陕西省自然科学基金(2002C120)
- 作品数：5 被引量：32H指数：4
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- 桔青霉生产核酸酶P_1发酵条件优化研究被引量：8
- 2003年
- 选用经紫外线诱变的桔青霉菌株ZM 48,采用单因子和正交试验对生产核酸酶P1的发酵条件进行了优化研究,筛选得到最佳培养基组分为(除麸皮浸出汁为体积分数外,其余均为质量分数):葡萄糖和麸皮浸出液各3%,蛋白胨和酵母膏各0.3%,K2HPO4和KH2PO4各0.05%,CaCl20 08%,MgSO4和MnSO4各0.04%,ZnSO40.02%;发酵条件为:起始pH值5.69,接种量10%,温度34℃,摇床转速180r/min,发酵时间72h.在此优化条件下,桔青霉发酵液的核酸酶P1活力从实验初的140U/ml提高到240U/ml.
- 莫晓燕宋威张芹廖红东
- 关键词：桔青霉核酸酶正交试验发酵条件
- 核酸酶P1研究进展被引量：15
- 2004年
- 核酸酶P1是由桔青霉产生的一种能将单链DNA和RNA水解为 5′ 核苷酸的磷酸二酯酶 ,也是酶法生产 5′ 核苷酸的主要工业用酶 ,其水解产物 5′ 核苷酸广泛用于食品、医药、以及分子生物学等方面。文章概述了核酸酶P1的分子结构、催化特性、影响因素。
- 廖红东莫晓燕
- 关键词：桔青霉核酸酶P1磷酸二酯酶
- 核酸酶P1酶解RNA工艺条件的优化被引量：2
- 2010年
- 采用桔青霉发酵生产核酸酶P1,分别探讨底物浓度、酶浓度、pH、酶解温度、酶解时间,以及二价金属离子等因素对核酸酶P1酶解酵母RNA生产5'-核苷酸效果的影响;在此基础上通过正交设计实验优化酶解工艺条件。实验结果显示,六种金属离子中仅有Zn2+对核酸酶P1催化活性有明显促进作用;核酸酶P1酶解RNA的优化条件为:底物浓度35 g/L,反应初始pH 5.6,酶浓度8%,反应温度75℃,根据此条件酶解反应8 h,酶解效率与优化前比较提高155.6%。
- 陈雪玉莫晓燕李黎
- 关键词：核酸酶P1RNA酶解条件
- 磁性交联核酸酶P1聚集体的制备及性质研究被引量：8
- 2008年
- 采用磁性纳米颗粒与酶蛋白共沉淀后经戊二醛交联的方法,制备了磁性交联核酸酶P1聚集体,并且对比分析了游离酶和固定化酶的部分酶学性质.优化的最佳制备条件为:硫酸铵质量浓度为0.8 g/mL,沉淀时间为0.5 h,戊二醛体积分数为0.6%,交联时间为2 h,所制得的固定化酶活性回收率为32.4%.酶学性质研究表明,固定化酶的Km值(30.7 mmol/L)明显高于游离酶的(7.27 mmol/L),二者最适反应温度分别为90℃和75℃,最适pH值均为5.2,固定化核酸酶P1对热和酸碱的耐受性明显增强,连续反应6次后酶活力仍保留70%,良好的操作稳定性和磁响应性有利于核酸酶P1的工业化应用.
- 邵卫祥莫晓燕李黎
- 关键词：核酸酶P1交联酶聚集体磁性纳米颗粒酶学性质
- 核酸酶P1的分离纯化及部分酶学性质研究被引量：5
- 2005年
- 桔青霉发酵液经离心、超滤、硫酸铵盐析、透析和DE-52型树脂柱色谱分离,纯化得到核酸酶P1。比活为28490u/mg,纯化10.5倍,收率为45%。SDS-PAGE电泳显示为单一条带。酶学性质研究结果表明,以酵母RNA为底物时的Km为3.36mmol/L,最适作用温度70℃,最适pH5.4。
- 廖红东莫晓燕宋威
- 关键词：桔青霉核酸酶P1纯化酶学性质
