国际科技合作与交流专项项目(2008DFA31140)
- 作品数：27 被引量：45H指数：4
- 相关作者：朱平庄建陈寄梅郭惠明郑少忆更多>>
- 相关机构：广东省人民医院广东省心血管病研究所汕头大学更多>>
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- 不同低温对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后Bax及Bcl-2蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的：观察不同低温对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及其对凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为4组，低温18℃实验组（深低温组），低温28℃实验组（中低温组），常温手术对照组（常温组），常温假手术组（假手术组）。前3组采用手术夹闭大鼠左肾动脉与左右髂总动脉分叉上端腹主动脉90 min致脊髓缺血，然后松开再灌注，深低温组、中低温组在阻断前20 min分别降至18、28℃，解除阻断后30 min内将体温升至37.0℃。常温组阻断前无需降温每只大鼠再灌注72 h、1周按照TARLOV法对下肢进行评分。每组分为24 h、72 h、1周3个不同时间点取L1-L5段脊髓，每个时间点5只大鼠，采用普通病理HE染色、Nissl染色，从形态学上观察脊髓组织，TUNEL法观察细胞凋亡情况，免疫组化染色及Western blot法观察脊髓组织Bax蛋白及Bcl-2蛋白表达情况。结果 TARLOV神经评分结果显示，深低温组、中低温组下肢恢复情况明显好于常温组（P＜0.01），而中低温组评分又高于深低温组（P＜0.01）。组织形态学观察假手术组未发现明显病理学改变，深低温组、中低温组、常温组3组均出现不同程度病理改变，且中低温组轻于深低温组，深低温组组轻于常温组；TUNEL结果显示，假手术组几乎未发现凋亡细胞，常温组神经元细胞凋亡情况较深低温组及中低温组明显。免疫组化及Western blot结果显示，深低温组、中低温组各时间点Bax蛋白表达量均低于常温组，但中低温组降低比深低温组明显，组间两两比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。深低温组、中低温组、假手术组各时间点Bcl-2蛋白表达量均高于常温组，且中低温组较深低温组高，组间两两比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论低温保护下肢神经功能及减少神经元的死亡，对大鼠脊髓缺血再灌注损伤有
- 李小辉富旗周正芳郭惠明黄成峰张晓慎陈寄梅庄建谭茵朱平
- 关键词：脊髓缺血再灌注损伤BCL-2
- 西罗莫司促进TGF-β分泌对小鼠调节性T细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的通过观察西罗莫司或环孢霉素A与CD4+CD25+调节性T细胞((regulatory T cell,Treg)体外共培养对CD4+CD25+Treg增殖情况及对Foxp3和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达的影响,探讨西罗莫司促进TGF-β分泌诱导Treg体外分化和增殖的机制。方法无菌条件下取C57BL/6小鼠脾脏,分离单个核细胞,免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg,设空白对照组、西罗莫司组、环孢霉素A组,共培养96h。上流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg。反转录聚合酶链、酶联免疫吸附试验法检测西罗莫司或环孢霉素A处理后的CD4+CD25+Treg的FoxP3+、TGF-βmRNA表达水平和分泌情况;Western blot分析TGF-β信号通路重要的活化分子Smad蛋白的表达情况,观察其对CD4+CD25+FoxP3+Treg增殖的影响;使用TGF-β中和抗体进一步验证TGF-β在西罗莫司促进CD4+CD25+FoxP3+Treg分化增殖过程中的重要作用。结果与对照组相比,西罗莫司处理的CD4+T细胞分泌的TGF-β水平增加近2.5倍,差异有统计学意义(P<0.01);而环孢霉素A处理的CD4+T细胞分泌的TGF-β水平则有所下降,但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,环孢霉素A组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例明显降低,差异有统计学意义(41.25%vs.69.22%,P<0.01);西罗莫司组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞稍有下降,但差异无统计学意义(65.21%%vs.69.22%,P>0.05)。西罗莫司组FoxP3+T细胞的比例明显高于对照组,差异有统计学意义(53.7%vs.40.2%,P<0.05);而环孢霉素A组FoxP3+T细胞比例明显低于对照组,差异有统计学意义(23.6%vs.40.2%,P<0.01)。结论西罗莫司在体外培养促进CD4+CD25+Treg的增殖与生长,而环孢霉素A体外抑制CD4+CD25+Treg的增值与生长。西罗莫司通过诱导TGF-β表达分泌来促进CD4+CD25+FoxP3+Treg的增殖。
- 麦明杰陈星权叶秀娟朱平郑少忆刘怀普黄晶晶肖泽周王全兴沈攸云陈寄梅庄建
- 关键词：西罗莫司环孢霉素A调节性T细胞FOXP3小鼠
- 低温对脊髓缺血再灌注损伤保护机制的研究进展被引量：2
- 2013年
- 下肢截瘫或者轻度瘫痪是外科大血管手术后严重的并发症,这不仅给患者带来了身体上和精神上的沉重打击,对临床医生也是一种严峻的挑战。随着低温在改善颅脑损伤方面的广泛应用,脊髓损伤的低温保护作用也受到了极大的关注,但目前低温保护机制尚不十分清楚。本文将低温对脊髓缺血再灌注损伤保护机制的研究进展做一综述。
- 周正芳郭惠明庄建朱平
- 关键词：脊髓缺血再灌注损伤外科手术
- 深低温处理脊髓缺血再灌注后Caspase12的表达情况被引量：1
- 2014年
- 目的：观察深低温对大鼠脊髓缺血再灌注的保护作用及对Caspase12表达的影响，初步探讨其可能的作用机制。方法：将45只SD大鼠随机分为3组：深低温18℃处理组（A组）；常温手术对照组（B组）；常温假手术组（C组）。每组分为6h、24h、1周三个不同时间点取L2～L5段的脊髓，每个时间点5只大鼠，采用普通病理HE染色、Nissl染色、电镜从形态学上观察脊髓组织，免疫组化检测和RT—qPCR检测缺血再灌注后脊髓组织Caspase12蛋白和mRNA的表达变化。结果：组织形态学观察A、B组病理改变均较c组严重，且A组比B组轻．病理学累积评分A、c组明显低于B组（P〈0．01）；免疫组化检测和RT-qPCR检测结果分别显示，Caspase12蛋白和mRNA在A、B组各时间段均高于C组，且A组升高程度比B组低（P〈0．05）。结论：深低温对大鼠脊髓缺血再灌注有保护作用。并且可能通过抑制Caspase12的表达而发挥其保护作用。
- 朱小兰周正芳任琼朱平郭惠明富旗范小平陈寄梅庄建范瑞新
- 关键词：脊髓损伤再灌注损伤
- 高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察氧气（oxygen,O2）及一氧化碳（carbon monoxide,CO）混合高压气体干燥保存方法对小鼠离体供心冷缺血再灌注损伤的影响。方法采用C57BL/6雄性小鼠,建立同系小鼠心脏颈部异位移植模型。4~6周龄供体鼠48只,数字表法随机分为4组（n=12）：空白对照组（A组）、即刻移植组（B组）、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐（histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK）液保存组（C组）及高压干燥保存组（D组）。6~8周龄小鼠36只,数字表法随机分为3组,即刻移植受体组、HTK受体组及高压干燥受体组（n=12）。供心处理如下：A组仅取供体心,不做移植;B组供心不经保存取下后即刻移植;C组供心浸泡于HTK液中;D组供心悬挂并置于高压气体罐中（PO2：3.2×101.3 k Pa＋PCO：0.8×101.3 k Pa=4×101.3 k Pa）。C、D两组供心均于4℃冰箱中保存24 h后,分别移植于受体组小鼠颈部。移植后2 h,对比观察B、C、D三组复跳情况及供心功能。移植后24 h,检测受体鼠血清心功酶变化;取各组供心组织,分别采用苏木素-伊红（HE）染色、Tunnel染色及行蛋白免疫印迹（Western-blot,WB）检测,对比观察供心病理学改变、心肌细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2）蛋白表达情况。结果 B组10只供心复跳,C组2只供心复跳,D组9只供心复跳,3组间复跳率比较,差异有统计学意义[83.3%（10/12）vs.16.7%（2/12）vs.75.0%（9/12）,P=0.0015];其中D组复跳率低于B组,但明显高于C组,差异有统计学意义（P〈0.0125）。移植2 h后B、C、D组间供心功能评分比较,差异有统计学意义（5 vs.0 vs.3,P〈0.01）,两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）。4组间血清肌钙蛋白I（troponin I,Tn I）浓度比较,差异有统计学意义（P〈0.001）,D组高于A、B两组,但低于C组（P〈0.001）。苏木素伊红染色结果显示D组细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较A、B两
- 黄帅赵明一富旗黄成锋庄建郑少忆卢聪郭惠明朱平
- 关键词：冷缺血再灌注损伤B细胞淋巴瘤/白血病-2凋亡
- GFAP和MAP_2 mRNA在缺血预处理与单纯缺血大鼠脊髓中的表达差异被引量：2
- 2013年
- 目的探讨GFAP、MAP2mRNA在缺血预处理与单纯缺血的大鼠脊髓中的表达差异。方法将54只200 g雌雄各半的SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血预处理组(IPC组)3组。采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型;Sham组6只,手术开始步骤同其他两组,但不做肾下腹主动脉阻断即缝合伤口;I/R组24只,直视下采用动脉夹夹闭腹主动脉段左肾动脉分支起始处下方5 mm处(即肾动脉下型),仅阻断腹主动脉60 min后开放灌注;而IPC组24只,先阻断腹主动脉5 min,开放5 min,随即阻断腹主动脉60 min后开放灌注。再灌注后1、2、5、10 d时对其各个时间点进行后肢神经行为学评分,同时利用实时定量PCR技术检测预处理对大鼠缺血再灌注后脊髓GFAP、MAP2mRNA表达的影响,用2-△△Ct的方法计算各组脊髓中GFAP、MAP2mRNA的表达倍数。结果 54只大鼠术后全部存活。行为学评分发现与Sham术组比较,各实验组行为学评分均下降,随着再灌注观察时间的延长,各组分值均升高,第5天时评分与Sham组差异无统计学意义。实时定量PCR检测GFAP、MAP2mRNA的表达时发现,I/R组再灌注第2天时MAP2表达显著高于Sham组;IPC组在再灌注1、2 d时MAP2表达高于Sham组,且与同时间点I/R组比较差异有统计学意义;IPC组的MAP2mRNA表达峰值出现的时间较I/R组早,峰值较I/R组高。I/R组仅在再灌注第10天时GFAP mRNA表达高于Sham组,达到峰值;IPC组在再灌注2、5 d时GFAP表达高于Sham组,且第5天时达到峰值;I/R组和IPC组各自不同时间点出现的GFAP mRNA的峰值不存在明显差异。结论 GFAP、MAP2mRNA在不同处理大鼠脊髓中的差异表达,可能与急性缺血再灌注后神经组织可逆性的损伤修复的规律有关。
- 杨国柱郭惠明张晓慎朱平范瑞新范小平庄建陈寄梅刘怀普黄晶晶
- 关键词：缺血预处理胶质纤维酸性蛋白实时定量PCR
- 逆行灌注白藜芦醇对猪脊髓缺血再灌注损伤的神经保护作用
- 2014年
- 目的 探讨逆行灌注白藜芦醇（resveratrol,Res）对猪脊髓缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）损伤的神经保护作用.方法 将18只西藏小型猪按“随机数字表法”随机分为3组：手术对照组（I/R组,n=6）;冷液（cold saline,CL）逆灌组（CL组,n=6）;Res逆灌组（CL＋Res组,n=6）.I/R组：常温阻断降主动脉70 min;CL组：阻断前游离出副半奇静脉,阻断降主动脉70 min,同时经副半奇静脉逆行灌注低温（4℃）9 g/L氯化钠溶液,灌注流速为16.65 mL/min;CL＋Res组：阻断降主动脉70 min,同时经副半奇静脉逆行灌注含Res 10 mg/kg的低温（4℃）9 g/L氯化钠溶液.于术后6、24、48 h行神经功能评分,术后48 h取L2～L4段脊髓,免疫组化法和Western Blot检测Bax及Bcl-2蛋白表达变化.结果 18只西藏小型猪全部存活.术后6、24、48 h各组行为学评分均降低,I/R组低于CL＋Res组、CL组,CL＋Res组高于CL组,差异有统计学意义（F=26.341、18.553、9.637,P＜0.05）.将主动脉阻断后各组实验动物的鼻咽温度和椎管温度均有下降,I/R组、CL＋Res组和CL组分别在阻断70 min和再灌注20 min时降至最低.再灌注后,I/R组的鼻咽温度和椎管温度逐渐回升,至再灌注60 min时与阻断前相近（P=0.293、0.115）;而CL组和CL＋Res组回升不明显,在再灌注60 min时仍明显低于阻断前（P＜0.01）.Western Blot检测结果与免疫组化结果一致：Bcl-2蛋白表达水平在CL＋Res组与CL组均高于I/R组,差异有统计学意义（P＜0.05）;且CL＋Res组高于CL组,差异有统计学意义（P＜0.05）.Bax蛋白表达水平在CL＋Res组与CL组均低于I/R组,差异有统计学意义（P＜0.05）;且CL＋Res组低于CL组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 经猪副半奇静脉逆行灌注低温9 g/L氯化钠溶液及Res对脊髓I/R损伤有保护作用,其机制可能是通过下调Bax及上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡而发挥作用.
- 罗智超周正芳郑少忆郭惠明范瑞新陈寄梅庄建朱平
- 关键词：白藜芦醇脊髓损伤缺血再灌注损伤
- 转酪氨酸激酶C基因神经干细胞移植对脊髓损伤后肿瘤坏死因子-α的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨转酪氨酸激酶C(TrkC)基因神经干细胞(NSCs)移植对脊髓损伤的作用。方法 30只Wistar大鼠,随机分为3组(每组10只),常温下对照组只进行单纯阻断降主动脉群体;单纯移植组阻断降主动脉,同时,进行单纯NSCs移植;TrkC组阻断降主动脉,同时,进行转TrkC基因NSCs移植。于手术后1 d进行细胞移植。通过检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及病理学分析、细胞凋亡检测等方法评估脊髓损伤情况,及评估转TrkC基因NSCs移植对脊髓损伤后TNF-α的影响。结果对照组和单纯移植组损伤脊髓TNF-α浓度较TrkC组明显增加(F=121.145,P<0.01),单纯移植组在移植后24 h TNF-α浓度与对照组比较并无减少(P>0.05),24 h后才逐渐受到抑制,较对照组减少(P<0.01);而TrkC组TNF-α浓度较单纯移植组减少(P<0.01),HE、Nissle染色显示神经细胞损伤情况:对照组>单纯移植组>TrkC组,TrkC组损伤程度最轻。细胞凋亡情况:TrkC组<单纯移植组<对照组,单纯移植组、TrkC组细胞凋亡减少。结论转TrkC基因NSCs移植到脊髓受损的大鼠身上,可使受损脊髓局部的TNF-α表达程度降低。这可能是TrkC基因NSCs移植改变脊髓损伤的微环境,使干细胞更好地分化,有效减少脊髓继发损伤,修复受损神经,促进大鼠脊髓修复的机制。
- 黄成锋周正芳郭惠明范瑞新郑少忆陈寄梅庄建朱平
- 关键词：脊髓损伤TRKC
- 心脏保存的研究进展被引量：2
- 2013年
- 1967年南非外科医生ChfistiaanBamard成功完成世界首例人类心脏移植,从此心脏外科开始踏入了以往的禁区。心脏移植的不断发展。给越来越多终末期心脏病患者带来希望。目前，心脏保存方案的制定主要基于（1）低温限制新陈代谢；（2）保持机体结构活力；（3）减少缺血再灌注损伤。供心保护包括心脏停搏、离体心脏保存、心脏移植复跳等过程。本文主要对离体心脏保存方法以及保存液的研究进展进行综述。
- 王世强陈寄梅庄建朱平
- 关键词：缺血再灌注损伤心脏移植心脏病患者外科医生心脏外科
- 164例急诊冠状动脉搭桥术近期疗效分析被引量：4
- 2010年
- 目的总结164例急诊冠状动脉旁路移植术(ECABG)治疗冠状动脉狭窄患者的临床经验,探讨急诊冠状动脉搭桥术的手术指征、并发症及围术期处理方法。方法2004年2月～2009年1月,我院共有164例患者进行急诊冠状动脉搭桥术(ECABG),占同期全部冠脉搭桥患者的14.8%。现对急诊冠状动脉搭桥术患者的临床资料进行回顾性分析。结果本组患者合并糖尿病62例,高血压86例,高脂血症104例,脑血管意外11例,心肌梗死史115例,最近发生心肌梗死143例。冠脉病变数中合并左主干病变83例,前降支系统148例,回旋支系统140例,右冠系统141例。本组合并左室室壁瘤12例,肺动脉高压41例,二尖瓣狭窄(MS)1例,二尖瓣关闭不全(MI)85例,主动脉瓣关闭不全(AI)36例,三尖瓣关闭不全(TI)54例。术前肌酐异常70例。本组患者中,有41例在体外循环支持下进行搭桥术(其中:31例在心脏停跳后手术,10例在心脏停跳后手术),体外循环时间为72～519min,升主动脉阻断时间为21～330min;另有123例是在非体外循环下,进行搭桥术。围术期使用主动脉内气囊反搏装置(IABP)77例(其中:术前植入70例,术中植入3例,术后植入4例);术中同期行主动脉瓣(AV)手术5例,二尖瓣(MV)手术12例,三尖瓣(TV)手术12例,左心室(LV)室壁瘤修补术12例,室间隔(VSD)修补术10例。术后ICU使用肾上贤素46例,去甲肾上贤素28例,再次开胸止血术16例,术后发生低心排46例,围术期心梗2例,新发AF:40例,新发房室传导阻滞3例,心跳骤停或室颤26例,心包填塞15例,肢体切口感染9例,胸部切口感染9例,败血症3例,持续昏迷多于24h11例,卒中2例,气管切开4例,辅助通气超过24h60例,肺炎26例,肾衰44例,抗凝并发症6例,胃肠道并发症13例,多系统衰竭10例。围术期死亡22例,占13.4%,康复出院142例。结论急诊冠状动脉搭桥术是挽救生命、缓解症状和提高生活质量的有效手段。只要适应证选择得当,对AMI�
- 陈培锦朱平郑少忆麦明杰黄劲松郭惠明黄克力谢斌吴若彬
- 关键词：急诊手术冠状动脉旁路移植术并发症围手术期
