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Cyclin G_2表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞的作用: 2011年; 目的构建包含Cyclin G2基因的真核表达载体,探讨其对乳腺癌MCF-7细胞体外增殖的作用。方法运用RT-PCR和基因克隆技术构建pDsRed2-Cyclin G2重组质粒,脂质体法转染至MCF-7细胞中,荧光显微镜下观察其蛋白的表达及定位;AnnexinⅤ-FITC染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果成功构建了pDsRed2-Cyclin G2融合表达质粒,转染MCF-7细胞后散在分布于细胞质和细胞,核转染重组质粒的MCF-7细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 Cyclin G2重组质粒转染至MCF-7细胞后能有效促进细胞凋亡。; 魏娜郑洪汤英姿; 关键词：乳腺肿瘤真核表达载体凋亡

X染色体连锁凋亡抑制蛋白对缺氧-复氧诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的影响: 2009年; 目的:采用X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对缺氧-复氧诱导心肌细胞凋亡模型进行干预,以探讨脂质体介导XIAP基因转染对缺氧-复氧诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:体外培养新生大鼠心肌细胞,分为4组,①XIAP组:将pDsRed2-XIAP以脂质体转染到心肌细胞48h后进行缺氧2h-复氧1h;②预处理组:先将心肌细胞进行缺氧预处理,然后进行缺氧2h-复氧1h;③单纯缺氧-复氧组:将心肌细胞直接进行缺氧2h-复氧1h;④常氧组:将心肌细胞在CO2孵箱中培养3h。各组最后用流式细胞仪Annexin V FITC检测心肌细胞凋亡率结果组间差异。结果:①pDsRed2-XIAP可以通过脂质体转染的方式转染到心肌细胞;②与单纯缺氧-复氧组比较,XIAP组和预处理组心肌细胞凋亡率明显减低,P<0.01;③XIAP组与预处理组比较二者心肌细胞凋亡率相似,P>0.05。结论:以物理性的缺氧2h-复氧1h的方式能诱导所培养的心肌细胞发生凋亡;XIAP能明显减少缺氧-复氧诱导新生大鼠心肌细胞的凋亡;XIAP抑制凋亡的效应与缺氧预处理抑制凋亡的效应相似。; 徐敏秦遥郑洪; 关键词：心肌细胞预处理心肌细胞凋亡凋亡抑制

cyclin G2在乳腺病变组织中表达及其对MCF-7细胞的作用: 2011年; 目的研究细胞周期蛋白G2(cyclin G2)在乳腺病变中的表达及意义,探讨cyclin G2对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响。方法用免疫组化SP法检测cyclin G2在人乳腺不同病变中的蛋白表达,并进行显微图像分析;利用阳离子介导的脂质体法转染pDsRed2-cyclin G2融合基因至人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中,流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡率。结果 (1)cyclinG2在乳腺增生症中的阳性表达率及表达强度与正常乳腺组织相当,而在导管原位癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)以及浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中表达逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)转染了重组质粒pDsRed2-cyc-lin G2的MCF-7细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 cyclin G2蛋白表达随着乳腺疾病恶性程度增加而降低,外源性转染cyclin G2至MCF-7细胞中可促进其凋亡,抑制细胞增殖。; 魏娜郑洪汤英姿刘华庆; 关键词：乳腺疾病 CYCLIN G2

livin基因沉默对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响被引量：6: 2009年; 目的:探讨小干扰RNA(small interfening RNA,siRNA)沉默livin基因对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响。方法:构建2个针对人源livin基因的siRNA表达质粒,并通过脂质体介导转染人恶性黑素瘤A375细胞株,利用荧光定量PCR检测livin mRNA的表达情况,AnnexinⅤ-PE FCM法检测A375细胞凋亡情况,PI单染FCM法检测细胞周期情况。结果:成功构建livin siRNA表达质粒,转染siRNA-1和siRNA-2后48h的A375细胞中livin mRNA表达量较空白对照组分别下降17%和42%,72h分别下降71%和61%。转染siRNA-1和siRNA-2后48h的A375细胞凋亡率(29.45%和33.25%)及72h细胞凋亡率(33.52%和38.18%)均高于空白组(7.95%和9.70%)(P<0.05)。siRNA-2可引起G0/G1期升高,S期下降(P<0.05),siRNA-1作用不明显(P>0.05)。结论:siRNA-1、2体外均能有效抑制livin mRNA的转录,促进人恶性黑素瘤A375细胞凋亡。siRNA-2表达质粒能使人恶性黑素瘤A375细胞周期出现G/G期阻滞,细胞增殖受到抑制。; 王琳琳郑洪唐薇薇厉国慧安文波; 关键词：黑色素瘤细胞周期基因 LIVIN

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贵州省科学技术基金(J[2007]2128)