江苏省自然科学基金(BK2008466)
- 作品数：8 被引量：70H指数：4
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- 溃疡性结肠炎小鼠结肠Cajal间质细胞及干细胞因子的变化被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨结肠Cajal间质细胞(ICC)、干细胞因子(SCF)在溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用。方法:将BALB/c小鼠随机分为正常对照组(n=8)和UC组(n=24),于造模后1、4、7天分别处死UC组8只小鼠,取远端结肠,用Westernblot方法检测SCF的表达;免疫组化检测结肠ICC的变化,并进行结肠组织学评分。结果:结肠组织学评分在7天达最高值(P<0.05)。与正常小鼠比较,UC小鼠结肠肌间ICC表达明显减少(P<0.05),结肠SCF的表达也显著减少(P<0.01),SCF与ICC呈正相关(UC4天时,r=0.862,P=0.027;UC7天时,r=0.948,P=0.004)。结论:UC小鼠远端结肠组织内SCF表达下降,伴随ICC数量减少,提示UC病变可能与SCF/Kit系统下调有一定的相关性。
- 李慧陆宗海陈蕾林琳
- 关键词：溃疡性结肠炎CAJAL间质细胞干细胞因子远端结肠
- 胰岛素样生长因子1调节胃平滑肌细胞表达干细胞因子的ERKMAPK通路被引量：7
- 2010年
- 目的 探讨胰岛素样生长因子1（IGF-1）调节胃平滑肌细胞（SMC）表达干细胞因子（SCF）的信号传导途径.方法 培养SD大鼠胃SMC,α-肌动蛋白免疫荧光鉴定,Western印迹、反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测胃SMC表达SCF的变化情况：（1）IGF-1作用后;（2）IGF-1受体（IGF-1Rα）抗体阻断IGF-1R后;（3）PD-98059、LY-294002分别抑制丝裂原激活蛋白激酶的激酶（MEK）、磷脂酰激醇3激酶（PI3K）后.结果 在无血清培养条件下,SCF在大鼠胃SMC中少量表达,低剂量IGF-1（5和10μg/L）对SCF表达均无影响（均P〉0.05）;中、高剂量IGF-1（50、100、150 μg/L）诱导分别使SCF蛋白表达上调达2.79、5.51及5.35倍,mRNA表达上调达1.81、2.54及2.38倍（均P〈0.05）;且促进SCF合成的最高峰在第16小时（蛋白表达上调达2.36倍,mRNA表达上调达5.51倍,均P〈0.05）.IGF-1Rot抗体可抑制SCF合成,抑制作用呈浓度依赖性（均P〈0.05）.分别用PD-98059、LY-294002预处理SMC、再用IGF-1诱导,PD-98059能部分阻断SCF的表达（蛋白抑制率为23%,mRNA抑制率为48%,均P〈0.05）、LY-294002对SCF的表达无影响（P〉0.05）.结论 IGF-1可通过IGF-1R以时间和剂量依赖性方式诱导胃SMC产生SCF,且IGF-1诱导SCF的表达可能依赖于ERKMAPK信号传导通路.
- 宁月季张蔚成家飞李学良王美峰林琳
- 关键词：干细胞因子
- 胃食管反流病反流症状程度及相关因素的临床分析被引量：12
- 2011年
- 胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease，GERD）是指胃内容物反流人食管引起不适症状和（或）并发症的一种疾病，包括食管症状（反流症状属于食管症状）以及食管外症状两大类。本研究对轻度和重度反流症状的GERD患者的人口学特征、生活质量、精神心理状态等资料进行了调查，旨在为深人了解GERD并能为临床治疗提供一些帮助。
- 郝坤艳姜柳琴李学良林琳王关峰王一琳
- 关键词：胃食管反流病反流症状胃内容物反流精神心理状态食管症状GERD
- 胰岛素样生长因子-1对胃平滑肌细胞合成干细胞因子的作用被引量：1
- 2009年
- 目的 探讨胰岛索样生长因子-1（IGF-1）对胃平滑肌细胞（SMC）及其合成的干细胞因子（SCF）的影响.方法 使用酶解法原代培养胃SMC,在进行-actin鉴定后,IGF-1组于细胞培养液中分别加入不同浓度的IGF-1（0、50、100、150ìg/L）,抗IGF-1组于细胞培养液中加入IGF-1（100μg/L）和IGF-1α受体（IGF-1Rα）抗体（浓度分别为0、50、100,150μg/L）,分别培养24 h.以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色试验检测细胞增殖程度,以Western印迹法、逆转录（RT）-PCR、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞中及细胞上清中SCF的表达情况.结果 IGF-1可促进胃SMC增殖和SCF合成增加,离体实验中100μg/L可能是IGF-1促进胃SMC增殖和SCF合成的有效终浓度;IGF-1Rα抗体可抑制胃SMC增殖和SCF合成,抑制作用呈浓度依赖性.结论 IGF-1介导胃SMC合成SCF增加.
- 李慧林琳宁月季张蔚徐丽明李学良
- 关键词：胰岛素样生长因子1平滑肌干细胞因子
- 酶消化法分离培养糖尿病大鼠结肠平滑肌细胞被引量：1
- 2011年
- 目的探讨糖尿病(DM)大鼠结肠平滑肌细胞(SMC)的培养方法。方法建立DM大鼠模型,分离结肠,用酶消化法体外培养正常及DM大鼠结肠SMC,α-肌动蛋白免疫荧光鉴定。结果造模后大鼠体重(165±16.8)g,较正常组(286±14.5)g明显减轻(P<0.01);血糖(25.4±3.4)mmol/L,明显高于正常组(4.3±0.8)mmol/L(P<0.01)。正常结肠SMC培养7 d左右即可融合成片、相互交叉成多层,进行传代;DM大鼠结肠SMC需12～14 d融合成片,进行传代;传代后正常结肠SMC需3～4 d即可进行下一次传代,而糖尿病结肠SMC则需5 d。α-肌动蛋白免疫组化染色鉴定均为SMC。结论 DM大鼠结肠SMC增殖速度比正常SMC慢,培养条件也较正常SMC更严格,形态学上与正常SMC相似。
- 袁玉丰余盈娟林琳
- 关键词：糖尿病酶消化结肠平滑肌细胞
- 胰岛素促进结肠平滑肌细胞合成干细胞因子的信号转导途径被引量：1
- 2011年
- 目的探讨胰岛素（Ins）促进结肠平滑肌细胞（SMC）表达干细胞因子（SCF）的细胞内信号传导途径。方法分离培养SD大鼠结肠SMC，采用a-actin免疫荧光鉴定。分3大组进行实验。①Ins浓度梯度组：SMC添加不同浓度Ins（0、2．5、5、20、40和80mg／L），培养16h。②Ins时间梯度组：SMC＋Ins（40mg／L），分别培养0、8、16和24h。③信号通路阻断组：SMC加LY-294002或PD-98059预处理后，再予以40mg／L的Ins诱导16h。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测结肠SMC增殖情况，Western印迹和反转录PCR检测SCF的变化。结果①Ins在5mg／L浓度即能显著促进SMC增殖，其效应与20、40和80mg／L时差异无统计学意义（P值均d0．05）。②与未添加Ins组（即空白对照组）比较，低中剂量Ins（2．5、5和20mg／L）即有促进结肠SMC表达SCFmRNA和SCF蛋白的作用（P〈0．05），这种作用在Ins40mg／L时达到最大（P〈0．05），80mg／L时与40mg／L时差异无统计学意义（P〉0．05）。③与0h时相比，40mg／L的Ins作用于SMC8h后SCF表达增加（P〈0．05），16h后达峰值（P〈0．05），24h与16h差异无统计学意义（P〉0．05）。④与空白对照组和溶剂对照组相比，LY-294002、PD-98059处理16h，均能减少Ins诱导的SCF的表达（P值均〈0．05）。结论Ins能促进SMC增殖；在一定范围内呈剂量与时间依赖性诱导结肠SMC合成SCF，该效应可能与PI3K与MAPK两条信号通路有关。
- 余盈娟袁玉丰林琳
- 关键词：胰岛素结肠干细胞因子1-磷脂酰肌醇3-激酶
- 老年胃食管反流病患者临床特征分析被引量：44
- 2010年
- 目的 探讨老年胃食管反流病（GERD）患者的临床特征,为临床诊断、治疗提供帮助.方法 根据GERD蒙特利尔的标准、中国胃食管反流病共识意见等,将GERD患者分为老年组（年龄≥65岁）与中青年组（年龄＜65岁）;通过问卷调查,分析2组GERD患者的食管裂孔疝（HH）、食管炎（洛杉矶标准）、临床症状（反流、烧心等）、生活质量.结果 两组性别比差异无统计学意义（P＞0.05）.与中青年GERD患者比较：老年患者重度食管炎（LC级＋LD级）比例高（P＜0.05）;典型反酸、烧心症状轻（P＜0.05）,食管外症状发生率高（P＜0.05）;但HH发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.老年患者生理功能、总体健康、活力、社会功能、精神健康、躯体生理健康总评和精神心理健康总评积分与年轻组差异无统计学意义（P＞0.05）,仅生理职能、躯体疼痛、情感职能积分较中青年组高（P＜0.05）.结论 老年GERD患者典型反流症状（反食、烧心）较少见,易发生重度食管炎,但老年GERD患者生活质量无明显下降.
- 郝坤艳林琳李学良姜柳琴司新敏王美峰王一琳
- 关键词：胃食管反流老年人食管炎生活质量
- 胰岛素样生长因子-1对糖尿病大鼠结肠平滑肌细胞表达干细胞因子的影响被引量：2
- 2011年
- 背景:糖尿病胃肠动力障碍与Cajal间质细胞(ICC)数量和超微结构异常有关。前期实验发现胰岛素样生长因子-1(IGF-1)可诱导正常大鼠胃肠平滑肌细胞(SMC)表达十细胞因子(SCF),从而有利于ICC的生存。目的:探讨IGF-1对糖尿病大鼠结肠SMD表达SCF的影响及其信号转导通路方法:以链脲霉素建立糖尿病大鼠模型分离、培养正常和糖尿病大鼠结肠SMD设不同浓度(0、50、100、150μg/L)、不同时间(0、8、16、24、48 h)IGF-1干预组和MEK抑制剂PD98059+IGF-1、PI3K抑制剂LY294002+IGF-1干预组.以RT-PCR和蛋白质印迹法检测SMC中的SCF表达。结果:糖尿病大鼠结肠SMC的生长速度较正常大鼠减慢。无血清培养条件下.正常和糖尿病结肠SMC中SCFmRNA和蛋白表达较低.IGF-1可诱导SCF表达增加,最大有效浓度为100μg/L,诱导高峰时间正常对照组为16 h,糖尿病组为24 h.经PD98059预处理的SMd.IGF-1诱导的SCF表达部分受抑.LY294002预处理对IGF-1的作用无明显影响结论:0～100μg/LIGF-1在24 h内能以剂量和时间依赖负性方式诱导糖尿病大鼠结肠SMC表达SCF,但效应弱于其对正常大鼠结肠SMC的作用.
- 袁玉丰余盈娟林琳
- 关键词：结肠干细胞因子
