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焦磷酸测序技术检测结核分枝杆菌四种药物耐药性被引量：16: 2011年; 目的利用焦磷酸测序技术检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、氧氟沙星、阿米卡星的耐药性，并对其临床应用进行评价。方法收集上海市肺科医院2008--2009年临床确诊的肺结核患者的痰标本培养阳性结核分枝杆菌89株。所有菌株按《结核病诊断实验室检验规程》进行分枝杆菌培养、菌种鉴定。另外10株已知药敏结果的结核分枝杆菌来自上海市肺科医院菌株库。利用焦磷酸测序技术，以10株已知药敏结果和经直接测序已知耐药基因突变情况的结核分枝杆菌为试验菌株，探索焦磷酸测序检测结核分枝杆菌rpoB、katG、gyrA、邢耐药基因的最佳模式，并用该条件检测89株结核分枝杆菌临床分离株，检测结果与Bactec960药敏法进行比较。结果 rpoB、gyrA基因检测宜采用焦磷酸测序序列分析模式，katG、rm基因检测宜采用焦磷酸测序单核苷酸多态性模式。以Bactec960药敏法测定结果为判断标准，则焦磷酸测序法检测89株结核分枝杆菌临床分离株对利福平、异烟肼、氧氟沙星、阿米卡星耐药性的敏感度分别为98．0％、64．1％、79．5％、78．3％，特异度分别为97．5％、100．O％、90．0％、100．0％，准确性分别为97．8％、77．5％、85．4％、94．4％，该法检测利福平、氧氟沙星、阿米卡星的检测结果与Bactee960药敏检测结果一致性较好，Kappa值均≥0．7。结论焦磷酸测序技术检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、氧氟沙星、阿米卡星耐药性具有快速、准确、高通量的优点，是一种可对结核分枝杆菌多种药物耐药性进行快速检测的方法。; 郑瑞娟秦莲花周燕王洁乐军胡忠义; 关键词：抗结核药微生物敏感性试验

焦磷酸测序技术快速检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性: 目的建立焦磷酸测序技术快速检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性方法。方法应用生物素标记的引物扩增耐氧氟沙星gyrA基因片段,用焦磷酸测序仪检测92株结核分枝杆菌临床分离株gyrA基因氧氟沙星耐药决定区的突变情况,与H37Rv序...; 周燕郑瑞娟秦莲花王洁陆俊梅乐军胡忠义; 文献传递

焦磷酸测序技术快速检测结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐药性被引量：2: 2011年; 随着耐药结核病患者的不断增加，氧氟沙星（Ofloxacin，OFLX）等氟喹诺酮类抗结核分枝杆菌MTB的药物被广泛应用，对OFLX的耐药呈上升趋势。早期检测OFLX的耐药性对临床用药具有指导作用。氟喹诺酮类药物主要作用靶位是菌体的DNA解旋酶，该酶由gyrA和gyrB基因分别编码的A和B亚基组成。; 周燕郑瑞娟秦莲花王洁陆俊梅乐军胡忠义; 关键词：抗结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性氟喹诺酮类药物 DNA解旋酶

显微镜观察药物敏感度检测技术在二线抗结核药耐药性检测中应用被引量：12: 2010年; 目的探讨MODS同时快速检测4种二线抗结核药耐药性的效果。方法用24孔细胞培养板建立显微镜观察药物敏感性技术，进行二线抗结核药物耐药性检测，并对最佳检测条件进行探讨。将该技术用于上海市肺科医院2007-2008年住院肺结核患者痰标本分离60株结核分枝杆菌对丙硫异烟胺、阿米卡星、卷曲霉索、左氧氟沙星耐药性检测，并与传统罗氏药敏结果进行比较，对2种方法检测结果不符的菌株进行MIC测定。结果MODS检测丙硫异烟胺、阿米卡星、卷曲霉素、左氧氟沙星药敏结果与罗氏药敏结果符合率分别为96．7％（58／60）、98．3％（59／60）、91．7％（55／60）、96．7％（58／60）。以传统罗氏药敏结果为判断金标准，MODS检测敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值及准确性丙硫异烟胺分别为100％、87．5％、87．5％、100％、96．7％，阿米卡星分别为100％、90．0％、90．0％、100％、98．3％，卷曲霉素分别为76．9％、95．7％、83．3％、93．8％、91．7％，左氧氟沙星分别为100％、96．0％、83．3％、100％、96．7％。结论MODS检测丙硫异烟胺、阿米卡星、卷曲霉素、左氧氟沙星耐药性具有快速、操作简便、价廉等优点，与传统罗氏药敏结果有较高的符合率，可作为MTB耐药性的快速检测方法之一。; 付佑辉郑瑞娟王洁金文国胡忠义; 关键词：结核抗结核药微生物敏感性试验显微镜检查

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上海市卫生局科研基金(2007Y59)

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