浙江省自然科学基金(Z12B060008)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：胡升雷引林姚善泾张彭湃黄俊更多>>
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- 相关领域：化学工程更多>>
- 定点突变提高细胞色素P450 BM-3吲哚羟基化能力被引量：4
- 2013年
- 为进一步提高细胞色素P450BM-3(A74G/F87V/L188Q)对吲哚的羟基化能力,根据酶结构与功能的关系,以突变酶E435T为基础,在168位点引入D168L突变,获得了吲哚羟基化能力得到显著提高的突变酶D168L/E435T。突变酶对吲哚的Km为1.72 mol·L-1(父本2.09 mol·L-1),转化数(kcat)为28.15min-1(父本4.04min-1),表明D168L定点突变可以略微提高酶对底物的亲和力,但主要的效应是促进了底物的转化速率,这两个效应的综合表现是使酶的催化效率(kcatKm-1)比父本酶提高了8.48倍。此外,产物中副产物靛玉红的比例也降低为1.2%(父本7.3%),这说明该突变酶催化吲哚的区域选择性上也更有利于靛蓝的生成。
- 张彭湃胡升黄俊梅乐和雷引林金志华姚善泾
- 关键词：细胞色素P450定点突变羟基化吲哚靛蓝
