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浙江省自然科学基金(Y206273)
作品数:
2
被引量:4
H指数:2
相关作者:
张敏
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张幸
朱丽瑾
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温石棉诱导人支气管上皮细胞错配修复基因表达改变
被引量:2
2011年
目的研究温石棉诱导人支气管上皮细胞系的BEAS-2B细胞恶性转化活力及错配修复基因表达的变化。方法以2×10-3μg/m2温石棉纤维染毒BEAS-2B细胞,每10 d染毒24 h,待细胞出现生长抑制后用锚着不依赖性生长实验判断细胞恶性转化,并利用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测温石棉对BEAS-2B染毒12 h、24 h、48 h、60 d等不同染毒阶段的人类错配修复基因hMSH1和hMLH2的mRNA表达的变化。结果细胞染毒60 d后生长加快,接触抑制消失,呈现重叠生长,并可在软琼脂中生长。温石棉染毒24 h和48 h组mRNA表达下调,60 d组表达上调。结论温石棉可导致人支气管上皮细胞BEAS-2B错配修复基因表达发生变化。
朱丽瑾
鞠莉
肖芸
张敏
钟惠仙
张幸
关键词:
温石棉
错配修复基因
基因表达
温石棉诱导人支气管上皮细胞凋亡及氧化的作用
被引量:2
2009年
目的研究温石棉诱导永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的凋亡和活性氧(ROS)的生成,并观察自由基清除剂对其诱导作用的拮抗作用。方法选用BEAS-2B,用0、5、10、20、100、200μg/cm^2浓度的温石棉悬液及0、100、200、400、800、1600μg/ml的温石棉浸出液,设立正常空白对照、阴性对照(标准硅灰石)和阳性对照(标准石英),用锥虫蓝排斥法检测细胞存活率,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞凋亡片段,流式细胞术检测细胞凋亡率及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关基因caspase-3的表达水平。采用荧光探针2′,7′-二氯双氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)测定温石棉刺激后细胞产生的ROS水平,并观察自由基清除剂过氧化氢酶、二甲亚砜和甘露醇对ROS生成和基因表述水平的影响。结果温石棉刺激BEAS-2B 24h后,0、5、10μg/cm^2温石棉悬液和0、100、200μg/ml温石棉浸出液的细胞存活率大于90%。并且检测到凋亡细胞DNA凋亡片段。随着温石棉悬液和浸出液浓度的增加,BEAS-2B凋亡率上升,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。温石棉悬液和浸出液可明显增强细胞caspase-3 mRNA的表达和诱导ROS产生。过氧化氢酶、二甲亚砜和甘露醇等自由基清除剂则可减轻caspase-3表达和阻断ROS生成,对温石棉悬液组细胞的ROS阻断率分别为23.7%、21.6%和11.2%,对温石棉浸出液组ROS阻断率分别为37.9%、40.3%和10.6%。结论温石棉可诱导BEAS-2B发生凋亡,ROS在BEAS-2B的凋亡中起重要作用。
张敏
朱丽瑾
贾振宇
肖芸
鞠莉
张幸
关键词:
活性氧组分
自由基清除剂
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