安徽省自然科学基金(070413142)
- 作品数：10 被引量：25H指数：4
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- 干细胞因子对糖尿病小鼠小肠Cajal间质细胞的影响被引量：8
- 2011年
- 目的探讨外源性干细胞因子(stem cell factor,SCF)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠小肠Cajal间质细胞的影响。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为正常对照组、糖尿病组(DM组)、糖尿病+外源性SCF组(DM+SCF组),DM组和DM+SCF组一次性腹腔注射(ip)链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)造模,选取成功模型;DM+SCF组再ip SCF 0.2μg/(kg.d);正常组和DM组每天ip等量的磷酸盐缓冲液(pH=7.4)。所有小鼠干预6周结束后,给予印度墨水灌胃测定小肠传输速率,免疫组化观察小肠c-kit的表达,Western blot观察c-kit蛋白的表达。结果饲养6周后,DM+SCF组的体质量(g)、推进率、c-kit阳性细胞数(个/hpf)、c-kit蛋白的表达均比DM组明显增加(P均<0.05),仍低于正常组(P均<0.05);DM+SCF组的血糖(mmol/L)比DM组明显降低(P<0.01),仍高于正常组(P<0.05)。结论外源性SCF可以逆转Cajal间质细胞的异常改变,并对糖尿病小鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用。
- 杨琰余跃高显奎陈军王巧民
- 关键词：糖尿病干细胞因子CAJAL间质细胞C-KIT
- 糖尿病小鼠十二指肠运动的变化
- 2010年
- 糖尿病（DM）的病因主要是胰岛素分泌不足或胰岛索抵抗.胃肠动力障碍是DM患者的常见并发症之一,其机制尚不清楚.近年来普遍认为,Cajal间质细胞（ICC）广泛分布于胃肠道系统中,是胃肠道慢波的起搏细胞,在维持胃肠道正常的生理功能中发挥重要作用.
- 杨琰余跃陈军高显奎王巧民
- 关键词：糖尿病小鼠十二指肠运动胰岛素分泌不足CAJAL间质细胞胃肠动力障碍起搏细胞
- 胰岛素对糖尿病小鼠小肠功能的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 探讨胰岛素（regular insulin,RI）对糖尿病（DM）小鼠小肠功能的影响.方法 一次性给予雄性BALB/c小鼠链脲佐菌素（STZ,150 mg/kg）腹腔注射造模.将造模成功小鼠分为DM组6只,DM＋RI组6只,另选血糖正常小鼠6只为对照组.DM＋RI组给予RI 40U·kg-1·d-1皮下注射,对照组和DM组每天给予等量的磷酸盐缓冲液（pH=7.4）腹腔注射.所有小鼠干预6周结束后,给予印度墨水灌胃测定胃肠传输速率.免疫组织化学法检测各组小鼠十二指肠组织的c-kit阳性细胞数目.最后处死所有小鼠,用细胞内记录技术记录各组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波的变化.采用SPSS 17.0软件分析,多组资料间比较采用LSD检验.结果 干预6周后,DM＋RI组的多饮、多食、多尿症状比DM组减轻,体重较DM组明显增加[（23.33±3.13）g比（15.42±1.40）g,P＜0.01],但比对照组降低[（26.78±2.09）g,P＜0.05].第6周DM组血糖值显著高于对照组（P＜0.01）,但比DM＋RI组显著升高（P＜0.01）.DM组小肠推进率比DM＋RI组和对照组明显降低（P值均＜0.01）;DM＋RI组也较对照组降低（P＜0.01）.光镜下观察到DM组c-kit阳性细胞数明显低于DM＋RI组和对照组（P值均＜0.05）,DM＋RI组比正常组减少（P＜0.05）.DM组慢波频率比DM＋RI组和对照组显著降低（P值均＜0.01）,而DM＋RI组慢波频率比对照组降低（P＜0.01）.DM组慢波波幅比DM＋RI组和对照组明显降低（P值均＜0.01）,而DM＋RI组慢波波幅比对照组降低（P＜0.01）.结论 DM小鼠存在胃肠动力障碍,外源性RI可能对DM小鼠小肠动力障碍有一定的改善作用.
- 杨琰余跃高显奎陈军王巧民
- 关键词：糖尿病胰岛素十二指肠平滑肌细胞
- 突触在胃起搏调控胃慢波活动中的作用被引量：7
- 2011年
- 目的研究胃窦肌间神经丛中突触素(synaptophysin,Syn)分布及其mRNA和蛋白的表达,探讨突触素在胃起搏机制中的作用。方法通过手术建立Wistar大鼠胃起搏模型(近远端胃各缝制一对电极),分为起搏组(GES组,n=10)和对照组(n=6)。应用免疫组化染色观察GES组和对照组胃窦间神经丛中突触素分布,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测GES和对照组胃窦肌间神经丛中Syn mRNA和蛋白的表达量,以恒定表达的β-actin作为内参照。分别计算Syn mRNA与β-actinmRNA、Syn蛋白与β-actin蛋白表达积分光密度值的比值(Syn/β-actin),以反映组织中Syn mRNA和蛋白的相对表达量。结果与对照组相比,GES组肌间神经丛中Syn免疫反应阳性产物分布显著增多(806.421±342.135vs448.3±261.467,P<0.05;0.019±0.008vs0.010±0.005,P<0.05)。RT-PCR研究显示GES组Syn mRNA表达显著强于对照组,GES组syn/β-actin比值明显较对照组增加(0.146±0.0 28vs0.082±0.025,P<0.05);Western blot研究显示GES组Syn蛋白表达也较对照组明显增强,两组Syn/β-actin比值比较差异有统计学意义(0.502±0.098vs0.298±0.018,P<0.05)。结论胃起搏后胃肌间神经丛内突触素分布增多,突触素mRNA和蛋白表达量明显增加,表明胃窦肌间神经丛内突触可能在胃起搏中发挥了重要作用。
- 陈军余跃杨琰高显奎王巧民
- 关键词：胃电起搏突触突触可塑性
- 半夏泻心汤对糖尿病大鼠小肠运动的影响及其作用机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的初步研究半夏泻心汤对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠小肠运动的影响及其作用机制。方法将SD大鼠分为对照组、DM组、DM+半夏泻心汤组(DM+BX组)、DM+多潘立酮组(DM+Dom组)。半固体营养糊灌胃测定小肠推进率,免疫组化和图像分析对突触素(Syn)、蛋白基因产物9.5(PGP9.5)和c-kit的表达进行比较。结果 DM+BX组、DM+Dom组的小肠推进率较DM组明显提高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。DM+BX组、DM+Dom组的Syn、PGP9.5、c-Kit阳性产物面积和平均光密度值与DM模型组相比均有提升。结论半夏泻心汤可能对受损的DM大鼠小肠肌间神经丛及ICCs有部分恢复作用从而改善糖尿病大鼠的小肠动力障碍。
- 蒋楠余跃陈凤琴袁莉莉王巧民
- 关键词：半夏泻心汤突触素CAJAL间质细胞
- 胃电刺激对大鼠胃窦肌间神经丛Cajal间质细胞超微结构的影响
- 2011年
- 背景:前期研究发现胃窦肌间神经丛Caial间质细胞(ICC-MY)数量增多参与了长时程长脉冲胃电刺激(GES)对胃慢波的调控。目的:观察不同时程长脉冲GES对大鼠胃窦ICC-MY数量和超微结构的影响,进一步探讨GES调控胃慢波的可能机制。方法:建立Wistar大鼠GES模型。将模型大鼠分为3组,GES1组和GES2组选用适宜的刺激参数控制胃慢波,对照组不予GES。GES1组仅予刺激一次;GES2组每天刺激一次,连续20 d。完成GES后处死大鼠,取胃窦组织,行透射电子显微镜观察。结果:GES1组胃窦ICC-MY数量与对照组相比未见明显变化,GES2组ICC-MY数量较GES1组和对照组明显增多。GES1组和GES2组ICC胞质内线粒体和核糖体均较对照组增多。GES1组ICC突起与周围平滑肌细胞(SMC)直接相连,GES2组ICC与周围SMC紧密相连,对照组ICC与周围SMC之间未见明显连接。结论:胃窦ICC-MY数量和超微结构改变参与了长时程长脉冲GES对胃慢波的调控。
- 陈凤琴余跃陈军薛丹官阳王巧民
- 关键词：CAJAL间质细胞肠肌丛超微结构
- 胃电起搏对大鼠胃窦Cajal间质细胞的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究胃电起搏对大鼠Cajal间质细胞(ICC)数量和C-kit受体表达的影响,探讨ICC在胃电起搏调控胃慢波活动中的作用。方法建立Wistar大鼠胃起搏模型,将大鼠分为起搏组(n=8)和对照组(n=8)。选用适宜的起搏参数以控制胃电慢波,持续刺激1 h,连续刺激20 d后处死大鼠并取胃窦组织,以免疫组织化学方法结合图像分析技术和Western blot方法分析C-kit受体免疫反应阳性细胞和C-kit蛋白表达变化。结果起搏组大鼠胃肌间神经丛内C-kit免疫反应阳性产物面积和平均光密度值均显著高于对照组[(1976.76±336.67)vs(1368.23±459.32),P<0.05;(0.19±0.50)vs(0.12±0.52),P<0.05],刺激组大鼠胃窦组织C-kit蛋白表达显著增高[(0.50±0.09)vs(0.29±0.02),P<0.05]。结论胃电起搏后胃窦肌间神经丛ICC数量增多,参与了胃电起搏调控胃慢波活动。
- 陈军余跃杨琰高显奎王巧民
- 关键词：胃电描记术间质细胞原癌基因蛋白质C-KIT
- 糖尿病大鼠小肠Cajal间质细胞及干细胞因子的变化及半夏泻心汤的干预作用被引量：1
- 2013年
- [目的]观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)及干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的变化及半夏泻心汤的干预作用。[方法]除10只大鼠作为正常组外,其他大鼠采用腹腔注射STZ复制DM模型后随机分为DM组、半夏泻心汤组及西药组。半固体营养糊灌胃测定各组大鼠小肠推进率,免疫组化检测c-Kit及SCF在小肠组织中的表达;Western blot检测小肠组织c-Kit蛋白、SCF蛋白表达。[结果]半夏泻心汤组与西药组大鼠的体质量、小肠推进率、c-Kit及SCF阳性细胞数、c-Kit蛋白及SCF蛋白的表达均较DM组明显增加(均P<0.05);半夏泻心汤组与西药组大鼠的血糖值较DM组明显降低(P<0.05)。半夏泻心汤组与西药组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。[结论]半夏泻心汤可以促进DM大鼠小肠肌间神经丛c-Kit、SCF的表达,提示对受损的DM大鼠小肠ICC、SCF有部分恢复作用,从而对DM大鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用。
- 蒋楠余跃陈凤琴袁莉莉王巧民
- 关键词：糖尿病半夏泻心汤CAJAL间质细胞干细胞因子
- 胃肠电刺激和胃肠动力紊乱研究进展被引量：2
- 2010年
- 胃肠电刺激治疗消化道运动障碍性疾病方面的研究已经取得可喜的成果。此文就胃肠电刺激的分类和作用机制及其在胃轻瘫、肥胖、大便失禁、便秘及慢性假性肠梗阻中临床应用的研究成果进行综述。
- 陈军余跃
- 关键词：胃肠动力紊乱
- 胃Cajal间质细胞的分离和培养被引量：7
- 2009年
- 目的探讨Balb/c小鼠胃Cajal间质细胞(ICC)的分离和培养方法,为进一步研究其生理特征及其与相关疾病的关系提供基础。方法无菌条件下取出小鼠胃组织,联合使用机械分离法和酶解法分离细胞,将细胞悬液接种于含有干细胞因子的M199培养基中进行培养。倒置显微镜下观察其形态,ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光染色后,用激光共聚焦显微镜进行鉴定。结果倒置显微镜下观察ICC有多个突起,突起较长并相互之间形成网络状。c-kit抗体荧光染色呈阳性。结论成功建立了一套小鼠胃ICC的分离培养方法。实验过程应当注意选择适当天龄的小鼠、尽量减小机械化学损伤、避免污染等问题。
- 高显奎余跃李京培王巧民
- 关键词：细胞分离细胞培养技术
