国家自然科学基金(30972720)
- 作品数：5 被引量：29H指数：3
- 相关作者：常晓天赵燕王月俭房克华赵丹更多>>
- 相关机构：山东省医药生物技术研究中心山东省千佛山医院山东省医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高表达碳酸酐酶1参与骨化过程的研究
- 2012年
- 目的碳酸酐酶1不仅可以催化二氧化碳水化反应，还可以加速碳酸钙的形成，而钙沉淀是新骨形成的重要步骤。本研究以培养细胞为模型探索碳酸酐酶1在骨形成过程中的作用。方法用成骨诱导培养基（OM）诱导骨肉瘤细胞Saos-2钙化，然后用茜素红染色法观察细胞矿化结节的形成，用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞骨化标志蛋白核心结合蛋白因子2（Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（OSX）、碱性磷酸酶（AIJP）、骨钙素和骨涎蛋白（BSP）的表达。用蛋白印迹法和荧光定量PCR检测细胞钙化前后碳酸酐酶1的表达量的变化。用碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺处理Saos-2细胞，观察细胞钙化过程是否被抑制。2组间比较采用t检验，不同时间点的统计学分析采用重复测量的方差分析。结果Saos-2细胞在OM诱导后形成大量矿化结节（0．68±0．03与2．76±0．13，P〈0．01），Runx2、ALP、骨钙素、OSX和BSP转录水平明显升高，显示OM可诱导Saos-2细胞钙化和骨化。Saos-2细胞钙化后碳酸酐酶1表达明显增高（0．25±0．03与0．94±0．06，P〈0．01）。Saos-2细胞经乙酰唑胺处理后，碳酸酐酶1的表达量减少（1．09±0．05与0．55±0．07，P〈0．05），矿化结节形成明显减少（2．76±0．13与2．19±0．07，P〈0．01），骨化标志蛋白的表达也明显下降，说明抑制碳酸酐酶1表达可以抑制Saos-2细胞矿化和骨化过程。结论碳酸酐酶1在新骨形成过程中起着重要作用。
- 郑亚冰王林赵丹王月俭安琨韩金祥常晓天
- 关键词：骨生成成骨诱导生物矿化
- 单核苷酸多态性与肿瘤遗传易感性的研究进展被引量：18
- 2011年
- 目的:总结国内外关于单核苷酸多态性(SNP)与肿瘤的相关研究进展。方法:应用Medline和CNKI期刊全文数据库检索系统,以"SNP"和"肿瘤"为关键词,检索1999-01-2010-11相关肿瘤易感性分析的文献。纳入标准:1)SNP的定义和应用;2)肿瘤易感基因的分类;3)SNP的作用机制;4)SNP与环境因子在肿瘤发展过程中的协同作用。根据纳入标准纳入分析43篇文献。结果:肿瘤易感相关基因包括癌基因和抑癌基因、DNA修复基因、代谢酶基因以及免疫相关基因等几大类。这些基因上含有多个SNP位点,其中有部分SNP可导致不同个体间肿瘤易感性的差异。结论:研究SNP在恶性肿瘤发生、发展过程中的致肿瘤性作用,有助于进一步理解肿瘤的发生机制,有望在肿瘤靶向治疗上取得新的突破。
- 房克华常晓天
- 关键词：肿瘤疾病遗传易感性
- α1抗胰蛋白酶角蛋白84和微管蛋白β链在类风湿关节炎滑膜组织中的高表达被引量：2
- 2013年
- 目的研究瓜氨酸化自身抗原在类风湿关节炎（RA）中的表达情况。方法分别对RA患者的滑膜和血清采用二维免疫印迹分析、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱、免疫印迹、免疫组织化学和酶联免疫吸附试验（ELISA）法研究特异性瓜氨酸化蛋白的表达变化；通过ELISA法检测RA患者血清中潜在的自身抗原；采用单因素方差分析、LSD检验、Kruskal-Walls检验以及Spearman等级相关进行统计分析。结果研究发现RA患者的滑膜组织和血清存在α1，抗胰蛋白酶（A1AT）、纤维蛋白原β链（FIBB）、角蛋白84（KRT84）、微管蛋白β链（TBB）和波形蛋白（VIME）5种特异性表达蛋白；A1AT、角蛋白84和TBB在RA患者的滑膜和滑膜液中显著高表达，此外，RA患者血清中KRT84高表达。结论在RA中特异表达的自身抗原包括：A1AT、FIBB、KRT84、TBB和波形蛋白，已有研究证明了FIBB和波形蛋白为自身抗原，同时证明了我们研究的可行性和结果的可靠性。
- 赵燕常晓天王月俭陈彧栗占国
- 关键词：瓜氨酸自身抗原
- 维生素D结合蛋白在类风湿关节炎滑膜中表达的研究被引量：6
- 2012年
- 目的本研究通过蛋白质组学的方法比较类风湿关节炎（RA）、骨关节炎及强直性脊柱炎（AS）滑膜组织中表达的蛋白，筛选RA滑膜中表达特异性下调的蛋白，并通过单核苷酸多态性（SNPs）分析方法分析靶蛋白编码基因对RA的遗传易感性。方法提取RA（10例）、骨关节炎（10例）及AS（10例）滑膜组织总蛋白，每类疾病的样本等比例混合，然后用2．D凝胶电泳进行分析，对RA样本中表达量明显低于骨关节炎和As的蛋白进行飞行时间质谱鉴定，检测结果用蛋白印迹法验证。用Taqman方法对中国人群中267例RA患者和160名健康对照的维生素D结合蛋白（VDBP）编码基因的标签SNPs进行基因分型，并扩大样本量（389例RA和371名健康对照）验证分型结果。采用单因素方差分析和Fisher确切概率法进行检验。结果蛋白质组学研究发现，在RA患者滑膜中VDBP表达量明显下降，蛋白印迹法也验证了这一结果。基因分型研究发现，SNP位点rs2282679与RA密切相关（P=-0．026794）。进一步扩大样本实验也得出了一致结果，rs2282679与RA有相关性[比值比（OR）=0．678639，95％可信区间（凹）0．541113～0．851118，P=O．000776]。结论与骨关节炎和AS患者相比，VDBP在RA患者滑膜中表达量明显下降。VDBP基因上的SNP位点rs2282679与RA有相关性。VDBP在RA中的表达下调及其基因的遗传效应显示VDBP可能参与RA的病理过程。
- 王月俭房克华赵丹潘继红赵燕张云忠常晓天
- 关键词：蛋白质组学关节炎类风湿单核苷酸
- 雌激素对胶原诱导关节炎动物模型发病过程的作用被引量：3
- 2010年
- 目的研究雌激素对胶原诱导关节炎(CIA)发病过程的影响以及对肽基精酰胺脱亚胺基酶4(PADI4)和TXNDC5表达的影响。方法雄性Lewis大鼠29只随机分成4组:正常对照组(H组,n=6)、CIA模型组(C组,n=8)、雌激素干预组(T组,n=8)和雌激素组(E组,n=7)。皮下注射牛Ⅱ型胶原(CⅡ)建立CIA模型,其间进行雌激素干预。ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素-1β(IL-1β)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量;免疫组织化学法、Western-blot法和real-time PCR法检测滑膜中PADI4和TXNDC5的表达。结果与C组相比,T组的关节炎发病时间约延缓6d(P=0.045),炎症程度和发病率无显著差异;TNFα和IL-1β的含量无明显改变,VEGF含量明显升高(P=0.023);T组滑膜组织异常增殖并伴毛细血管增生,PADI4主要表达于滑膜衬里及侵润的炎性细胞,TXNDC5主要分布于滑膜衬里及毛细血管的内皮细胞。雌激素明显刺激CIA滑膜中TXNDC5的表达(P<0.05),但对PADI4的表达无显著影响。结论雌激素虽然能延缓关节炎的发病时间,但可能通过上调TXNDC5的表达,刺激类风湿关节炎(RA)滑膜毛细血管增生。
- 韦超吴围屏赵燕王林闫新峰常晓天
- 关键词：类风湿关节炎胶原诱导关节炎雌激素
