解放军总医院医药卫生科研基金(06H026)
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- DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立
- 目的:建 DNA 聚合酶 iota 在 HEK-293细胞中的高表达体系。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将已构建的带有目的基因的真核表达质粒 PCDNA3.1转 HEK-293细胞,通过 G...
- 周虎传杨劲曾益军位全芳何凤田赵谦李劲刘洋李杰
- 关键词:HEK-293细胞
- DNA聚合酶Polι的研究进展
- 2011年
- Y家族DNA聚合酶是一种跨损伤复制酶,即能以损伤的DNA为模板进行复制。Y家族DNA聚合酶广泛分布生物界,人类细胞中Y家族DNA聚合酶至少包括Rev1、Polκ、Polι、Polη四种,Polι在以DNA为模板进行复制时错配率很高而不同于其他跨损伤DNA聚合酶,Polι是目前发现的所有DNA聚合酶中保真性最低的DNA聚合酶。很高的错配率导致很高的突变率,最后基因的突变导致癌症的发生,因此Polι在各个国家被广泛的研究,并且对Polι的各个不同的特性进行了研究,取得了一系列成果,现对Polι的研究进展予以综述,并展望了未来的研究趋势。
- 周虎传杨劲
- 关键词:DNA聚合酶
- DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中高表达体系的建立
- 2008年
- 目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Polt)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,建立DNA聚合酶iota在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1转入HEK-293细胞,通过G418筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆。结果:通过G418筛选筛选出了具有G418抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系。结论:建立了高表达DNA聚合酶iota的HEK-293细胞系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA损伤修复中的生物学功能奠定了基础。
- 周虎传杨劲曾益军位全芳何凤田赵谦李劲刘洋李杰
- 关键词:HEK-293细胞DNA损伤DNA修复