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单抗CD44-生物素-亲和素系统提高软骨细胞与支架黏附能力的研究被引量：4: 2012年; 目的观察单抗CD44-生物素（Biotin）-亲和素（Avidin）绑定系统在构建组织工程软骨中能否提高软骨细胞与支架的黏附能力。方法分别制备软骨细胞二维和三维培养体系，分3组：A：壳聚糖＋软骨细胞；B：生物素＋亲和素化壳聚糖＋软骨细胞；C：生物素化单抗CD44＋亲和素化壳聚糖＋软骨细胞。分别测定细胞展平面积、细胞接种脱落率、细胞增殖率，逆转录-聚合酶链反应（1iT-PCR）法检测Ⅱ型胶原（ColII）、聚集蛋白聚糖（aggrecan）、sox9的mRNA表达，组织学切片观察壳聚糖支架内细胞黏附生长情况。结果细胞展平面积、细胞增殖率及ColII、aggrecan、sox9的mRNA表达量皆为：C组〉B组〉A组（P〈0．05）。细胞接种脱落率：A组为c组的3．71倍、为B组的2．17倍，而B组为C组的1．71倍，A组〉B组〉C组（P〈0．05）。组织切片显示细胞在支架内C组增殖旺盛、胞外基质表达较丰富，A组增殖较弱、胞外基质表达较弱，B组介于C与A组间。结论单抗CD44．Biotin．Avidin绑定系统能比Biotin．Avidin绑定系统更显著的提高软骨细胞与支架的黏附能力，促进组织工程软骨种子细胞的增殖和软骨细胞表型的表达。; 林红周健沈龙祥阮玉辉戴文达郭常安陈峥嵘; 关键词：生物素软骨细胞

单克隆抗体CD44-生物素-亲和素技术构建组织工程软骨修复猪膝关节负重区软骨缺损: 2014年; 目的观察单克隆抗体CD44-生物素（Biotin）-亲和素（Avidin）绑定（CBA）技术,在体外构建的组织工程软骨移植修复猪膝关节负重区软骨缺损的效果.方法分3组构建组织工程软骨：常规组：壳聚糖三维支架＋软骨细胞;Biotin-Avidin绑定（BA）技术组：生物素＋亲和素化壳聚糖三维支架＋软骨细胞;CBA技术组：生物素化单抗CD44＋亲和素化壳聚糖三维支架＋软骨细胞.分4组修复猪膝关节负重区软骨全层缺损：A组植入常规组织工程软骨;B组植入BA技术构建的组织工程软骨;C组植入CBA技术构建的组织工程软骨;D组植入自体软骨.12周后取标本行大体观察并行Moran评分;生物力学方法评估标本弹性模量和刚度;Western blot检测新生软骨组织内的Ⅱ型胶原（colⅡ）、聚集蛋白聚糖（aggrecan）目的蛋白含量;对标本行苏木素-伊红染色、甲苯胺蓝染色并行Wakitani评分.结果 Moran大体评分,D组为（4.48 ±0.23）分,与C组差异无统计学意义（P＞0.05）,但优于A、B两组（P＜0.05）;D组弹性模量为（20.61 ±±2.02） mPa,刚度为（72.28±6.16） N/mm、colⅡ及aggreean目的蛋白含量比值分别为1.59 ±0.14和1.44±0.13,均优于其他组（P＜0.05）;组织学染色及Wakitani评分均显示D组修复效果较好.结论 BA绑定技术比常规接种方法所构建组织工程软骨对猪膝关节负重区软骨缺损修复效果好,但是比较而言,单克隆抗体CBA绑定技术所构建组织工程软骨修复效果更佳,虽仍未达到自体移植修复水平.; 林红周健王会仁沈龙祥郭常安董健陈峥嵘; 关键词：生物素软骨缺损

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国家自然科学基金(30872623)

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