国家重点基础研究发展计划(2005CB523311)
- 作品数：13 被引量：59H指数：5
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- 相关机构：北京中医药大学中国中医科学院更多>>
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- 大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液对皮层神经元活性的影响以及通络救脑注射液的干预作用被引量：13
- 2006年
- 目的:探讨脑微血管内皮细胞条件培养液对神经元活性的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法:制备正常、正常用药、拟缺血损伤、拟缺血损伤用药4种脑微血管内皮细胞条件培养液(N-CM、NT-CM、I-CM、IT-CM),分别作用于培养的皮层正常神经元和拟缺血损伤神经元,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率检测分析各个条件培养液对神经元活性的影响特征。结果:①N-CM对正常神经元无明显影响,但对拟缺血损伤的神经元表现出一定的保护作用,尤其是NT-CM可明显提高受损的神经元活性;②I-CM可降低正常神经元活性,对已受损的神经元则进一步加重损伤,IT-CM可明显改善这种损伤状态。结论:脑微血管内皮细胞的旁分泌作用可能在中枢系统缺血性损伤中起重要作用,有可能是不能透过血脑屏障的中药成分发挥治疗作用的靶点。
- 李卫红青雪梅华茜胡京红洪庆涛朱晓磊李澎涛
- 关键词：脑微血管内皮细胞条件培养液皮层神经元通络救脑注射液
- 脑微血管内皮细胞条件培养液对体外培养正常神经元的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨体外模拟脑缺血再灌注损伤条件下及通络救脑注射液干预下脑微血管内皮细胞条件培养液(CMECs-CM)对体外正常培养神经元的影响。方法:先分别进行大鼠大脑微血管内皮细胞和神经元的分离纯化培养及建立体外模拟脑缺血再灌注损伤模型,然后用收集的CMECs-CM 1:1和1:5的浓度作用于体外培养的神经元,MTT法测定神经元的活性、存活率,western-blot检测NF-κB的表达。结果:脑微血管内皮细胞条件培养液可影响神经元生存活性,应用中药通络救脑注射液作用于脑微血管内皮细胞后收集的条件培养液可明显提高神经元的生存活性,可以提高神经元中NF-κB的表达。
- 陈会丛李澎涛潘彦舒华茜杜欢王筠刘元
- 关键词：脑微血管内皮细胞神经元脑缺血再灌注条件培养液
- 粒细胞集落刺激因子对氧糖剥夺后培养神经元的影响
- 2008年
- 目的:观察G-CSF对体外模拟脑缺血损伤神经元的影响,为其临床治疗脑缺血损伤提供理论的依据。方法:应用体外培养原代大脑皮质神经元氧糖剥夺模型模拟脑缺血损伤,氧糖剥夺4 h,制作模型过程中加入不同浓度的G-CSF进行干预,通过观察细胞活性、死亡率、细胞色素C释放量判断G-CSF对神经元的保护作用。结果:G-CSF可明显降低氧糖剥夺神经元的死亡率,提高其生存活性,明显降低神经元由线粒体向胞浆内释放细胞色素C,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:G-CSF对氧糖剥夺所致的神经元损伤发挥保护作用。
- 陈会丛侯金才李澎涛潘彦舒华茜洪庆涛杜欢王筠
- 关键词：神经元
- 脑微血管内皮细胞条件培养液对MIP-1β诱导大鼠小胶质细胞迁移影响的机制被引量：2
- 2009年
- 目的:研究经通络方药作用后的脑微血管内皮细胞条件培养液对MIP-1β诱导的大鼠小胶质细胞迁移的影响,以及由MIP-1β在小胶质细胞上的受体-CCR5介导细胞信号转导通路的调控作用。方法:将通络方药作用后的大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液加入到由5nMMIP-1β刺激6h后的原代大鼠小胶质细胞中,利用Transwell细胞迁移系统来观察小胶质细胞迁移,用Western blot法检测小胶质细胞CCR5,p-p38,p-JNK表达情况。结果:脑微血管内皮细胞条件培养液能够显著减少小胶质细胞迁移到Transwell下层的细胞数量(P<0.01),降低小胶质细胞上MIP-1β的受体CCR5表达,同时抑制了其下游信号蛋白p38和JNK的磷酸化。结论:通络方药作用后的脑微血管内皮细胞条件培养液可抑制由MIP-1β诱导的大鼠小胶质细胞迁移,其作用发挥可能是通过抑制MIP-1β的受体CCR5表达,降低了其下游通路上p38和JNK蛋白磷酸化程度实现。
- 王筠李澎涛侯金才华茜潘彦舒李卫红唐卉凌陈会丛杜欢
- 关键词：小胶质细胞P38MAPKJNK
- 不同内皮细胞条件培养液对皮层神经元线粒体功能的影响及通络救脑注射液的保护作用被引量：12
- 2007年
- 目的探讨脑微血管内皮细胞条件培养液对损伤神经元线粒体功能的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法制备(1)正常内皮细胞条件培养液(N-CM):正常培养的内皮细胞不作任何处理;(2)正常用药内皮细胞条件培养液(NT-CM):通络救脑注射液按1μl/ml浓度作用10h;(3)缺氧损伤内皮细胞条件培养液(I-CM);(4)缺氧损伤用药内皮细胞条件培养液(IT-CM):于损伤前4h,加入通络救脑注射液1μl/ml;分别作用于糖氧剥夺损伤的神经元模型,通过测定神经元线粒体活性、线粒体膜电位(MMP)及细胞色素C(CytC),分析各个条件培养液对损伤神经元线粒体功能的影响。结果(1)与模型组比较,N-CM组与NT-CM组(P<0.05)均可阻抑损伤神经元线粒体活性的下降,尤其是NT-CM保护作用更为明显。(2)与正常组比较,模型组MMP明显下降;I-CM使受损神经元的线粒体功能进一步下降;I-CM组可进一步降低受损神经元MMP,IT-CM可逆转神经元MMP下降,明显改善这种损伤状态。(3)N-CM组与NT-CM组均可降低损伤神经元的CytC释放,分别与模型组、I-CM组比较,差异均有显著性(P<0.05)。结论脑微血管内皮细胞的旁分泌功能对损伤神经元的存活有重要的调节作用,该作用的实现可能与维持神经元线粒体功能有关,通络救脑注射液可促进该作用的发挥。
- 李卫红李澎涛华茜洪庆涛胡京红
- 关键词：脑微血管内皮细胞皮层神经元线粒体通络救脑注射液
- 从络论治脑病的中药研发思维探索被引量：6
- 2006年
- 李卫红青雪梅李澎涛
- 关键词：络病脑病中药研发
- 通络救脑注射液对大鼠脑微血管内皮细胞活性及其条件培养液影响的初步研究
- 目的观察通络救脑注射液对正常及拟缺血大鼠脑微血管内皮细胞活性的影响,并初步探讨细胞条件培养液内蛋白分泌的时效特征、奠定可溶性蛋白深入分析的技术基础。方法通络救脑注射液作用于正常及拟缺血脑微血管内皮细胞之后,用 MTS/P...
- 青雪梅李澎涛胡京红侯金才华茜王冰杜欢
- 关键词：通络救脑注射液脑微血管内皮细胞条件培养液总蛋白
- 文献传递
- 从药物转运体入手开展中药配伍治疗脑病的思路探索被引量：1
- 2007年
- 目前,针对脑血管疾病的治疗措施仍显力不从心,其主要原因是由于血脑屏障使得受损脑组织无法获得有效的药物浓度,因此促进有效药物的脑部转运便成为一个亟待解决的关键问题。而已知开启血脑屏障增加药物脑内浓度的方法均存在一定局限性,未能真正有效地应用于临床。由于中药配伍应用能发挥多环节、多靶点的作用,使其在脑系疾病的治疗中显示出明显的优势。因此,在中药复方配伍理论的指导下,从脑部药物转运体入手,开展中药有效组分配伍应用特异性的研究,有效地开启血脑屏障转运功能以提高药物进入脑组织的能力,可为突破脑病治疗药物开发的瓶颈提供新的思路。
- 王冰潘彦舒李澎涛
- 关键词：药物转运体中药配伍血脑屏障P-糖蛋白
- 脑微血管内皮细胞氧糖剥夺条件培养液对PC12细胞活性的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:观察脑微血管内皮细胞氧糖剥夺后条件培养液对PC12细胞的影响。方法:原代培养大鼠脑皮质微血管内皮细胞,传至三代,制备其正常、氧糖剥夺、复糖复氧三种状态条件液,并观察内皮细胞在这三种状态下的形态改变;将这三种条件培养液作用于PC12细胞,分4组:正常对照组(Normal)、正常内皮细胞条件液组(N-CM)、氧糖剥夺内皮细胞条件液组(I-CM)、复糖复氧内皮细胞条件液组(R-CM),每组分别设6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h 8个时间点,MTS/PMS法检测三种脑微血管内皮细胞条件液作用后的不同时间点PC12细胞活性的变化。结果:氧糖剥夺后脑微血管内皮细胞发生核固缩等明显病理改变,复糖复氧后这些改变有所恢复。N-CM组、R-CM组与相应时间点的Normal组PC12细胞活性相比差异均有统计学意义(P<0.01)。正常和复糖复氧内皮细胞条件液显著抑制了PC12细胞的增殖和活性。N-CM组、R-CM组与相应时间点的I-CM组PC12细胞活性相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:正常脑微血管内皮细胞条件液抑制了PC12细胞的活性,氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞条件液抑制效应消失,复糖复氧后,这种抑制效应也同时恢复。
- 侯金才华茜潘彦舒陈会丛杜欢王筠李澎涛
- 关键词：脑微血管内皮细胞血脑屏障PC12
- 精制清开灵及其组分对中风后大鼠内皮型一氧化氮合酶表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:清开灵是一种治疗脑中风的传统中药复方。精制清开灵是从清开灵衍生出的有效成分复方,既往研究证明,此药具有减轻大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠血管内皮细胞损伤和抑制炎症过程的作用,从而体现出神经保护的效果。而内皮型一氧化氮合酶(eNOS)来源的一氧化氮在脑缺血发作后的病理过程中起到重要的保护作用,是近年药理学研究的热点之一。本实验研究了大鼠持久性局灶性脑缺血72h后精制清开灵及其各组分对抗脑缺血损伤的作用以及它们对eNOS表达的影响。方法:以线栓法复制SD大鼠持久性大脑中动脉栓塞(PMCAO)模型。缺血72h后,取出脑组织做冠状切片,TTC染色计量梗死程度,并以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆内皮细胞凝血因子Ⅷ相关抗原(血管性假血友病因子,vWF)含量。以免疫组织化学染色方法观察大鼠脑组织eNOS的表达情况。并根据免疫组织化学分析的结果,取缺血侧脑组织以免疫印记法验证精制清开灵及其各组分对eNOS表达水平的影响。结果:PMCAO72h,模型组大鼠eNOS蛋白在缺血半暗带的血管内皮细胞表达增加。与模型组动物相比,精制清开灵及其各组分治疗组动物eNOS蛋白的表达明显增加,而脑梗死范围则显著缩小。结论:持久性局灶性脑缺血后,在缺血半暗带血管内皮细胞表达增加的eNOS可能具有重要的代偿作用。精制清开灵及其各组分能够不同程度地促进缺血后半暗带eNOS的表达,这可能是它们阻抑脑缺血损伤的重要机制之一。
- 朱晓磊李澎涛华茜徐雅贾旭李卫红
- 关键词：脑缺血内皮型一氧化氮合酶
