江苏省自然科学基金(BK2008122)
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
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- Ki67基因干扰对裸鼠人肾癌细胞移植瘤的抑制作用
- 2009年
- 目的：探讨靶向Ki67基因干扰腺病毒（Ad—Ki67）对裸鼠人肾癌移植瘤Ki-67基因表达和肿瘤生长的影响。方法：建立人肾癌移植瘤模型，瘤体内注射Ad—Ki67，定期测量肿瘤体积，激光共聚焦显微镜观察移植瘤组织Ki-67抗原表达，原位末端标记法（TUNEL）检测肿瘤细胞凋亡。结果：Ad—Ki67能将Ki67基因有效沉默，Ad—Ki67组和Ad—EGFP组Ketr-3细胞Ki-67抗原表达水平分别为对照组的（78．7±6．5）％、（95．4±8．6）％；与对照组细胞凋亡阳性率（10．7±2．4）％比较，Ad—Ki67、Ad—EGFP组分别为（43．7±3．6）％和（21．8＋2．5）％，表明Ad—Ki67能有效诱导肿瘤细胞凋亡；Ad—Ki67能显著抑制肿瘤的生长，接种5周后Ad—Ki67组肿瘤体积为（469．5±41．6）mm2，Ad—EGFP组为（664．3．5±47．8）mm2，PBS组为（884．9±52．5）mm2。结论：靶向Ki67基因的干扰腺病毒Ad—Ki67对裸鼠肾癌移植瘤有显著的治疗效果，为治疗肾癌提供新的平台。
- 毛立军郑骏年李望温儒民陈家存孙晓青
- 关键词：KI67基因腺病毒载体肾癌
- SATB1、hTERT基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：10
- 2011年
- 目的探讨特异性核基质结合区结合蛋白-1（SATB1）、人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学技术检测前列腺癌和前列腺增生症组织中SATBl、hTERT基因的表达。结果60例前列腺癌组织SATB-1阳性表达率86．7％，而30例前列腺增生组织中无阳性表达，差异有统计学意义（P〈0．01）；其中，前列腺癌转移组100．0％阳性表达，而未转移组73．3％阳性表达，SATB-1表达在有无转移组间差异有统计学意义（P〈0．01）。前列腺癌组织中hTERT阳性表达率为88．3％，前列腺增生组织中阳性率为20．0％，差异有统计学意义（P〈0．01）；而前列腺癌转移组和未转移组hTERT阳性率分别为90．0％和86．7％，差异无统计学意义（P〉0．05）。相关分析提示，前列腺癌和前列腺增生组织中SATB-1蛋白与hTERT蛋白表达无明显相关。结论SATB1、hTERT基因的表达可能与前列腺癌的发生和转移相关，联合检测SATB1、hTERT基因对评价前列腺癌进展有一定的临床意义。
- 毛立军李望杨春华王军起陈家存郑骏年
- 关键词：前列腺癌HTERT基因
- 干细胞介导溶瘤腺病毒治疗脑胶质瘤研究进展
- 2011年
- 溶瘤腺病毒治疗具有肿瘤特异性、安全性和反复表达治疗基因等特点，通过溶瘤腺病毒治疗胶质细胞瘤已获得令人鼓舞的成果，但局部应用溶瘤腺病毒无法作用于散在分布的肿瘤细胞，影响了治疗效果。干细胞对脑胶质瘤具有内在趋化作用，介导溶瘤腺病毒治疗胶质瘤可进一步提高疗效。
- 杨春华毛立军
- 关键词：干细胞腺病毒科神经胶质瘤
- SATB1基因与细胞凋亡的研究进展
- 2012年
- SATB1是一种组织特异性表达的核基质序列特异性结合蛋白,参与染色质高级结构的形成和组织特异性基因的表达调控,在免疫调节、肿瘤转移和凋亡方面发挥着重要的作用。本研究就SATB1基因与细胞凋亡的研究进展作一综述。
- 张宁毛立军温儒民
- 关键词：SATB1细胞凋亡B1基因组织特异性表达序列特异性特异性基因
- 细胞荷载溶瘤病毒
- 2011年
- 溶瘤病毒是一类仅在肿瘤细胞内特异增殖的新型病毒载体，具有高度的肿瘤靶向性和良好的转染率。局部注射溶瘤病毒治疗体表肿瘤已获得显著疗效，但全身应用后机体的免疫防御机制明显限制了溶瘤病毒的治疗效果。细胞荷载溶瘤病毒可能是克服这一瓶颈的有效策略，为治疗肿瘤提供了新的平台。
- 徐尊佑毛立军陈家存
- 关键词：溶瘤病毒肿瘤
- 靶向肿瘤干细胞的条件增殖腺病毒研究进展
- 2010年
- 肿瘤干细胞（CSC）具有自我更新及分化潜能，是肿瘤生长和转移的源泉，与化放疗抵抗密切相关，能否彻底根除CSC决定肿瘤治疗的成败。条件增殖腺病毒（CRAd）是一类仅在肿瘤细胞内特异增殖的新型病毒载体，可同时靶向肿瘤细胞和肿瘤干细胞，为彻底治愈肿瘤带来曙光。
- 奈兰州毛立军陈家存
- 关键词：肿瘤干细胞基因治疗
- 荷载β-actin、GAPDH基因小干扰RNA的双调控增殖腺病毒的构建
- 2009年
- 目的构建hTERT启动子调控的表达β—actin、GAPDH基因小干扰RNA（siRNA）的条件增殖腺病毒。方法分别将β—actin—siRNA、GAPDH—siRNA的模板DNA克隆至质粒pGPH1／GFP／Neo，构建pGPH1／GFP／Neo—β-actin、pGPH1／GFP／Neo—GAPDH。以pGPH1／GFP／Neo-β—actin为模板，PCR扩增出β—actin—siRNA表达框并克隆进质粒pZHTERT，获得pZHTERT—β—actin；以pGPH1／GFP／Neo-GAPDH为模板，扩增出GAPDH表达框并克隆进质粒pZD55，获得pZD55-GAPDH。将pZHTERT—β—actin、pZD55-GAPDH重组，构建穿梭质粒pTD—GAPDH—β—actin，并与腺病毒右臂质粒pBHGE3共转染293细胞，9～12d后出现病毒空斑，提取重组腺病毒的DNA、聚合酶链反应（PCR）鉴定正确者即为双调控增殖腺病毒TD—GAPDH—β—actin。扩增、纯化、测病毒滴度。结果成功构建hTERT启动子调控的表达GAPDH、β—actin小干扰RNA的条件增殖腺病毒。病毒滴度为2×10^11PFU／ml。结论成功构建了TD—GAPDH—β—actin，为研究双基因小干扰RNA靶向治疗肿瘤奠定了基础。
- 马武剑毛立军韩正祥徐为李海龙刘俊杰顾玉明郑骏年
- 关键词：启动子RNA干扰
- 靶向前列腺癌并携带SATB1基因shRNA溶瘤腺病毒的构建被引量：7
- 2010年
- 目的:构建DD3启动子调控并携带SATB1基因shRNA溶瘤腺病毒,研究其对前列腺癌的特异抗肿瘤作用。方法:以pSilencer3.1-SATB1为模板,通过PCR扩增出SATB1-shRNA表达框并克隆至pZD55载体,构建重组质粒pZD55-SATB1-shRNA。EcoRⅤ和XbaⅠ分别酶切pZD55-SATB1-shRNA和pZXC2-DD3-E1A,将目的片段连接重组,获得质粒pDD3-ZD55-SATB1,将其与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染293细胞。PCR鉴定正确者即为溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1。扩增,纯化,测病毒滴度。结晶紫染色观察对前列腺癌细胞毒性;Western印迹检测E1A在列腺癌细胞中的表达;RT-PCR和Western印迹检测列腺癌细胞中SATB1基因沉默效果。结果:成功构建DD3启动子调控同时携带SATB1-shRNA的溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1,初步证实DD3-ZD55-SATB1复制具有高度的前列腺癌靶向性和特异的SATB1基因沉默效果。结论:成功构建的溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础。
- 毛立军郑骏年李望王军起陈家存孙晓青
- 关键词：RNA干扰溶瘤腺病毒前列腺癌
- 呼肠孤病毒治疗肿瘤研究进展
- 2010年
- 呼肠孤病毒（Reovirus）是一种溶瘤病毒，既可以通过活化Ras通路在肿瘤细胞中特异性增殖，但又很少致病。临床前研究表明呼肠孤病毒对很多不同组织类型肿瘤具有抗肿瘤作用。进一步临床研究证实，局部和全身应用呼肠孤病毒具有良好的安全性，同时单一及联合放、化疗也获得令人鼓舞的抗肿瘤效果。高度的安全性和潜在的抗肿瘤效果，使呼肠孤病毒可能成为治疗恶性肿瘤新载体。
- 黄金叶毛立军陈家存
- 关键词：呼肠孤病毒科溶瘤病毒肿瘤
- 沉默SATB1基因对前列腺癌DU145细胞侵袭力的影响被引量：4
- 2011年
- 目的通过RNA干扰（RNAi）沉默特异性核基质结合区结合蛋白-1（SATB1）基因的表达，观察对前列腺癌DU145细胞增殖及侵袭力的影响。方法构建SATB1基因特异性短发卡RNA（shRNA）表达载体pGPH1／GFP／Neo-SATB1，用Lipofectamine^TM2000将pGPH1／GFP／Neo—SATB1转染人前列腺癌DU145细胞，以空质粒pGPH1／GFP／Neo及未转染的细胞作对照。在转染后24、48、72h收集样本，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测SATB1mRNA表达、噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞的增殖、Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果PCR及测序鉴定表明质粒pGPH1／GFP／Neo—SATB1构建成功。转染pGPH1／GFP／Neo—SATB124、48、72h后，DU145细胞SATB1mRNA表达水平为（53．0±4．0）％、（49．3±3．1）％、（34．1±4．3）％，M1Tr表明：pGPH1／GFP／Neo—SATB1组细胞增殖抑制率均显著低于空质粒组、未转染细胞组；Transwell侵袭实验结果显示，转染pGPH1／GFP／Neo—SATB1组侵袭细胞数为34．2±4．2，显著低于两对照组（P〈0．05）。结论靶向SATB1基因的RNA干扰可抑制前列腺癌DU145细胞增殖和侵袭力。
- 毛立军王逢义李望王军起郑骏年陈家存
- 关键词：前列腺癌细胞侵袭
