广东省教育厅自然科学基金(Z03042)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
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- 发文基金:广东省教育厅自然科学基金教育部科学技术研究重点项目湛江市科技招标项目更多>>
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- 微小RNA:一类新的调控性非编码RNA被引量:4
- 2005年
- 微小RNA(miRNA)是一种长度约为18~25nt的非编码RNA.在线虫、拟南芥、果蝇、人类等动植物细胞中已发现了近400个miRNA,这些miRNA可在转录后水平或翻译水平调节基因表达.miRNA可在无脊椎动物的发育、神经分化、细胞增殖、凋亡和脂肪代谢过程中发挥调节作用.由于与siRNA的相关性及相似的功能,miRNA已引起人们的广泛关注.
- 王菲菲刘新光梁念慈
- 关键词:微小RNARNA小分子干扰
- 两种常用转染试剂转染siRNA至HL-60细胞转染效率的比较被引量:4
- 2011年
- 目的比较两种常用转染试剂转染小干扰RNA(siRNA)至悬浮细胞的转染效率及对细胞毒性的影响。方法以羧基荧光素(FAM)标记的siRNA为报告基因,以lipofectamine 2000和siPORT NeoFX为转染试剂,用流式细胞仪检测转染效率,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率。结果 siRNA>100 nmol/L时,lipofectamine 2000的转染效率高于siPORT NeoFX(P<0.05);si RNA<100 nmol/L时,前者低于后者(P<0.05)。siRNA终浓度及转染试剂用量相同时,lipofectamine 2000组HL-60细胞存活率与SiPORT NeoFX组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在使用高浓度si RNA时,lipofectamine2000对HL-60细胞有较高的转染效率和较小细胞毒性。
- 王巍张晓希刘新光
- 关键词:脂质体转染
- 针对人蛋白激酶CK2α亚基的shRNA表达质粒的构建与鉴定
- 2006年
- 目的:构建针对人蛋白激酶CK 2α亚基的shRNA表达质粒。方法:以mU 6pro为载体,化学合成shRNA表达模板,并定向克隆到载体的U 6启动子下游,琼脂糖凝胶电泳法筛选阳性克隆,基因测序法检测插入模板序列的正确性。结果:获得了正确的重组质粒,插入的转录模板序列完全正确。结论:成功构建了针对人蛋白激酶CK 2α亚基的RNA i体系。
- 朱汝森刘新光梁念慈
- 关键词:蛋白激酶CK2RNA干扰(RNAI)基因测序转染