国家自然科学基金(20175022) 作品数:15 被引量:102 H指数:5 相关作者: 庄峙厦 王小如 沈金灿 黄志勇 吴永沛 更多>> 相关机构: 厦门大学 集美大学 国家海洋局第一海洋研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省科技攻关计划 厦门市科技计划项目 更多>> 相关领域: 理学 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
坛紫菜多糖的分离纯化及其组成分析 被引量:14 2011年 采用热水提取坛紫菜多糖,经分离纯化得到3个多糖组分(分别命名为SP1、SP2及SP3)。通过红外光谱和气相色谱对多糖组分进行分析,并用化学法测定多糖组分中的硫酸根、糖醛酸、半乳糖及3,6-内醚半乳糖含量。测定结果表明,SP1的单糖组成中含半乳糖96.53%、鼠李糖1.225%、岩藻糖0.85%、阿拉伯糖1.37%、木糖1.16%;SP2、SP3的单糖组分为半乳糖,而无其它单糖。3种多糖的硫酸基含量分别为(8.54±0.44)%、(10.24±0.23)%及(12.35±0.58)%,糖醛酸含量分别为(15.00±0.23)%、(10.46±0.55)%及(11.50±0.35)%,3,6-内醚半乳糖含量分别为(6.84±0.43)%、(4.99±0.24)%及(4.56±0.36)%。 穆凯峰 吴永沛关键词:坛紫菜 多糖 大鼠肾脏汞结合金属硫蛋白的联用技术表征研究 被引量:3 2005年 通过凝胶色谱(SEC)及反相液相色谱(RPC)分别与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)联用的技术,对灌喂HgCl2大鼠的肾组织中诱导的多金属结合金属硫蛋白(MT)的结构进行表征分析。通过SEC鄄ICP-MS曲线上的金属信号及紫外检测的MT光谱吸收特征,可确认组织提取液中MT在色谱曲线上的位置。与对照组相比,灌喂HgCl2大鼠肾中Hg-MT的诱导量显著增加,与此同时,Cu-MT在染毒组的诱导量也相应增加,说明MT在染汞大鼠肾脏中起着对汞的解毒和对铜的调节作用。MT样品提取物经葡聚糖凝胶(G-75)柱分离纯化并用透析法脱盐后,用细内径反相色谱柱分离,进行梯度洗脱,并与ESI-MS联用,可获得总离子流色谱图及与色谱峰对应的质谱图,通过对质谱信号的解析及参考脱金属MT构型的有关报道,对汞诱导大鼠肾组织MT的不同亚型和次亚型分子结构进行推断。结果证明,在灌喂HgCl2大鼠的肾组织中存在着一系列汞结合的MT形态。 黄志勇 沈金灿 庄峙厦 王小如 黎先春关键词:金属硫蛋白 ESI-MS CL2 反相液相色谱 氢化物-原子荧光光谱法测定岩藻聚糖硫酸酯中As,Hg含量 被引量:3 2008年 岩藻聚糖硫酸酯结合大量的重金属,降低了它的生物活性,使之在保健品、药物开发中的应用受到限制。文章采用高压微波消解、氢化物-原子荧光光谱(HG-AFS)法测定了岩藻聚糖硫酸酯中的As,Hg含量,并对仪器工作参数(原子化器温度、灯电流、负高压等)及氢化物发生条件(载流酸度、载气流量、KBH4浓度等)进行了优化。结果表明,脱盐后岩藻聚糖硫酸酯中As和Hg的含量分别为2.78和0.119 mg.kg-1。说明As和Hg是以结合态形式存在于岩藻聚糖硫酸酯中。As,Hg的检出限分别为0.173和0.012 2ng.kg-1,加标回收率分别为93.31%~100.9%,91.21%~106.1%。 刘翼翔 吴永沛 王力 黄志勇关键词:岩藻聚糖硫酸酯 砷 汞 原子荧光 金属硫蛋白异构体及亚型异构体的液相色谱分离与质谱鉴别 被引量:3 2005年 建立了金属硫蛋白(MT)异构体及亚型异构体的色谱分离与质谱鉴别方法。将金属硫蛋白混合物通过弱阴离子DEAESephadexA 25离子交换柱,结合离线电感耦合等离子体质谱(ICP MS)对锌诱导金属硫蛋白的两个异构体MT 1和MT 2进行分离和检测;利用SephadexG 25凝胶排阻色谱柱对得到的两个金属硫蛋白异构体进行脱盐;探索脱盐后的金属硫蛋白异构体在不同色谱条件下的C18反相色谱柱上的保留行为,进而实现各个亚型异构体的分离;通过在线电喷雾质谱检测实现了对金属硫蛋白各个亚型异构体的鉴别。结果表明,通过优化色谱条件,由离子交换色谱及凝胶排阻色谱得到的金属硫蛋白各亚型异构体在酸性条件下均得到了良好的分离,质谱检测结果与前人的文献报道结果一致。该方法可使金属硫蛋白各异构体均达到最佳的分离效果。 卢素格 沈金灿 庄峙厦 王小如关键词:离子交换色谱 反相高效液相色谱 金属硫蛋白 异构体 岩藻聚糖结构与体外抑制羟自由基活性关系 被引量:2 2009年 目的研究岩藻聚糖结构与抗氧化活性的关系。方法从海带(Laminaria japonica)提取制备岩藻聚糖(HF),采用DEAE-Cellulose 52分离纯化得到HF1和HF2两个组分。采用HCl水解岩藻聚糖并经膜分离纯化,制备低聚岩藻聚糖(LF)。通过化学和气相色谱法分析得到单糖组成。利用红外光谱分析不同组分的结构特点;采用Fenton反应测抑制羟自由基(·O H)的活性。结果HF1组成为糖醛酸18.834%、L-岩藻糖44.197%、D-半乳糖31.193%和D-甘露糖24.612%;HF2组成为糖醛酸5.878%、L-岩藻糖81.119%和D-甘露糖18.881%。LF中L-岩藻糖含量为13.033%,仅相当于水解前(40.621%)的32.084%。HF1和HF的硫酸根结合在吡喃岩藻糖的C-2和C-4位点上,而HF2的硫酸根只结合在C-4位点上。HF1、HF2和HF抑制50%·O H所需要的浓度(IC50)分别为7.6、5.2和8.9 mg/ml,LF几乎丧失了抑制·O H的活力。结论岩藻聚糖抑制·O H与其分子量大小、硫酸根含量和结合位点及糖醛酸含量有关。 刘翼翔 吴永沛关键词:低聚糖 硫酸根 羟自由基 原子荧光光谱法测定环境水及土壤样品中的汞形态含量 被引量:29 2007年 采用氢化发生-冷原子荧光光谱法,测定了厦门市集美周边地区的几种水和土壤样品中汞的不同形态含量。在仪器优化条件下直接进样测定水中微量无机汞的含量,再用溴酸钾-溴化钾消解水样并测定其总汞含量,由总汞与无机汞含量之差计算出有机汞含量;采用微波消解体系测定土壤样品中的总汞含量,同时用连续化学浸提法提取测定包括可交换态汞、盐酸溶汞、元素汞、腐殖酸结合态汞、有机质结合态汞和硫化汞的不同汞形态含量,并最终测定残态汞含量。实验结果表明,实验室排放水中汞含量高于Ⅰ类污水综合排放标准(GB8978—1996),说明实验室排放水是严重的汞环境污染源之一。而公路边土壤、近海沉积物和菜园土壤的汞形态含量均低于相应的国家标准,但由于人为污染造成菜园土壤汞的不断积累应引起高度重视。实验同时对水和土壤样品的测量检出限及方法回收率进行试验,结果表明在优化的实验条件下水和土壤汞的检出限分别为0.0008μg·L-1和0.0723μg·kg-1,3个水平的加标平均回收率分别为93.7%和93.8%,方法准确、可靠。 黄志勇 黄智陶 张强 庄峙厦关键词:氢化物发生原子荧光光谱法 形态分析 土壤 金属硫蛋白的色谱/电喷雾电离质谱联用表征方法 被引量:1 2004年 通过反相液相色谱(RPLC)与电喷雾电离质谱(ESI MS)的联用技术,对镉诱导金属硫蛋白标准物质MT 1和MT 2的结构进行表征分析。采用VydacC8反相色谱柱(250mm×2 1mmi d ,5μm,30nm),流动相A为pH6 0的5mmol/L乙酸铵水溶液,流动相B为pH6 0的5mmol/L乙酸铵的甲醇 水(体积比为1∶1)溶液,流动相流速为0 20mL/min,在40min内流动相B的体积分数从10%增加到37 5%进行梯度洗脱。分别用紫外(UV)和ESI MS检测,可获得总离子流色谱图及与其色谱峰对应的质谱图。通过对MT 1和MT 2的质谱信号的解析,发现通过该法获得的MT结构形态大多与前人报道的结果吻合。还测定了兔肝MT的多形态结构,利用酸化脱金属硫蛋白(apo MT)使谱图简化,可清晰地获得在兔肝中存在的各种MT亚型和次亚型结构形态。 黄志勇 沈金灿 庄峙厦 王小如 黎先春关键词:金属硫蛋白 联用技术 反相液相色谱 电喷雾电离质谱 不同pH值下金属硫蛋白的电喷雾质谱研究 被引量:5 2003年 考察不同 p H值下金属硫蛋白与锌 (Zn)的结合情况表明 ,p H值下降 ,总离子流强度增大 ,但低于 3以后 ,又急剧下降 ;同时 p H也决定了金属与硫蛋白的结合形态 ,在比较理想的电离的条件下发现 ,在 p H 3 .0时主要以脱金属硫蛋白的形式存在 ;在 p H4.0时金属硫蛋白结合了 4个 Zn。 沈金灿 黄志勇 庄峙厦 王小如关键词:金属硫蛋白 电喷雾质谱 分子量 自由基清除 Hg^(2+)在大鼠组织器官中的分布及其存在形态研究 被引量:16 2005年 汞是环境中重要的污染物之一,对人类的健康构成了巨大的威胁。文章通过建立电感耦合等离子体质谱及凝胶排阻色谱分离法与紫外和电感耦合等离子体质谱在线检测的联用技术,研究大鼠灌喂HgCl2后Hg在大鼠中的分布累积规律和及其与蛋白的结合,实验结果表明肝脏和肾脏中在Hg刺激下诱导产生大量硫蛋白,大量产生的金属硫蛋白可能因此而优先与通过胃肠吸收摄入的Hg结合,减少了Hg对其它蛋白的正常作用的干扰,从而大大降低了Hg2+的毒性。 沈金灿 黄志勇 庄峙厦 王小如 LeeFrank S C关键词:SEC UV ICP-MS 金属硫蛋白 金属硫蛋白MT-2a与Cd(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)络合的电喷雾质谱表征 被引量:2 2009年 采用电喷雾质谱法(ESI-MS)研究金属硫蛋白(MT,存在α和β两种结构域)-2a与金属离子Cd(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)的络合作用。MT-2a由反相色谱分离纯化制得,并以电喷雾质谱鉴别。通过ESI-MS考察MT-2a与不同量的Cd和Cu的络合,结果表明,Cd(Ⅱ)能够优先与MT的α结构域络合,形成M42+S11结构,并且该络合过程存在着明显的协同效应;Cd(Ⅱ)与MT的β结构域的络合形式为M24+S9,其呈现出明显的随机松散络合特性;Cu(Ⅰ)优先与MT的β结构域络合,其络合形式由Cu4逐渐过渡到更高结合态;在Cu(Ⅰ)含量较高的条件下,Cu(Ⅰ)与MT呈现出多种络合方式。 沈金灿 叶卫翔 康海宁 葛丽雅 庄峙厦 王小如关键词:电喷雾质谱 金属硫蛋白 络合作用