广东省医学科学技术研究基金(A2005060)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 三氯乙烯药疹样皮炎患者外周血淋巴细胞趋化因子受体基因表达被引量：6
- 2008年
- 目的探讨三氯乙烯药疹样皮炎(DMLT)患者外周血淋巴细胞内趋化因子受体(CXCR2)基因的表达水平,同时研究外周静脉血代替皮肤组织作为研究样本的可行性。方法取DMLT患者的新鲜抗凝外周静脉血,用淋巴细胞分离液分离得到淋巴细胞,加TRIzol用氯仿、异戊醇抽提得到RNA,反转录为cDNA,通过聚合酶链反应扩增目的基因,电泳后以吸光度法检测25例DMLT患者、30例三氯乙烯接触者和30例正常人血液中CXCR2的表达水平。结果以β-actin作为内参照,病例组中,25例DMLT患者CXCR2表达水平明显高于对照组,分别为0.670±0.472、0.267±0.157(P<0.02)。结论CXCR2在DMLT患者体内表达水平显著上调,推测该基因在DMLT发病过程中的某些相关环节起了作用,趋化炎症细胞到炎症发生区域发生反应。
- 李森华付艳艳黄汉林彭瑾瑜朱彦博吴丁兰杨爱初常弘
- 关键词：三氯乙烯药疹样皮炎反转录聚合酶链反应
- 排除β-肌动蛋白假基因对反转录聚合酶链反应的干扰
- 2006年
- 目的筛选合适的β-肌动蛋白(β-actin)引物以排除RNA样本中残存的DNA对人类基因表达分析的干扰。方法利用EMBL、PSEUDOGENE等生物信息数据库,寻找β-actin的假基因。同时自行设计和从国内外文献中筛选了众多β-actin引物。选用其中具有代表性的5对跨过内含子的引物,分别将基因组DNA、未经逆转录的RNA、cDNA作为模板,对这5对引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果生物信息学分析发现β-actin有37个假基因并且发现绝大多数的研究者所使用的引物都存在假基因干扰问题。当分别用DNA和cDNA作为模板时,5对引物中的1对跨过内含子的引物能扩增出大小不同的条带。结论使用该对引物能有效发现和排除RNA样本中所残存的DNA的干扰,令人类基因表达分析得出更准确的结果。
- 陈嘉昌李森华彭瑾瑜付艳艳叶伟超常弘
- 关键词：Β-肌动蛋白基因表达分析反转录聚合酶链反应
