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副猪嗜血杆菌hhdA基因的克隆与分子特征: 根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdA的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从分离的副猪嗜血杆菌中扩增其目的基因,将扩增产物纯化与pMD18-T载体连接并转化DH5α菌株,用凝胶电泳、PCR和BamHⅠ、Hind...; 宋帅李春玲李淼杨冬霞; 关键词：副猪嗜血杆菌分子特征; 文献传递

副猪嗜血杆菌和猪链球菌双重PCR方法的建立与应用被引量：5: 2009年; 针对副猪嗜血杆菌和猪链球菌16S rRNA序列各设计1对特异性引物,分别能扩增出822 bp和294 bp的DNA片段,并据此建立了快速准确鉴别副猪嗜血杆菌和猪链球菌的双重PCR方法,临床试验证明该方法具有很好的特异性、敏感性,能对临床病料进行鉴别诊断。对161份临床样本检测结果显示,副猪嗜血杆菌的检出率为23.75%,猪链球菌的检出率为43.48%,二者混合感染率为9.94%。; 贾爱卿李春玲王贵平杨冬霞何丽丽王金生; 关键词：猪链球菌副猪嗜血杆菌 PCR

副猪嗜血杆菌ERIC-PCR指纹图谱多样性研究: 采用ERIC-PCR技术对广东地区临床发病猪群分离的43株副猪嗜血杆菌进行DNA指纹图谱多样性分析。结果表明,43株副猪嗜血杆菌可分为22种不同的基因亚型,分离自同一猪场和相同血清型的菌株表现出不同的基因型,证实副猪嗜血...; 贾爱卿李春玲王贵平杨冬霞何丽丽孙俊颖; 关键词：副猪嗜血杆菌 ERIC-PCR 基因型多样性; 文献传递

抗原表位研究方法进展被引量：31: 2010年; 抗原表位是抗原分子中的主要功能单位,能有效刺激机体的细胞免疫和体液免疫。随着免疫学和生物信息学技术的不断发展,用于研究T细胞表位和B细胞表位的方法得到了很大的提高。论文中概述了近几年用于研究T细胞表位的预测方法和鉴定方法,以及在B细胞表位研究中所用的表位肽扫描技术、蛋白质"切割"法、噬菌体展示技术、X-衍射与核磁共振、表位预测方法等技术,并对每种研究方法进行了比较,为从事抗原表位研究的人员提供参考,从而更有利于表位肽疫苗的研制和诊断方法的建立。; 宋帅李春玲贾爱卿杨冬霞李淼; 关键词：T细胞表位 B细胞表位

副猪嗜血杆菌广东分离株对断奶仔猪的毒力测定被引量：2: 2011年; 为研究广东省兽医公共卫生实验室分离保存的广东地区副猪嗜血杆菌流行血清型菌株对断奶仔猪的毒力和致病性,并了解从豚鼠试验中筛选出来的副猪嗜血杆菌毒力株是否对其宿主也具有同等毒力,通过腹腔接种的方式感染6周龄健康断奶仔猪,感染活菌含量7×109 CFU,攻毒后观察3周,每天记录其临床症状、剖检死亡及濒死的猪,分离细菌并观察病理变化。结果显示,从豚鼠试验筛选出的广州地区流行血清型4型、5型、12型的强毒株和弱毒株通过腹腔接种7×109 CFU/头副猪嗜血杆菌都可以引起仔猪发病,但血清型之间及同一血清型不同菌株之间的发病和死亡情况存在差异,血清5型分离菌株强毒株H45和弱毒株H9的发病率和死亡率均高于血清4型和12型分离菌,血清4型H25和12型H31的毒力分别强于其弱毒株H33和H30,24 h后死亡的仔猪具有明显的格氏病的典型临床症状和病理变化。; 李淼王贵平李春玲杨冬霞宋帅; 关键词：副猪嗜血杆菌断奶仔猪毒力测定

副猪嗜血杆菌ERIC-PCR指纹图谱多样性研究被引量：10: 2010年; 建立了副猪嗜血杆菌ERIC-PCR分型技术,并应用于临床分离菌株的流行病学调查。试验结果表明,47株副猪嗜血杆菌产生28种不同的指纹图谱,分离自同一猪场和相同血清型的菌株表现出不同的指纹图谱,不能进行血清分型的副猪嗜血杆菌应用该方法可得到充分区分,证实副猪嗜血杆菌ERIC指纹图谱存在丰富的多样性,ERIC-PCR方法是副猪嗜血杆菌流行病学规律分析的有效方法。; 贾爱卿李春玲王贵平杨冬霞; 关键词：副猪嗜血杆菌 ERIC-PCR 指纹图谱

副猪嗜血杆菌hhdA基因的鉴定和分析: 副猪嗜血杆菌可引起猪的格氏病,不同毒力菌株之间在其分子水平上的差异性还不清楚。从广东省不同地区发病猪场送检病猪中分离到9株细菌(H1～H9),并对其hhdA基因进行了鉴定和分析。结果显示,所分离的9株细菌经形态观察、生化...; 宋帅李春玲杨冬霞李淼; 关键词：副猪嗜血杆菌克隆; 文献传递

广东地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定被引量：12: 2010年; 采用细菌分离的方法,结合PCR检测,生化鉴定,对广东地区2007年9月-2008年9月37个患病猪场送检的372份病料进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,通过数据统计分析,显示副猪嗜血杆菌分离率达24.00%,副猪嗜血杆菌感染猪场阳性率达40.54%,表明副猪嗜血杆菌病在广东地区已普遍流行。; 何丽丽李春玲王贵平贾爱卿杨冬霞宣春玲郑铁锁王金生; 关键词：副猪嗜血杆菌细菌分离

副猪嗜血杆菌hhdB-A基因的鉴定和分析: 2010年; 为了明确副猪嗜血杆菌致病菌株的毒力相关因子,从广东省不同地区发病猪场送检病猪中分离到9株细菌(H1～H9),并对其hhdB-A基因进行了鉴定和分析。结果显示,所分离的9株细菌经形态观察、生化特性鉴定和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌阳性,并具有卫星现象和不溶血特征。用hhdB-A基因引物从分离菌株中扩增到了特异性片段,序列分析表明,所获得的hhdA基因序列与GenBank中副猪嗜血杆菌SH0165,HPS59的hhdA基因同源性为98%～100%,分离菌株hhdA基因之间序列同源性为99.0%～99.9%;hhdB基因序列与SH0165的hhdB基因同源性为99%,分离菌株hhdB基因之间序列同源性为97.5%～99.8%;推导的氨基酸序列与少数放线杆菌、杜克雷嗜血杆菌的溶血素蛋白具有一定的相似性。RT-PCR扩增到了hhdB-A基因的目的条带,表明该基因在分离菌株中得到了相应的表达。; 宋帅李春玲李淼杨冬霞; 关键词：副猪嗜血杆菌克隆

副猪嗜血杆菌hhdB基因的鉴定和分析: 为了明确副猪嗜血杆菌致病菌株的毒力相关因子,从广东省不同地区发病猪场送检病猪中分离到9株细菌(H19),并对其hhdB基因进行了鉴定和分析。结果显示,所分离的9株细菌经形态观察、生化特性鉴定和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌阳性...; 宋帅李春玲李淼杨冬霞; 关键词：副猪嗜血杆菌克隆; 文献传递

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广东省农业攻关项目(2007A020300005-11)