福建省自然科学基金(2011J01207)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
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- 游离脂肪酸对肝细胞L02的脂毒性及氧化应激机制被引量：4
- 2013年
- 目的探讨游离脂肪酸(FFA)对人正常肝细胞L02的脂毒性及其机制。方法用含FFA 0.2,0.4和0.8 mmo.l L-1的培养液培养L02细胞48 h,通过油红O染色和甘油三酯(TG)含量检测胞内脂质蓄积,测定培养上清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性分析肝细胞损伤,锥虫蓝拒染计数法分析细胞存活率,测定琥珀酸脱氢酶(SDH)活性分析线粒体功能,DCFH-DA法检测活性氧类(ROS)水平,比色法检测总谷胱甘肽和丙二醛(MDA)含量,FITC-AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡。结果经FFA处理L02细胞48 h后,FFA 0.4和0.8 mmol.L-1组TG含量131±50和(267±71)μmol.g-1蛋白较正常对照组(32±6)μmo.l g-1蛋白显著升高(P<0.05),FFA 0.2,0.4和0.8 mmol.L-1组GPT活性分别为2.05±0.06,2.78±0.64和(2.43±0.55)U.L-1,较正常对照组(1.10±0.05)U.L-1显著升高(P<0.05)。锥虫蓝拒染法显示各FFA组细胞存活率无显著变化;FFA 0.4和0.8 mmol.L-1组SDH活性(A490 nm)分别为2.10±0.11和1.95±0.11,均较正常对照组1.46±0.06显著升高(P<0.01);FFA 0.8 mmol.L-1组ROS水平为642±58,较正常对照组559±31显著升高(P<0.01)。FFA 0.2,0.4和0.8 mmol.L-1组总谷胱甘肽水平分别为176±6,180±11和(96±4)μmol.g-1蛋白,较正常对照组(202±13)μmol.g-1蛋白显著降低(P<0.05),FFA 0.4和0.8 mmol.L-1组MDA水平分别为33.8±5.5和(50.4±7.4)mmo.l g-1蛋白,均较正常对照组(8.08±5.48)mmo.lg-1蛋白显著升高(P<0.01)。各组间凋亡率无显著差异。结论 FFA对肝细胞L02有一定损伤,这种损伤对细胞存活无明显影响,亦不会引起细胞凋亡,其细胞损伤机制与肝细胞氧化应激有关。
- 刘艳施文荣洪振丰
- 关键词：脂肪酸类毒性作用氧化性应激
- MTT法不适用于代谢水平改变的细胞活力检测被引量：6
- 2013年
- 利用MTT法和台盼蓝拒染计数法分别检测L02肝细胞经游离脂肪酸(FFA)处理的存活率,同时测定各组细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性。结果 MTT法显示0.8 mmol/L FFA组细胞存活率较正常组显著增加(p<0.01),而台盼蓝拒染计数法却显示该组细胞存活率较正常组无明显改变(p>0.05),同时0.4 mmol/L、0.8 mmol/L FFA组细胞SDH活力显著增加(p<0.01)。研究表明,MTT法不适用于检测代谢水平改变的细胞生长、存活等指标。
- 施文荣刘艳
- 关键词：MTT法琥珀酸脱氢酶
- 复方熊胆茵陈颗粒对高脂模型大鼠肝脂肪含量及脂酶活性的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察复方熊胆茵陈颗粒对高脂模型大鼠肝脂肪含量及脂酶活性的影响。方法高脂饮食饲养大鼠6周,并设正常组、模型对照组、复方熊胆茵陈颗粒高、低剂量组,药物干预4周后,采用索氏提取法检测肝脂肪含量,Elisa法测定肝脂酶浓度,比色法检测肝脂酶活性。结果复方熊胆茵陈颗粒可降低肝脂肪含量(P<0.05),提高肝脂酶活性(P<0.01)。结论复方熊胆茵陈颗粒可通过增强肝脂酶活性调节脂质代谢。
- 刘艳洪振丰施文荣郑海音赵锦燕李颖刘丽雅
- 关键词：肝脂酶
- 游离脂肪酸对肝细胞ACSL1表达及相关脂代谢的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究游离脂肪酸(FFA)的诱导对L02肝细胞长链脂酰CoA合成酶1(ACSL1)的表达及相关代谢的影响。方法用含不同浓度(0.2、0.4、0.8 mmol/L)FFA的培养液诱导L02细胞48 h,Western blot检测ACSL1蛋白水平,荧光定量PCR检测ACSL1 mRNA水平,比色法测定甘油三酯(TG)含量、ATP水平和培养上清FFA浓度变化,生化法测定酮体含量和培养上清葡萄糖浓度变化。结果 FFA的诱导可显著提高ACSL1蛋白表达水平(P<0.01),但对ACSL1 mRNA水平无明显影响(P>0.05),细胞内TG含量显著升高(P<0.01或P<0.05),酮体含量显著升高(P<0.05),培养上清葡萄糖消耗显著增加(P<0.01),胞内ATP水平无明显变化(P>0.05),与0.2 mmol/L、0.4 mmol/L FFA组相比,0.8 mmol/L FFA组培养上清FFA消耗显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论 FFA通过上调ACSL1蛋白表达水平致肝细胞TG蓄积。
- 刘艳施文荣洪振丰郑海音李颖
- 关键词：L02细胞
