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广东省医学科学技术研究基金(A2007431)
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张丹方
彭立红
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2008
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Satb2基因实时荧光定量聚合酶链反应标准品的制备及应用研究
2008年
目的:制备用于Satb2基因实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的标准品。方法:提取胚胎上颌突组织总RNA,行逆转录反应获得第一链的cDNA,再通过PCR回收获得预期Satb2基因片段;通过T-A克隆将该片段插入pGMT质粒载体;大量提取质粒,定量后进行标准曲线的制作和实时荧光定量PCR。结果:重组质粒经PCR扩增及序列测定表明,pGMT/Satb2基因已成功克隆。结论:所构建的pGMT/Satb2基因实时荧光定量PCR检测标准品应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线线性关系好,灵敏度和特异性高,准确可靠,此法可作为实时荧光定量PCR检测Satb2基因的标准方法。
张丹方
唐世杰
毛小炎
许金华
彭立红
关键词:
实时荧光定量聚合酶链反应
标准品
TAQMAN探针
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