国家重点基础研究发展计划(2011CB504903)
- 作品数：20 被引量：86H指数：5
- 相关作者：李琦涵刘龙丁王丽春张莹赵红玲更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院昆明医学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- EV71灭活疫苗(人二倍体细胞)在恒河猴婴猴模型中的免疫保护性分析被引量：6
- 2011年
- 肠道病毒71型作为引起儿童群体常见传染性手足口病（HFMD）的主要病原，具有导致少量感染个体出现脑炎等神经系统病变以及相关心肺功能衰竭的病理学特性．因此其预防性疫苗的研发具有重要的公共卫生意义．在前期工作的基础上，一种EV71灭活病毒疫苗（人二倍体细胞）在本研究中基于恒河猴婴猴模型进行了相应的免疫保护性分析．以160EU剂量对2～3月龄婴猴进行0，4周免疫后，动物在第4周接受了剂量为10。～CCID50的病毒经呼吸道的攻击．对病毒攻击后动物在14天内的临床症状、血液生物学、器官病原学分布以及病理学检测的动态观察表明，经疫苗免疫的动物未出现对照动物所具有的特征性临床表现，其血液生物学及病理学检测均无异常．同时，器官病原学分布亦呈阴性．结合动物中和抗体的明确增长及对照动物的综合表现分析，本文的工作证实了该EV71灭活病毒疫苗（人二倍体细胞）在恒河猴婴猴体内的免疫保护性．
- 李龙刘尚允董承红赵红玲王晶晶张莹纳锐雄谢忠平崔萍芳王丽春廖芸唐东红高家红刘龙丁李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型
- 肠道病毒71型3C蛋白表达后细胞蛋白质组差异分析
- 2011年
- 目的利用蛋白质组学技术研究肠道病毒71型(EV71)编码3C蛋白对宿主细胞蛋白表达的影响。方法在293T细胞中瞬时过表达EV71 3C蛋白,应用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)检测3C表达后293T细胞中蛋白的差异。选取表达水平有明显变化的蛋白用Western blot进行验证。结果在293T细胞中过表达3C蛋白后,可引起5个蛋白表达水平发生明显改变,其中4个蛋白表达上调,1个蛋白(HSPA4)表达下调。Western blot验证表明过表达3C可降低HSPA4的表达,HeLa细胞中HSPA4表达为对照的46.8%±10.1%(P<0.05)。结论过表达EV713C蛋白可引起细胞内蛋白表达差异。
- 雷晓波孙振民刘新蕾任丽丽王健伟
- 关键词：肠道病毒EV71蛋白质组差异
- 柯萨奇病毒A组16型感染生物学的研究进展
- 2013年
- 近年来柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16,CVA16）和肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）在我国引起了手足口病（HFMD）的暴发和流行.CVA16感染的生物学基础研究有助于提高HFMD的防治水平,为HFMD疫苗的研发提供重要依据,此文就CVA16的生物学特性及其与宿主细胞相互作用的研究进展作一综述.
- 丁东普晶孙乐
- 关键词：柯萨奇病毒肠道病毒属手足口病
- 干扰素对ICR乳鼠感染肠道病毒71型的保护作用被引量：10
- 2011年
- 目的探讨干扰素(Interferon,IFN)对ICR乳鼠感染肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的保护作用。方法将FY23-EV71感染经重组人IFNα1b和IFNλ1预处理的Vero和KMB17细胞,微量滴定法检测病毒滴度;取ICR乳鼠分为PBS对照组、EV71对照组和IFN保护组,临床观察2周,取乳鼠组织,观察病理学变化,并检测病毒含量。结果两种IFN对KMB17细胞和Vero细胞感染EV71均有保护作用,且IFNα1b的保护作用优于IFNλ1;IFN保护组乳鼠较EV71对照组乳鼠在临床表现、体重、病理变化和组织病毒含量等方面均表现出对EV71感染的保护作用。结论 IFN能抑制EV71的增殖,并对病毒致病性和组织嗜性有一定的影响。
- 范胜涛王丽春赵红玲李薇李龙刘龙丁李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型组织嗜性免疫保护
- 人肠道病毒71型与宿主相互作用研究进展被引量：2
- 2011年
- 自1969年首次从美国加利福尼亚患者分离出人肠道病毒71型（Human enterovirus 71，HEV71）后，该病毒已在世界范围内造成多次暴发流行，近年来又在中国大陆、中国台湾及其他亚太地区流行。
- 郭素杰李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型相互作用宿主
- 人肠道病毒71型感染免疫抑制恒河猴的分析被引量：5
- 2011年
- 目的:通过建立人肠道病毒71型(EV71)感染在免疫抑制恒河猴的动物模型,进一步分析人EV71在免疫抑制动物体内病毒增殖、病理变化以及病毒抗原在不同组织的表达情况。方法:按照每天15 mg/kg的剂量给8只恒河猴口服环孢菌素A连续7 d后造成其免疫抑制状态,再经呼吸道和消化道感染EV71病毒FY23株,对其进行14 d的临床观察后处死,采集各器官组织进行病毒载量检测,同时对不同的组织进行病理学分析和免疫组化分析。结果:感染EV71病毒后,免疫抑制组的临床症状、病毒载量、病理分析和免疫组化结果都明显比非免疫抑制组严重,从病毒对机体造成的影响来看呼吸系统感染较消化系统感染明显严重。结论:本实验分析了人EV71在免疫抑制动物体内病毒增殖的情况,为建立用于EV71疫苗评价的恒河猴动物模型提供了依据,并对未来的EV71疫苗的使用人群范围做出了新的限定。
- 王晶晶张雪梅赵红玲董承红普晶廖芸王丽春纳锐雄刘龙丁张莹杨丽仙王庆林沈冬王玺李琦涵
- 关键词：人肠道病毒71型恒河猴免疫抑制
- 清醒挪威褐鼠过敏性哮喘发作全程记录模型被引量：2
- 2015年
- 目的建立卵蛋白(OVA)致敏激发后,在挪威褐鼠无创且清醒的状态下,可观察和记录到过敏性哮喘发作全过程(速发相和迟发相)的动物模型。方法 66只挪威褐鼠按致敏液[OVA和Al(OH)3]不同平均分为11组,单纯注射OVA的4组(0.01、0.1、1.0和10.0 mg/只);OVA混合Al(OH)3干粉的5组(0.1+100、1.0+100、10.0+100、1.0+52和1.0+4 mg/只);OVA混合Al(OH)3胶体的1组(10.0+4 mg/只);正常对照组1组。10个致敏组分别于第0天和第5天背部皮下2点注射相应致敏液,每点注射0.2 m L,正常对照组注射等量生理盐水。在第37天雾化吸入5%OVA激发10 min。然后立即放入体积描记器中连续记录16 h呼气相延长参数(penh)值。采集第0、7、14、21、28、35、38天血清,ELISA法检测特异性Ig E含量。HE染色观察肺病理变化。结果除单纯注射OVA 0.01 mg组外,其他各组大鼠血清特异性Ig E含量均比正常对照组显著升高(P<0.05),且在致敏1周后Ig E开始大量产生,直到第5周均呈持续增长趋势。观察到了哮喘发作的速发和迟发双相气道反应,其特点表现在Penh值的显著增高,且与正常对照组相比,模型组(以OVA 10.0&Al(OH)3100、OVA 10.0&Al(OH)3gel 4组为例)的速发相/迟发相峰值、面积均显著增大(P<0.05)。模型组(以OVA 10.0&Al(OH)3100组为例)有以气道周围嗜酸性粒细胞浸润为主的炎症表现。结论成功建立了无创、清醒状态下挪威褐鼠过敏性哮喘发作全程记录模型。
- 陶婧婧徐燕锋韩云林徐玉环秦川高虹张星东
- 关键词：过敏性哮喘迟发相反应
- 柯萨奇病毒A组16型G20分离株在不同培养条件下的增殖动力学被引量：1
- 2012年
- 目的探讨柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)G20分离株在不同培养条件下的增殖动力学。方法常规培养Vero和人二倍体KMB-17细胞,待细胞长至单层,接种G20株病毒,进行病毒蚀斑试验,以0.1 MOI的感染复数分别感染此两种细胞,置不同温度和pH维持液中进行培养,每2 h收样1次至第24 h,以48 h收样作为对照样,微量滴定法检测病毒滴度,并绘制增殖动力学曲线。结果 G20株病毒在Vero及KMB-17细胞中传代适应后,均可导致细胞病变。G20株病毒在此两种细胞中培养,pH 6.0、pH 6.5时,不同培养温度下,病毒基本不增殖;pH 7.5与pH 7.0的病毒增殖基本一致,增殖速度随温度呈现37℃>35℃>33℃的趋势;在33℃～37℃、pH 7.0～8.0时,病毒均有不同程度的增殖;在41℃、各pH条件下,病毒增殖均明显受到限制。结论病毒在此两种细胞中,37℃,pH 7.5培养条件下,增殖速度及滴度均较理想。
- 刘尚允王丽春董承红赵恒杨二霞刘龙丁李琦涵
- 关键词：柯萨奇病毒PH增殖动力学
- 干扰素及IL-6、IL-1β在肠道病毒71型感染过程中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的探讨干扰素(Interferon,IFN)及白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-1β在肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)感染过程中的作用。方法采用EV71-FY23,在IFNα1b、IFNλ1和IFNγ分别存在的条件下感染Vero细胞及KMB17细胞,检测IFN对细胞的保护作用;建立EV71感染乳鼠模型,检测IFNα1b、IFNλ1、IFNγ、IL-6及IL-1β的抗病毒作用。结果IFNα1b和IFNλ1对EV71感染的细胞具有明显的保护作用,而IFNγ的保护作用不明显;IFNα1b对感染EV71的乳鼠具有较好的保护效果,其在病毒感染之前的预处理方式产生的保护效果较为明显;IL-1β对感染EV71的乳鼠亦有不同程度的保护作用,而IL-6预处理方式不但无保护作用,反而加速了乳鼠的死亡。结论 IFN和IL-1β对EV71感染具有保护作用,而IL-6无此作用。
- 范胜涛王丽春赵恒刘龙丁李琦涵
- 关键词：干扰素白细胞介素-6白细胞介素-1Β肠道病毒A型
- 两株不同表型的CA16毒株(B基因型)的生物学性状比较分析被引量：1
- 2012年
- CA16病毒作为手足口病主要病原之一,其病原学性状与感染引起的病理过程具有可能的相关意义.对分离自一名重症手足口病(HFMD)患者咽拭子的两株呈现不同蚀斑形态的CA16毒株所做的生物学分析表明,它们在增殖动力学、免疫原性等生物学性状上的差异与其对乳鼠致病能力的差异具有相关性,而这些共同的差异与病毒基因非编码区5′端序列及结构区的VP1区域中的序列之间存在着可能的对应关系,所有这些结果提示了CA16病毒生物学及遗传学性状与其致病能力的相关性.
- 杨二霞赵恒张莹刘建生廖芸王丽春崔萍芳杨丽仙刘龙丁董承红董少忠邵聪文姜莉孙乐李琦涵
- 关键词：增殖动力学免疫原性
