国家自然科学基金(30872391)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：首都医科大学附属北京朝阳医院中国科学院海洋石油总医院更多>>
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- 用2-DE和MALDI-TOF-MS筛选多发性骨髓瘤患者骨髓上清液中标志物
- 2011年
- 目的运用2-DE和MALDI—TOF—MS研究MM患者骨髓上清液中差异表达蛋白，以寻找对MM发病机制研究和诊断或鉴别诊断的特异性蛋白质标志物。方法收集14例MM患者、5例其他血液系统恶性肿瘤患者及5名健康对照者骨髓上清液标本。除去标本中白蛋白和免疫球蛋白G（IgG）后，用2-DE分离3组骨髓上清液标本。用ImageMaster 2D platinum5．0图像分析软件分析比较3组2-DE凝胶图像，以差异倍数在3倍以上的蛋白点作为候选差异表达蛋白。然后，用MALDI—TOF—MS对重复性较好的候选差异表达蛋白做PMF和二级质谱鉴定。将得到的肽片段质量进行NCBInr数据库检索，以鉴定出相应的差异表达蛋白。结果用图像分析软件对3组骨髓上清液2-DE凝胶进行分析比较，从MM组与健康对照组中筛选出47个差异蛋白点，从MM组与疾病对照组中筛选出58个差异蛋白点。从MM组选取41个差异点进行质谱分析并鉴定，发现MM组与其他2组相比，5种高表达蛋白为免疫球蛋白J链、K轻链、入轻链、前病毒遗传的Gag多聚蛋白和与半抗原结合的含成熟氧（末）端的催化抗体；3种低表达蛋白为血红蛋白、结合珠蛋白（Hp2）、锌-α2-糖蛋白。这些差异蛋白部分与MM的临床表现相关，部分与MM的发生发展及临床治疗相关。结论应用2-DE和MALDI—TOF—MS技术从MM患者骨髓上清液标本中筛出与MM疾病相关的8种差异表达蛋白，为进一步研究MM发生发展机制，完善MM诊断、鉴别诊断指标提供了参考依据。
- 李佳赵冠飞房亚哲翟玉华陈文明吴琳孙卫红刘金英王清涛
- 关键词：多发性骨髓瘤生物学标记
- 质谱技术分析多发性骨髓瘤患者血清差异蛋白被引量：2
- 2012年
- 目的应用双向电泳(2-DE)和质谱技术分析多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的差异表达蛋白,寻找MM特异性蛋白标记物。方法收集MM患者5例、其他血液系统恶性肿瘤患者及正常对照者血清各10例,三组样本等体积混合,去除高丰度白蛋白和IgG,应用2-DE分离3组血清样本,凝胶经银染显色和图像数据分析识别差异蛋白质点,以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对差异蛋白质点进行鉴定。结果通过凝胶软件分析MM与疾病对照组及正常对照组血清2-DE图谱,共得到51个三倍以上差异蛋白点,对上述差异蛋白进行MALDI-TOF-MS质谱分析,共鉴定出22种阳性蛋白,其中13种蛋白表达上调,包括高表达蛋白如丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶RIO1亚型2、Rab相关蛋白Rab37亚型2、HP蛋白、锌指结构α2糖蛋白等;9种蛋白表达下调,包括α2-HS-糖蛋白、转铁蛋白、多聚素-1等。结论 MM组与疾病对照组和正常对照组间存在差异表达的蛋白质,这些差异蛋白有助于MM早期诊断和鉴别诊断,并为MM发病机制的进一步研究提供线索。
- 赵冠飞房亚哲吴琳翟玉华张洪涛陈文明王清涛
- 关键词：多发性骨髓瘤双向凝胶电泳质谱鉴定差异蛋白
- 应用尿液蛋白质组技术筛选多发性骨髓瘤相关蛋白的初步研究被引量：3
- 2011年
- 目的应用蛋白质组学相关技术筛选多发性骨髓瘤(MM)患者尿液中差异表达的蛋白质,寻找与MM诊断相关的疾病标志物。方法收集MM组、疾病对照组(肾脏疾病)、健康对照组尿液各8例,TCA沉淀法提取尿液蛋白质后建立双向凝胶电泳图谱;Image Master软件筛选差异蛋白质;利用MALDI-TOF-MS获得肽质量指纹图谱,通过Mas-cot软件进行数据库搜索,得到蛋白质鉴定结果。结果筛选出57个差异蛋白点,43个在MM组上调,14个下调。对其中30个差异蛋白点进行分析,鉴定出甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(Map19)、人组织相容性抗原A2(Hla-A2)、视黄醇结合蛋白(RBP)、转甲状腺素蛋白(TTR)、免疫球蛋白轻链、α2-糖蛋白1(ZAG1)等9类差异表达的蛋白质。结论应用尿液蛋白质组技术成功筛选鉴定出MM尿液中存在的差异蛋白质,可能是MM疾病诊断相关标志物,尚需要进一步验证。
- 房亚哲刘津吴琳娄晓敏赵冠飞张洪涛陈文明王清涛
- 关键词：多发性骨髓瘤尿液蛋白质组学MALDI-TOF-MS
