广东省医学科学技术研究基金(B2009191)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：熊兴东刘新光骆艳婷刘振杰徐宁更多>>
- 相关机构：广东医学院广东省中医院东莞市人民医院更多>>
- 发文基金：东莞市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金广东省高等学校自然科学研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组金属硫蛋白2A质粒的构建与表达被引量：2
- 2012年
- 目的构建重组金属硫蛋白2A(MT-2A)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究MT-2A奠定基础。方法从人骨骼肌细胞cDNA文库中PCR扩增MT-2A基因DNA序列,构建重组表达质粒MT2A-pET32a,PCR与DNA测序法鉴定插入序列;重组细菌用IPTG诱导表达,His-bind亲和层析柱纯化MT-2A蛋白,Western blotting鉴定蛋白特性。结果扩增获得的MT-2A基因片段长186bp,DNA测序证实MT2A-pET32a重组质粒构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约为29×103,Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒MT2A-pET32a,在大肠埃希菌内诱导表达并纯化获得MT-2A。
- 刘振杰赵树勇周静骆艳婷郑慧玲陈维春熊兴东徐宁刘新光
- 关键词：基因表达大肠埃希菌
- MCM7基因启动子区-153A＞T多态位点对宫颈癌遗传易感性及基因转录活性的影响
- 2010年
- 目的:探讨MCM7基因启动子区-153A>T多态位点(rs1534310)与宫颈癌遗传易感性的关系及对基因转录活性的影响。方法:利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,对87例宫颈癌患者和116名健康对照的MCM7-153A>T多态位点进行分型,采用非条件逻辑回归分析统计该多态位点与宫颈癌易感性的相关性。构建含-153A>T多态位点所在启动子区的双荧光报告载体,分析MCM7基因启动子区-153A>T多态位点对基因转录活性的影响。结果:TT、AT、AA基因型在病例组中的频率分别为23.0%、46.0%和31.0%,在对照组中分别是27.6%、44.0%和28.4%,两组间基因型频率分布差异无统计学意义(P=0.753)。非条件逻辑回归分析发现,以TT基因型作为参照,AT和AA基因型均没有显著增加个体患宫颈癌的风险(OR=1.26,95%CI=0.63-2.52,P=0.522以及OR=0.54,95%CI=0.62-2.79,P=0.485)。双荧光素酶报告基因分析结果显示含有-153A或T等位基因的启动子转录活性没有显著性差异(P=0.825)。结论:MCM7-153A>T多态位点不影响基因转录的活性,并且与广东汉族妇女宫颈癌易感性无相关性。
- 熊兴东曾俐琴熊卿圆杨志宏罗喜平刘新光
- 关键词：MCM7宫颈癌遗传易感性转录活性
