“重大新药创制”科技重大专项(2012ZX09201301-001)
- 作品数：3 被引量：42H指数：3
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- 中国百日咳疫苗的现状及研发趋势初探被引量：33
- 2012年
- 百日咳是许多国家的严重公共卫生问题,目前预防百日咳最有效和最经济的方法是接种百日咳疫苗,百日咳组分疫苗由于其保护效果好、不良反应低、质量稳定可控而成为新一代无细胞百日咳疫苗的首选。本文简要介绍百日咳的病原学、传播途径及流行病学特点,并对中国的百日咳疫苗研发趋势进行初步探讨。
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- 关键词：百日咳百日咳疫苗联合疫苗
- 无细胞百日咳疫苗中百日咳毒素活性检测方法的建立被引量：4
- 2014年
- 目的建立检测无细胞百日咳疫苗（acellular pertussis vaccine,APV）中百日咳毒素（pertussis toxin,PT）活性的胎球蛋白结合试验ELISA方法。方法优化APV中PT残余含量的胎球蛋白结合试验ELISA检测方法,分析不同抗原稀释液对该方法的影响,并对该方法进行线性、精密度、灵敏度、特异性验证。分析丝状血凝素（filamentous hemagglutinin,FHA）、百日咳黏着素（pertactin,Prn）、白喉类毒素（diphtheria toxoid,DT）、破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）在成品疫苗剂量时（即50μg/ml、16μg/ml、25 Lf/ml、7 Lf/ml）对PT与胎球蛋白结合的影响,确定疫苗解吸附条件,并对不同厂家的8批吸附无细胞百白破联合疫苗进行解析附后,检测PT含量,计算CV。结果在胎球蛋白包被浓度为5μg/ml时,使用p H 8.5含1%胎牛血清白蛋白（BSA）Tris缓冲液对样品进行稀释后,直接用酶标抗PT抗体进行检测,建立的胎球蛋白结合试验ELISA检测方法的剂量反应曲线线性良好（r均〉0.99）;试验内CV为13.74%-5.85%,试验间CV为2.75%-10.39%,灵敏度可达4 ng/ml,精密度好,灵敏度高;降低了PTd的干扰作用,特异性较好。FHA、Prn、DT、TT在成品疫苗剂量时对PT与胎球蛋白的结合无影响;确定疫苗解吸附条件为Tris-柠檬酸钠溶液（4%,w/v）（p H 8.5）;各批疫苗3次检测结果的CV值均符合要求,重复性较好。结论优化后的胎球蛋白结合试验ELISA检测方法可用于APV中残余PT含量的检测。
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- 关键词：无细胞百日咳疫苗毒素胎球蛋白活性
- 检测百日咳毒素活性的中国仓鼠卵巢细胞簇集法的建立和初步应用被引量：5
- 2013年
- 目的 建立检测百日咳毒素（pertussis toxin,PT）活性的中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary,CHO）细胞簇集法,并将建立的方法应用于无细胞百日咳疫苗生产的质量控制.方法 将PT标准品系列稀释后与培养的CHO细胞混合,观察PT引起CHO细胞簇集的敏感度,并研究反应时间、反应溶液的pH值、缓冲液浓度、加样顺序等因素对PT引起CHO细胞簇集的影响.应用建立的方法检测百日咳疫苗生产过程中脱毒前后的PT活性及丝状血凝素和百日咳黏着素组分中残留的PT活性.结果 PT使CHO细胞发生最佳簇集的理想反应时间是24h,最适pH值是7～8,适宜氯化钠缓冲液浓度为0.15 mol/L,最优加样顺序是先加CHO细胞再加PT.建立的CHO细胞簇集法的检测敏感度为10pg/ml PT,且重复性良好.结论 CHO细胞簇集法可用于PT活性检测.
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- 关键词：CHO细胞百日咳毒素
