贵州省科学技术基金([2008]2198)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：谈艳芳黄俊琼杜清波更多>>
- 相关机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核糖体蛋白L8重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:构建鼠核糖体蛋白L8(RPL8)基因的重组腺病毒载体,为转染小鼠树突状细胞(DC)为制备DC疫苗奠定基础。方法:用RT-PCR克隆目的基因RPL8,与载体连接、酶切、插入、并转移到pAdxsi腺病毒骨架载体上,包装扩增成腺病毒颗粒。用重组腺病毒及空病毒Ad-EGFP(作为阴性对照)转染小鼠DC细胞,荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白的表达。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建了携带RPL8基因的重组腺病毒载体,并制备出高滴度(1.6×1010PFU/mL)的重组腺病毒。结论:成功构建了携带RPL8的重组腺病毒,为进一步研究RPL8基因修饰DC疫苗奠定基础。
- 谈艳芳杜清波黄俊琼
- 关键词：腺病毒载体基因重组
- RPL8基因修饰鼠树突状细胞的制备探讨
- 2011年
- 目的制备RPL8基因修饰的树突状细胞。方法无菌分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,在细胞因子rmGM-CSF、rmIL-4、LPS的诱导下体外大量扩增培养DC细胞。并动态观察DC形态,流式细胞仪检测其表面标志。RPL8重组腺病毒以最佳的MOI感染鼠DC,并于感染后24h、48h、72h,荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白(EGFP)表达,应用RT-PCR方法检测DC中RPL8mRNA的表达情况。结果不同时相点,在荧光倒置显微镜下DC均有绿色荧光蛋白(EGFP)表达,DC细胞中有RPL8mRNA的表达,得到预期309bp的条带。结论成功制备RPL8基因修饰的树突状细胞,为进一步脑胶质瘤免疫基因治疗研究提供了基础。
- 谈艳芳杜清波黄俊琼
- 关键词：树突状细胞胶质瘤
