为种间遗传变异研究的标记。本研究为A.marginale的分子流行病学调查等提供了实验依据。
- 徐平源何德肆刘国华陈文承宋海燕彭运潮刘毅
- 关键词：边缘无浆体
- 湖南省鸡蛔虫线粒体cox1和nad1基因的序列测定及种系发育分析被引量：14
- 2010年
- 本研究旨在阐明湖南省鸡蛔虫分离株线粒体细胞色素c氧化酶第I亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位l基因(nad1)部分序列(pnad1)的遗传变异情况,并用pcox1和pnad1序列构建鸡蛔虫与其它科蛔虫的种群遗传关系。作者应用聚合酶链反应(PCR)扩增鸡蛔虫虫株的pcox1和pnad1,应用ClustalX1.81程序对序列进行比对,然后用Phylip3.67程序MP法和Mega4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树。所获得的pcox1和pnad1序列长度均为394和408bp,种系发育树表明,20个分离株鸡蛔虫位于同一分枝。由于鸡蛔虫pcox1和pnad1序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记。本研究系首次报道鸡蛔虫的pcox1和pnad1序列,从而为鸡蛔虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础。
- 伍慧兰谭美英刘国华李芬徐平原罗冬生刘毅
- 关键词：鸡蛔虫线粒体DNA
- 黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析被引量：6
- 2012年
- 本研究旨在阐明黄鳝胃瘤线虫湖南分离株的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)及5.8SrDNA序列的遗传变异情况,并用ITS序列重构胃瘤线虫与其它线虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增胃瘤线虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果显示所获得的胃瘤线虫ITS及5.8SrDNA序列总长存在一定差异(922～927bp),其中包含部分的18S、28S及全部的ITS-1(350～351bp)、5.8S(102bp)及ITS-2(340～344bp)序列。本研究系国内首次报道胃瘤线虫的ITS序列,其结果为黄鳝胃瘤线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础。
- 段柳春刘伟徐平源何鑫周小军刘智连郑艳琼刘毅
- 关键词：黄鳝
- 边缘无浆体SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2011年
- 根据GenBank中边缘无浆体的MSP4基因序列(EU677383)设计2对引物(AmspF3/R3和Am-spF4/R4)并克隆MSP4部分基因,构建含有MSP4基因的标准质粒,以AmspF3/R3为引物进行荧光定量PCR,建立了边缘无浆体的MSP4SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法,并用于临床血样检测。结果显示,该方法可以检测到1×102 copies/μL的标准质粒DNA,该方法对绵羊无浆体、附红细胞体、东方巴贝斯虫、组织滴虫提取的DNA均为阴性反应。结果表明,该方法与常规PCR方法比较,阳性及阴性符合率都为100%,且具有敏感、重复性好、无污染特性,并具有能准确定量的特点,说明该方法具有很好的应用前景和研究价值。
- 何德肆徐平源陈文承李芬胡涛彭运潮刘毅
- 关键词：边缘无浆体
