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安徽省科技厅攻关项目(06023064)
作品数:
1
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相关作者:
丁振兴
胡红琳
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丁振兴
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2006
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人胰高血糖素样肽-1突变体基因的构建和表达
2006年
目的构建人胰高血糖素样肽-1突变体(2Gly-hGLP-1)基因,并表达GST-2Gly-hGLP-1。方法用限制性内切酶双酶切载有hGLPcDNA的重组克隆质粒PMD18Tsimple和原核表达质粒pGEX-4T-1,将GLP-1定向插入原核表达载体pGEX-4T-1+中,筛选出阳性克隆。在获得重组hGLP-1基因工程菌的基础上,利用定向突变的技术改造其第2位丙氨酸为甘氨酸,经酶切克隆于pGEX-4T-1+中,构建pGEX-4T-1+/2Gly-hGLP-1表达载体。转化大肠杆菌BL21并进行诱导表达。结果经测序分析,证明2Gly-hGLP-1已经克隆到pGEX-4T-1+中。Westernblot证实,该蛋白可被特异性hGLP-1识别。结论成功构建和表达了人胰高血糖素样肽-1突变体原核表达质粒。
刘莉
胡红琳
丁振兴
王佑民
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基因表达
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