辽宁省科学技术基金(20022140)
- 作品数：9 被引量：38H指数：4
- 相关作者：刘天庆葛丹马学虎李香琴崔占峰更多>>
- 相关机构：大连理工大学牛津大学更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 成骨细胞在旋转壁式生物反应器内的大规模扩增被引量：4
- 2005年
- 目的 进行SD大鼠成骨细胞在旋转壁式生物反应器内大规模扩增培养的研究。方法 利用微载体悬浮培养法在旋转壁式生物反应器内大规模扩增成骨细胞 ,检测其组织形态和生物功能后。作为接种到支架材料上并于反应器内三维环境中培养组织工程骨的种子细胞。结果 成骨细胞在生物反应器中每代可以扩增十倍以上 ,同时经过倒置相差显微镜、SEM(扫描电镜 )以及ALP(碱性磷酸酶 )和MTT等生物学性能检测后 ,发现在旋转壁式生物反应器中三维培养的成骨细胞各种生物指标性能良好。结论 新型旋转壁式生物反应器可以提供低剪切力的培养环境 ,而且细胞之间有三维联系的机会 ,成骨细胞表现出良好的体外扩增能力 ,适于建立一种理想的成骨细胞体外扩增的三维培养体系。
- 宋克东刘天庆崔占峰李香琴葛丹孙相玉马学虎
- 关键词：成骨细胞微载体体外培养
- 新型旋转壁式生物反应器内三维组织工程骨的构建被引量：14
- 2004年
- 利用微载体悬浮培养法将成骨细胞在旋转壁式生物反应器内进行大规模扩增 ,并检测细胞的组织形态和生物功能 .然后以此作为种子细胞 ,分别以 2× 10 6个 /ml和 1× 10 6个 /ml两种密度接种到支架材料上 ,于旋转壁式生物反应器 (RWV)内进行三维组织工程骨的构建 .并将所构建的骨组织分别进行倒置显微镜 (invertedmicroscope)、扫描电镜 (SEM )、碱性磷酸酶 (ALP)、矿化结构和AO/EB双重荧光染色等生物学性能检测 ,以及对培养过程的营养物质代谢情况进行监控和分析 .结果表明 ,在RWV中培养的骨组织生长良好 ,分泌大量胶原纤维 ,并有矿化基质和新骨样组织形成 .由上述结果可断定 ,通过RWV内部流体对流所产生的应力刺激 ,可提高成骨细胞碱性磷酸酶的活性表达 ,并加速矿化结节的形成 ,从而完成成骨细胞的快速增殖与分化以及工程化组织的三维构建 .
- 宋克东刘天庆李香琴崔占峰葛丹孙相玉马学虎
- 关键词：组织工程骨成骨细胞生物反应器细胞培养
- 神经干细胞球生长动力学模型被引量：2
- 2006年
- 神经干细胞的体外大规模培养对于细胞移植治疗中枢神经系统受损及各种神经退行性疾病有重大意义。体外呈球状生长的神经干细胞球在长大到一定尺寸之后,有可能在其内部由于养分缺乏而形成坏死细胞,这对于干细胞的有效扩增是极为不利的。因此,模拟神经球的动态生长过程并分析出现坏死细胞的临界神经球尺度对于神经干细胞的大规模扩增有重要意义。本研究采用元胞自动机技术建立了模拟神经球生长的动态模型,并结合神经球内养分的扩散传递模型,求解神经干细胞球内出现坏死细胞的临界神经球尺寸以及坏死细胞的扩大规律。计算结果表明,坏死细胞的出现与体外培养条件有一定关系;坏死细胞的出现主要取决于神经球的尺寸,其外部再好的培养条件也不可能抑制坏死的出现。此外,计算结果还表明,神经球内由于氧缺乏而形成的坏死细胞的出现要早于由于葡萄糖缺乏时的情况,并且坏死细胞一旦出现,其增长速度就非常快,有可能很快使整个神经球成为坏死细胞球。本研究所建立的CA模型及神经球内的传质模型可以很好的模拟神经球的生长过程。
- 刘天庆葛丹程昉鞠智好李香琴孙相马学虎崔占峰
- 关键词：神经干细胞元胞自动机动力学坏死细胞
- 海藻酸钙微胶珠培养神经干细胞研究被引量：2
- 2007年
- 神经干细胞作为一种具备自我更新及多向分化潜能的细胞,已经引起国内外研究者的高度关注。神经干细胞的发现、研究与应用,将在治疗神经系统疾病以及神经损伤的修复中起到重要作用,但是神经干细胞的来源受限及数量不足是临床应用的最大障碍。采用三维动态培养从而实现神经干细胞大规模扩增是解决其数量不足的有效方法。但是,在三维动态搅拌条件下,剪切力对细胞的损害是非常大的。考虑到海藻酸钙微胶珠在细胞培养领域的应用,如果把神经干细胞包囊到微胶珠中进行动态培养,将会避免剪切力对干细胞的损伤,因此是一个非常值得期待的干细胞培养方式。本研究在静态条件下,采用海藻酸钙微胶珠作为神经干细胞的3D培养手段,对成囊工艺进行了探索,以确定适于培养神经干细胞的最佳胶珠制备工艺。通过微胶珠内部的扩散传质模型,研究了微胶珠制备工艺中各参数对其扩散系数(D)的影响,找出微胶珠最佳制备工艺参数为:直径2mm,1.5%(wt%)海藻酸钠滴入3.5%(wt%)CaCl2中,反应时间10min。确定上述工艺后,对小鼠神经干细胞进行了不同包囊密度条件下的培养,得到包囊神经干细胞的最佳密度为0.08×106cells.mL-1。此外,本研究还对海藻酸钙微胶珠培养的神经干细胞进行了nestin等特异性蛋白的免疫荧光化学染色,结果为阳性,表明所培养的神经干细胞能够保持其干细胞的特性。本研究结果表明,采用优化参数制备的海藻酸钙微胶珠是培养神经干细胞的有效手段。同时也为动态微囊培养神经干细胞打下了良好基础。
- 姚立松刘天庆葛丹崔占峰马学虎
- 关键词：海藻酸钙神经干细胞
- 新型旋转壁式生物反应器内三维组织工程骨的构建
- ＜正＞ 利用SD大鼠成骨细胞作为种子细胞整合到支架材料上,在新型旋转壁式生物反应器内进行组织工程骨的三维构建。利用微载体悬浮培养法将成骨细胞在旋转壁式生物反应器内进行大规模扩增,并检测细胞的组织形态和生物功能。然后以此作...
- 宋克东刘天庆李香琴葛丹孙相玉马学虎崔占峰
- 文献传递
- 神经干细胞对去血清诱导PC12细胞凋亡的作用被引量：6
- 2007年
- 肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12cells)去血清后,其凋亡与多巴胺能神经元的凋亡有许多共同之处,今通过研究神经干细胞(NSCs)对去血清诱导的PC12细胞凋亡的作用,进一步为NSCs移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据。将正常培养的PC12细胞与NSCs以不同的方式进行去血清共培养,观察PC12细胞的形态,检测PC12细胞的活性,计算PC12细胞的存活率,同时检测培养基中胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的浓度,分析不同培养方式下NSCs对去血清诱导凋亡的PC12细胞的作用以及NSCs与去血清诱导凋亡的PC12细胞共培养后,其分泌GDNF的能力。结果表明:①去血清诱导PC12细胞凋亡呈时间依赖性,去血清72h后,PC12细胞存活的比率为44.25%;②NSCs培养基对去血清诱导凋亡的PC12细胞没有明显的保护作用;③NSCs培养上清及NSCs对去血清诱导凋亡的PC12细胞具有保护作用;④NSCs与去血清诱导凋亡的PC12细胞共培养后,分泌GDNF的能力增强。
- 李香琴刘天庆朱蕾蕾葛丹崔占峰
- 关键词：神经干细胞PC12细胞神经营养因子凋亡共培养
- 神经网络模型对造血干细胞体外扩增效果评价及预测
- 2008年
- 采用神经网络技术对造血干细胞HSCs体外扩增能力建立了评价及预测模型.总结了前人的实验结果,共获得341组数据.选取细胞接种密度、细胞因子组合、细胞来源、血清、基质细胞、反应器类型和培养时间等7个影响因子作为网络输入特征参数,分别对有核细胞(nuclear cells,NCs)、CD34+细胞和成集落细胞(colony-forming units,CFU-Cs)进行体外扩增能力的拟合评价及预测.选取124、90及86组实验数据分别用于NCs、CFU-Cs和CD34+细胞为评价指标的神经网络训练;而17、10及14组实验数据分别用于NCs、CFU-Cs和CD34+细胞为评价指标的神经网络预测.结果表明,对NCs、CFU-Cs和CD34+细胞的区间训练准确率分别为85.5%、86.7%和86.1%;区间预测准确率分别为82.4%、70.0%和71.4%.由此可知,人工神经网络的非线性模拟使定量描述HSCs体外扩增效果与培养条件间的关系及预测HSCs的最佳体外扩增条件成为可能.
- 范秀波刘天庆李香琴刘洋马学虎
- 关键词：人工神经网络造血干细胞体外扩增影响因素
- 人造血干/祖细胞在生物反应器内扩增的研究
- ＜正＞ 对某些患有恶性血液病或免疫系统疾病的患者来说,造血干细胞移植是重建机体造血功能和免疫系统功能的唯一根治性手段,但是实际应用中存在着造血干/祖细胞的数量限制问题。我们尝试在旋转壁式生物反应器（RWV）内利用海藻酸钠...
- 刘洋刘天庆范秀波葛丹崔占峰马学虎
- 文献传递
- 不同培养方式扩增神经干细胞的比较
- ＜正＞ 神经干细胞的体外培养方法有神经球悬浮培养法和单层贴壁法两种。神经干细胞在培养基中分裂增殖后自动成球,在没有外界干扰的情况下以神经球的方式进行扩增。但随着神经球的不断增长,球的尺寸不断的增大使得营养物质很难到达神经...
- 郑可葛丹刘天庆
- 海藻酸钙微胶珠培养神经干细胞
- ＜正＞ 神经干细胞作为一种具备多向分化潜能的细胞,已经引起国内外研究者们的高度关注。神经干细胞的发现、研究与应用,将在治疗神经系统疾病以及神经损伤的修复中起到重要作用,但是神经干细胞的来源受限及数量不足是临床应用的最大障...
- 姚立松刘天庆葛丹崔占峰马学虎
- 文献传递
