国家科技重大专项(2012ZX1004-220)
- 作品数：9 被引量：59H指数：4
- 相关作者：沈双宋丽君高玒王玠殷旭仁更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心卫生部江苏省血吸虫病防治研究所更多>>
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- 日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶免疫功能的研究
- 2015年
- 目的研究日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶(Thioredoxin Glutathione Reductase of Schistosoma japonicum,SjTGR)的免疫原性及抗日本血吸虫感染的免疫保护性作用。方法 75只小鼠随机分为5组:空白组、PBS组、CpG2免疫组、TGR免疫组和TGR+CpG2联合免疫组,免疫3次。首次免疫前及第3次免疫后2周经尾静脉采血,采用酶联免疫法分别检测血清中抗SjTGR蛋白IgG、IgG1和IgG2a的抗体水平。第3次免疫后2周,每只小鼠经腹部感染日本血吸虫尾蚴40±2条,42 d后剖杀,收集成虫和虫卵,计算减虫率和减卵率;制备各组小鼠单个脾淋巴细胞,采用流式细胞术检测脾细胞表面标志物CD44high、CD4+CD44high或CD8+CD44high水平;用SjTGR刺激免疫小鼠脾细胞72 h,采用酶联免疫法检测脾细胞的IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的水平。结果第3次免疫后2周TGR与CpG2+TGR免疫组小鼠血清抗SjTGR抗体的IgG滴度均达1:200 000以上,IgG2a与IgG1的比值(IgG2a/IgG1)随时间的延长缓慢增高。TGR免疫组和TGR+CpG2联合免疫组细胞上清中的IFN-γ和IL-2水平与空白组、PBS组、CpG2免疫组相比明显增高(P<0.05)。TGR免疫组与TGR+CpG2免疫组小鼠脾细胞的CD44high、CD8+CD44high及CD4+CD44high与空白组和PBS组相比细胞比值增加(P<0.05)。TGR免疫组和CpG2+TGR免疫组的减虫率分别为9.4%,10.5%,减卵率分别为9.2%和32.8%。结论 SjTGR具有较强的免疫原性,可诱导小鼠免疫反应向Th1型极化,但不足以产生抗日本血吸虫感染的保护效应。CpG2 ODN可能是一种有效的Th1型免疫佐剂。
- 宋丽君余传信殷旭仁沈双高玒张伟金一姚媛刘茜王玠柯雪丹许永良杨静
- 关键词：日本血吸虫免疫原性免疫保护
- 抗三磷酸甘油醛脱氢酶抗体IgG检测诊断日本血吸虫病的研究被引量：3
- 2015年
- 目的探讨检测抗日本血吸虫三磷酸甘油酸脱氢酶(Sj GAPDH)抗体IgG诊断血吸虫病的价值。方法收集血吸虫现症感染患者治疗前、后不同时间点的血清及其他寄生虫病患者血清。以纯化的重组Sj GAPDH蛋白为抗原建立检测抗Sj GAPDH抗体IgG的常规酶联免疫吸附试验方法(Sj GAPDH ELISA)及生物素-亲和素信号放大酶联免疫吸附试验方法(Sj GAPDH BA ELISA),同时对收集的血清标本进行抗Sj GAPDH抗体IgG检测,并与检测抗SEA抗体IgG的SEA ELISA结果作比较,评价检测抗Sj GAPDH抗体IgG用于血吸虫病诊断与疗效考核的价值。结果 Sj GAPDH ELISA和Sj GAPDH BA ELISA检测79份现症感染血吸虫患者血清抗Sj GAPDH抗体IgG的敏感性分别为54.43%和91.14%,差异有统计学意义(P<0.05%);特异性分别为93.85%和92.31%,差异无统计学意义(P>0.05%)。Sj GAPDH ELISA检测患者在治疗后6个月血清特异性抗体阴转率为44.19%,治疗后12个月阴转率达53.49%。Sj GAPDH BA ELISA检测患者治疗后6个月血清特异性抗体阴转率为5.55%,治疗后12个月阴转率为9.72%。患者血清中抗SEA抗体IgG治疗后6和12个月均阳性。结论 Sj GAPDH蛋白在患者体内诱导短寿抗体反应,检测患者血清中的抗Sj GAPDH特异性抗体IgG水平及其在治疗前、后的变化具有一定的诊断与疗效考核价值。
- 王玠刘茜张秋明余传信宋丽君沈双殷旭仁高玒何伟曹国群华万全钟春蕾
- 关键词：血吸虫疗效考核
- 日本血吸虫果糖二磷酸醛缩酶抗体反应模式及诊断价值的研究被引量：6
- 2015年
- 目的观察血吸虫感染家兔体内抗日本血吸虫中国大陆株果糖二磷酸醛缩酶(Sj FBA)抗体反应的动态变化,评价检测抗Sj FBA抗体IgG用于血吸虫现症感染的诊断与疗效考核价值。方法采用RT-PCR方法从日本血吸虫中国大陆株cDNA中扩增出编码Sj FBA的开放阅读框基因片段,然后亚克隆到表达质粒pET28a(+)中,构建重组表达质粒Sj FBA-pET28a。将重组表达质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,经镍螯合胶亲和层析的方法纯化重组Sj FBA蛋白。用日本血吸虫中国大陆株尾蚴感染日本大白兔,6周后用吡喹酮与青蒿琥酯进行治疗,收集感染前和感染后2、4、6周及治疗后2、4、6、8、10、12、14、16周的血样。以重组Sj FBA为包被抗原,建立检测抗Sj FBA抗体IgG的酶联免疫吸附试验方法(rSj FBA-ELISA),用于检测家兔不同感染阶段血清抗Sj FBA抗体反应模式。分别用5、10、15和20条日本血吸虫中国大陆株尾蚴感染小鼠,收集感染后35d的小鼠血清,采用rSj FBA-ELISA检测抗Sj FBA抗体IgG并观察抗Sj FBA抗体水平与感染度的关系。用rSj FBA-ELISA分别检测血吸虫病患者血清、健康人血清、华支睾吸虫病和卫氏并殖吸虫病患者血清,观察该方法用于血吸虫病诊断的敏感性与特异性;使用该方法检测治疗前及治疗后1年的同一血吸虫现症感染患者的配对血清,观察抗Sj FBA抗体IgG检测用于血吸虫病疗效考核的价值。结果血吸虫感染家兔体内抗Sj FBA抗体IgG水平随感染时间的延长而逐渐增强,感染6周达到高峰(A450值为1.364),但治疗后抗Sj FBA的抗体则迅速下降,治疗6-8周后抗体水平可下降至阴性阈值(A450值为0.4),而未治疗组则抗体水平则始终保持在高水平,表明家兔体内抗Sj FBA抗体反应呈典型的短寿抗体反应模式。不同感染度小鼠血清抗Sj FBA抗体水平随着感染度的升高而逐渐升高,呈剂量依
- 王玠余传信肖迪赵飞殷旭仁宋丽君沈双高玒张建中何利华许永良杨静
- 关键词：日本血吸虫中国大陆株现症感染免疫诊断疗效考核
- 检测华支睾吸虫特异性IgG4生物素-亲和素复合酶联免疫吸附法的建立及检测效能分析被引量：4
- 2015年
- 目的探讨亲和素-生物素复合酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测特异性Ig G4抗体用于诊断华支睾吸虫病的效果。方法建立检测华支睾吸虫特异性抗体Ig G4的ABC-ELISA法(Ig G4-ABC-ELISA),以此方法检测华支睾吸虫病、日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病、弓形虫病、棘球蚴病、囊尾蚴病和曼氏裂头蚴病患者血清样本。以Ig G4-ELISA和Ig GELISA法为对照,比较3种方法用于诊断华支睾吸虫病的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及诊断效率。结果成功建立了用于检测华支睾吸虫特异性抗体的Ig G4-ABC-ELISA法,用此方法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体Ig G4的敏感性为90.0%,特异性为98.2%,阳性预测值为93.8%,阴性预测值为97.0%,诊断效率为96.3%;Ig G4-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体敏感性为86.0%,特异性为98.2%,阳性预测值为93.5%,阴性预测值为95.9%,诊断效率为95.4%;Ig G-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体Ig G的敏感性为94.0%,特异性为88.1%,阳性预测值为70.1%,阴性预测值为98.0%,诊断效率为89.4%。Ig G4-ABC-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体的敏感性高于Ig G4-ELISA法(P<0.05),特异性高于Ig G-ELISA法(P<0.05)。结论 Ig G4-ABC-ELISA法检测华支睾吸虫特异性抗体IgG4具有高度敏感性与特异性,在华支睾吸虫病诊断中具有较好应用价值。
- 王玠宋丽君余传信沈双许永良殷旭仁柯雪丹高玒刘茜
- 关键词：华支睾吸虫亲和素-生物素酶联免疫吸附法IGG4
- 肺孢子菌动物模型的建立及病原学和分子生物学检测技术研究被引量：1
- 2015年
- 目的建立肺孢子菌动物模型,并对肺孢子菌病原学和分子生物学检测技术进行研究。方法 SD和Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠皮下注射地塞米松,对照组皮下注射生理盐水。诱导8周后处死全部大鼠,收集其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,分别做涂片和肺印片,染色后镜检。用FTA卡采集所有大鼠的BALF进行PCR检测。对PCR产物进行测序,利用BLAST软件将测序结果与Gen Bank数据库中的鼠源性肺孢子菌进行比对,确定菌种。结果共采集肺组织标本和BALF各34份,病原学检测显示实验组总感染率为29.2%(7/24),对照组感染率为0;其中SD和Wistar大鼠实验组感染率分别为25.0%(3/12)和33.3%(4/12),差异无统计学意义(P=0.31);实验组SD大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别为25.0%(3/12)和16.7%(2/12),差异无统计学意义(P=0.34)。实验组Wistar大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别33.3%(4/12)和16.7%(2/12),差异无统计学意义(P=0.24)。用PCR方法共检测28份大鼠BALF样本,实验组阳性检出率为91.7%(26/28),对照组均为阴性。对PCR产物进行测序分析,发现其与Gen Bank已登录的大鼠源肺孢子菌(JX499145、GU133622、EF646865)的同源性均为100%。结论通过皮下注射地塞米松可以建立肺孢子菌动物模型,SD大鼠与Wistar大鼠在作为肺孢子菌动物模型的选择上无显著差别。在早期感染阶段,适宜用PCR法进行肺孢子菌检测,病原形态学检测漏检率高。
- 田利光艾琳储言红吴秀萍蔡玉春陈卓陈韶红陈家旭
- 关键词：肺孢子菌动物模型病原检测PCR检测
- 3种培养基中芽囊原虫生长状况观察被引量：4
- 2016年
- 目的观察芽囊原虫在不同培养基中的生长状况,筛选合适的芽囊原虫培养方法。方法将10份芽囊原虫阳性粪便分别接种至Jone’s液、vitro液、1640 3种培养基中培养,选取生长情况良好、虫密度高的一份粪便传代培养后等量接种至3种不同的培养基中,每24 h计数虫体数量一次,连续观察10 d,并观察芽囊原虫的形态学变化和生长情况。结果10份粪便分别接种至3种培养基中培养,48 h后发现1640和Jone’s液中的虫密度高于vitro液。同一份粪便接种至3种不同培养基中连续观察10 d,结果表明3种培养基中虫体生长呈规律变化,均在接种后3、6、9 d出现生长高峰;Jone’s液中芽囊原虫密度最高。vitro液中观察到的虫体形态最清晰,且富有活力;Jone’s液中能观察到虫体多种繁殖状态。结论Jone’s液适于芽囊原虫的生长繁殖,可作为首选培养基;vitro液可作为观察芽囊原虫生长情况的首选培养基。
- 俞英昉吴秀萍储言红陈家旭田利光
- 关键词：芽囊原虫体外培养培养基VITRO
- 2010-2013年洛阳市境外输入性疟疾疫情分析被引量：14
- 2014年
- 目的分析2010-2013年洛阳市境外输入性疟疾流行特征,为该市疟疾防控提供依据。方法收集2010-2013年洛阳市网络报告的疟疾疫情资料、输入性疟疾病例个案调查及流行病学调查报告资料,并进行统计分析。结果2010-2013年洛阳市报告输入性疟疾病例98例,其中恶性疟57例,间日疟35例,卵型疟4例,三日疟2例,均为实验室确诊病例。98例输入性病例中,71例来自非洲国家(72.44%),27例来自东南亚国家(27.55%)。发病人群主要为青壮年男性,发病时间无明显季节性;从发病到就诊时间间隔中位数为6 d;确诊单位主要为各级疾病预防控制机构(78.57%)。结论洛阳市境外输入性疟疾疫情严峻,需进一步强化医疗机构业务培训和多部门合作,采取有效措施以降低其危害。
- 李云霞田利光申晓靖
- 关键词：输入性疟疾防控策略
- 环介导同温DNA扩增法(LAMP)与解剖-显微镜检法检测血吸虫感染性钉螺效果的比较被引量：25
- 2014年
- 目的探讨环介导同温DNA扩增法（LAMP）与解剖-显微镜检法对血吸虫感染不同阶段钉螺检出率的差异。方法用日本血吸虫毛蚴感染钉螺,于25℃培养箱中培养。分别于感染后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周收集10只实验钉螺,解剖后在解剖镜下检查血吸虫感染情况。取解剖的钉螺软体抽提基因组DNA,采用LAMP法进行检测。在感染后10周,取100只实验钉螺,同时用解剖-显微镜检法和LAMP法进行检测。收集吸虫病流行区现场钉螺,采用两种方法同时进行检测,统计血吸虫感染性钉螺阳性率。结果解剖-显微镜检法和LAMP法检测感染1-10周的10批钉螺血吸虫感染率分别为0.00%、0.00%、0.00%、10.00%、0.00、10.00%、20.00%、20.00%、60.00%、60.00%和50.00%、20.00%、30.00%、20.00%、20.00%、40.00%、30.00%、40.00%、80.00%、70.00%,总阳性率分别为18.00%和40.00%,差异有统计学意义（χ^2=11.75,P〈0.01）。两种方法检测感染后7周的100只钉螺阳性率分别31.00%和39.00%,检测来源于两个不同省份血吸虫病流行区钉螺,阳性率分别为29.80%和19.47%。结论环介导同温DNA扩增法能有效地检出感染不同阶段的感染性钉螺,检测结果能更准地反映流行区钉螺的血吸虫感染状态。
- 熊春蓉殷旭仁宋丽君沈双王玠高玒刘茜余传信杨坤
- 关键词：感染性钉螺阳性率
- 2004—2012年洛阳市疟疾疫情流行特征分析被引量：5
- 2013年
- 目的 掌握我国传染病网络直报以来洛阳市疟疾的流行特征，为洛阳市实现消除疟疾目标提供防控依据。 方法 根据我国传染病疫情网络数据，对2004—2012年洛阳市的疟疾疫情资料进行描述性流行病学分析。 结果 2004—2012年，洛阳市累计报告疟疾病例147例，间日疟71例，恶性疟62例，卵型疟1例，未分型病例13例，年发病率为0.079/10万 - 0.443/10万，死亡2例。男女性别比6.74 ∶ 1. 发病以青壮年男性为主，20-45岁年龄组占发病的74.15%（109/147）。农民和工人为主要发病人群，分别占发病总人数的55.78%（82/147）和14.29%（21/147）。输入性疟疾病例占全部病例的76.19%（112/147）。65.52%（97/147）的病例发生在夏、秋季。 结论 洛阳市近几年疟疾发病处于上升趋势，病例以输入性疟疾为主。
- 李云霞田利光
- 关键词：疟疾
