国家自然科学基金(30160053) 作品数:3 被引量:30 H指数:3 相关作者: 方天祺 哈斯阿古拉 牛一丁 扈廷茂 李建国 更多>> 相关机构: 内蒙古大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家转基因植物研究与产业化专项 国家农业科技成果转化资金项目 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
花粉管通道法转基因技术在甜瓜品种河套蜜瓜上的应用 被引量:18 2007年 为建立甜瓜(Cucumis melo L.)简便易行转化频率高的转基因技术,以甜瓜品种河套蜜瓜为受体材料,以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体,进行了花粉管通道法转基因研究.自交授粉后分别于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h,切去柱头上端1/3部分,立即滴加质粒DNA溶液,果实成熟后收获转化种子.对T0代植株进行PCR检测,结果表明不同时间处理所得到的T0代植株均具有较高的转化频率,其中授粉后7 h滴加DNA溶液所获得的转化率为28.3%.对一部分PCR阳性的T0代植株基因组DNA进行Southern杂交分析,结果表明所有样品均出现特异性杂交条带,证明外源基因已整合到受体植物基因组中. 哈斯阿古拉 牛一丁 张丽 包常华 李建国 方天祺 扈廷茂关键词:甜瓜 花粉管通道法 转基因 河套蜜瓜 甜瓜果实特异性表达黄瓜素基因启动子区的克隆和序列分析 被引量:5 2006年 黄瓜素(cucum is in)是甜瓜类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶,其表达具有果实特异性.应用PCR方法从甜瓜基因组DNA中扩增出该基因自转录起始位点至上游一段长310 bp片段,并将其克隆到pUC 19载体中,序列分析表明该序列与已报道的相应序列完全相同,且具有TATA-box、CAAT-box、G-box、I-box-like和增强子元件TGTCACA等功能域,具有典型的果实特异性启动子特征.成功获得甜瓜果实特异性表达基因的启动子,为下一步实现外源基因在甜瓜果实中特异表达奠定基础. 哈斯阿古拉 包秋华 牛一丁 方天祺 扈廷茂关键词:甜瓜 果实特异性启动子 农杆菌介导的ACC氧化酶反义基因转化甜瓜品种河套蜜瓜的研究 被引量:10 2006年 将从甜瓜品种河套蜜瓜中克隆的ACC氧化酶基因cDNA片段反向构建到植物表达载体pROKⅡ中,获得重组质粒pRACO1,用三亲融合法将其导入根癌农杆菌LBA4404中,转化河套蜜瓜子叶外植体,在芽诱导培养基MS+IAA0.8mg/L+BA1.0mg/L+ABA0.26mg/L+Cef500mg/L+Kan75mg/L中诱导生芽,待芽长到2cm左右转入MS+IBA0.5mg/L+Cef300mg/L+Kan50mg/L的培养基中诱导生根,1~2周后可诱导产生大量的根,形成完整的转化小植株.经PCR检测证明,目的基因已整合到河套蜜瓜的基因组中. 郝金凤 财音青格乐 方天祺 哈斯阿古拉关键词:甜瓜 ACC氧化酶 反义基因