浙江省中医药管理局科研基金(2008CB059)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 黄芪多糖诱导脐血单核细胞向树突状细胞分化中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的观察NF-κB在黄芪多糖（APS）诱导脐血单核细胞向树突状细胞（DCs）分化过程的作用，探讨APS诱生DCs过程中的信号传导通路。方法无菌条件下采集脐血，密度梯度离心法获得脐血单核细胞分为3组。对照组：在无药物的RPMI 1640完全培养液中培养；APS组：在含有黄芪多糖100mg／L的RPMI1640完全培养液中培养；PDTC组：用NF-κB的抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯（PDTC）10μmol／L处理脐血单核细胞30min后，加入含有黄芪多糖100mg／L的RPMI1640完全培养液中培养。培养过程中用倒置光学显微镜和透射电镜观察细胞形态变化；收集培养第12天的细胞，FCM检测细胞免疫表型；免疫荧光显微镜下观察细胞内NF-κB的激活、迁移情况。结果（1）对照组细胞无成簇生长，培养至第12天细胞呈梭形巨噬细胞形态；黄芪多糖组细胞成簇生长，形态学由圆形逐渐变为典型的树突状细胞形态；抑制剂组细胞生长缓慢，未出现聚集现象，细胞形态学未见明显变化。（2）APS组高表达DCs特异性抗原CDSO、CD83和CD86，与对照组、PDTC组比较差异有统计学意义（P〈0．01），对照组与PDTC组表达相似，二者差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）免疫荧光显微镜下观察NF-κB可见APs组伴有大量NF-κB荧光进入细胞核，尤以72h显著，NF-κB激活率为（75．20±7．37）％，而对照组、PDTC组NF-κB激活率分别为（13．20±3．46）％、（8．20±1．92）％，与APS组相比，差异有统计学意义（P〈0．02）。结论黄芪多糖能够诱导脐血单核细胞定向分化为DCs，NF-κB是黄芪多糖诱导脐血单核细胞向DCs分化的信号传导通路中的关键元件。
- 陈志明邓旻朱仕兵隋向前李晓玲张晓洁徐望阳窦晓兵史亦谦
- 关键词：脐血树突状细胞信号传导
- 黄芪多糖诱导脐血单个核细胞向树突状细胞分化的免疫机制研究被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨黄芪多糖诱导脐血来源的单个核细胞分化为树突状细胞的免疫学机制。方法:采集新鲜脐血,Ficoll淋巴细胞分离液梯度离心法获得单个核细胞,对照组以含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基进行培养,实验组加APS(100mg.L-1)进行诱导;两组细胞隔天半量换液,实验组补充半量的APS;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养至第4、6、8、10天培养液上清中GM-CSF、TNF-α、IL-10的浓度。结果:实验组GM-CSF、TNF-α的浓度在第4、6、8、10天均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);负调控因子IL-10的浓度,实验组亦高于对照组(P<0.05);将TNF-α与IL-10相对应的每个标本的四个复孔值进行两两相比(TNF-α/IL-10),其比值以R表示,实验组与对照组之间差异性,且实验组R值均高于对照组,第6、8、10天差异具有显著性(P<0.01)。结论:黄芪多糖促使单个核细胞分泌GM-CSF、TNF-α诱导单个核细胞向树突状细胞分化、成熟;黄芪多糖诱导单个核细胞分泌IL-10,抑制其向树突状细胞分化成熟,但TNF-α与IL-10的比值R较高,且呈动态变化规律,抑制IL-10对树突状细胞的影响。
- 邓旻陈志明朱仕兵隋向前李晓玲张晓洁徐鋆阳窦晓兵史亦谦
- 关键词：脐血树突状细胞免疫学
