国家自然科学基金(30872913)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 相关作者：丁寅章斌曹猛倪华李静更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学口腔医院南京医科大学附属南京儿童医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去势大鼠骨髓基质干细胞分离培养鉴定及增殖特性的变化被引量：1
- 2009年
- 目的:对去势大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)进行分离培养鉴定,研究去势后大鼠BMSCs增殖特性的变化.方法:以去势大鼠作为绝经后骨质疏松症模型,分为去势组和假手术组.密度梯度离心分离骨质疏松大鼠的BMSCs,利用BMSCs的多向分化培养及流式细胞仪分析对去势大鼠BMSCs进行鉴定,倒置相差显微镜观察细胞增殖情况,MTT法测量两组BMSCs增殖能力.结果:去势组大鼠体质量、雌二醇及整体股骨骨矿物质密度(BMD)与假手术组比较差异有显著性(P<0.01),诱导培养后两组大鼠BMSCs油红O染色和VonKossas染色实验阳性,流式细胞仪显示骨髓间充质细胞具有的表面抗原CD29和CD44阳性而造血干细胞具有的表面抗原CD45和CD133为阴性.MTT法测定在7d内,去势组细胞的增殖速率要高于假手术组.结论:成功建立了大鼠骨质疏松模型.采用成骨诱导和成脂诱导也进一步证实了所分离的细胞为具有多向分化潜能的BMSCs.去势后3mo大鼠BMSCs增殖能力增强.
- 章斌丁寅曹猛倪华
- 关键词：卵巢切除术骨髓基质干细胞体外培养增殖
- 骨髓间充质干细胞联合纤维蛋白胶修复大鼠牙槽骨缺损的研究被引量：6
- 2011年
- 目的评价骨髓间充质干细胞(BMSCs)和纤维蛋白胶(FG)作为种子细胞和支架材料修复大鼠牙槽骨缺损的效果。方法 30只SD大鼠随机分成A、B组,建立SD大鼠上颌牙槽骨缺损模型,联合植入BMSCs和FG复合物,A组对照侧单纯植入FG,B组对照侧为空白对照。利用上颌骨实验区切片苏木精-伊红染色及Micro-CT扫描观察成骨效应。结果苏木精-伊红染色切片显示:术后3周可见实验侧骨小梁形成,对照侧无明显骨修复;术后6周可见实验侧新骨形成增加,对照侧只有纤维组织修复。Micro-CT扫描表明实验侧成骨修复明显优于对照侧。结论应用BMSCs联合FG可较好地修复大鼠牙槽骨缺损,是修复小范围骨缺损理想的种子细胞与支架材料。
- 张亮丁寅邵金陵董金山
- 关键词：骨髓间充质干细胞纤维蛋白胶牙槽骨缺损
- 抑制骨髓基质干细胞雌激素受体β基因表达的有效序列
- 2011年
- 背景:雌激素受体β是否参与介导骨髓间充质干细胞的增殖与分化需进一步实验论证。目的:以RNAi技术寻找和验证对大鼠骨髓基质干细胞雌激素受体β基因表达抑制的有效序列。方法:根据GeneBank数据库提供的SD大鼠雌激素受体β基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列。再在两条互补碱基序列的5'端分别加上BamHⅠ(GATCC)和HindⅢ(AGCTT)酶的酶切位点,最后形成两条互补的克隆入pSilencer3.1-H1载体的发夹状siRNA模板序列,进行重组载体的碱基序列测定。结果与结论:重组质粒碱基序列鉴定后,证实真核表达载构建正确。雌激素受体β特异性siRNA真核表达载体构建成功。
- 郑红李秀华殷丽华李静丁寅
- 关键词：雌激素受体ΒRNA干扰骨髓基质干细胞基因
- 17β-雌二醇对大鼠骨髓基质干细胞成骨分化初期细胞骨架的影响
- 2011年
- 目的研究17β-雌二醇（17β-estriol，17β-E2）促进体外培养的大鼠骨髓幕质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）骨向分化过程中细胞骨架的变化。方法采用全骨髓培养法体外培养大鼠BMSCs，分为阴性对照组、阳性对照组（成骨细胞诱导液）和雌激素处理组（成骨细胞诱导液＋10^-6。mol／L。17β-E2），使用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AI，P）试剂盒检测BMSCs的ALP活性，激光扫描共聚焦显微镜观察各组BMSCs成骨分化初期的细胞骨架。结果BMSCs细胞ALP活性随时间的增加而增强，雌激素处理组表达ALP活性明显高于阴性对照组和阳性对照组（P〈0．01）；细胞骨架荧光强度定量分析显示，雌激素处理组（26．56％±9．87％）较阳性对照组（18．31％±5．76％）和阴性对照组（8．12％土4．42％）明显增强（P〈0．05）。结论17β—E2可能通过早期调节细胞骨架微丝聚合改变细胞形态，从而促进骨髓基质干细胞向成骨分化。
- 李叶史亮周顺成牛忠英丁寅
- 关键词：雌二醇细胞骨架WISTAR骨基质干细胞
