山东省自然科学基金(Zr2009cm047)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：潍坊医学院潍坊医学院附属医院潍坊市人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Cx43基因启动子去甲基化与乳腺癌MDA-MB231细胞上皮间质转换的相关性研究被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨乳腺癌细胞中连接蛋白43(Cx43)基因启动子甲基化与乳腺癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法:甲基化PCR检测Cx43启动子甲基化的频度;5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dC)培养乳腺癌MD-MBA-231细胞后,反转录PCR(RT-PCR)乳腺癌细胞中Cx43 mRNA,免疫荧光、蛋白质印迹法检测E-cadherin、波蛋白(vimen-tin)及Cx43蛋白表达,甲基化PCR检测启动子甲基化的变化。结果:在应用5-Aza-dC处理前,MD-MBA-231 Cx43基因呈甲基化状态,将4.0μmol/L的5-Aza-dC作用48 h后,乳腺癌细胞Cx43基因甲基化逆转;Cx43mRNA表达水平增加,为对照组的6.5倍。蛋白质印迹检测结果显示,Cx43蛋白相对灰度值为4.3±0.2,明显高于对照组。处理组细胞E-cadherin表达增加,vimentin表达下调。结论:5-Aza-dC能逆转乳腺癌细胞MD-MBA-231的Cx43基因异常甲基化,促进Cx43基因的再表达,在一定程度上逆转乳腺癌MDA-MB231细胞EMT。
- 赵修世王红梅孙静王琳李文通
- 关键词：连接蛋白43甲基化
- 过表达Snail增强肺癌细胞A549的体外侵袭能力被引量：4
- 2010年
- 用锌指转录因子Snail诱导肺癌细胞A549发生上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),检测肺癌发生EMT后细胞侵袭能力的变化,为临床筛选分子靶向药物提供依据.构建pcDNA3.1-snail载体,用pcDNA3.1-snail及空pcDNA3.1载体转染肺癌A549细胞后,进行G418筛选;光镜观察培养后细胞形态学的改变、免疫细胞化学与免疫荧光检测细胞表达E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的改变,Western印迹检测细胞中E-钙黏着蛋白和波形蛋白的改变,Transwell侵袭小室法进行细胞体外侵袭能力检测.采用pcDNA3.1-snail转染细胞后,A549细胞变得细长,细胞融合度降低.免疫细胞化学、免疫荧光、Western印迹结果显示,E-钙黏着蛋白表达降低,波形蛋白表达升高;transwell侵袭小室法结果显示,过表达Snail的A549细胞穿透matrigel胶的细胞数明显增多.结果提示,Snail能有效诱导肺癌发生EMT,并且能增强肺癌的体外侵袭能力.
- 李洪利尹崇高李文通孙永红钟延美
- 关键词：转录因子SNAIL肺癌
