广东省自然科学基金(20099151008901000105)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 小干扰RNA下调白血病细胞X连锁凋亡抑制蛋白的表达及其对化疗药物敏感性的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨小干扰RNA（siRNA）下调白血病MOLT-4、HL-60、K562细胞的白血病细胞X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）的表达对化疗药物敏感性的影响.方法 采用实时荧光定量PCR和Western免疫印迹检测MOLT-4、HL-60、K562细胞及健康人外周血单个核细胞（PBMC）XIAP mRNA和XIAP蛋白表达水平.用NucleofectorTM核酸转染仪对高表达XIAP的K562细胞转染XIAP siRNA（实验组）,同时以转染无同源性siRNA作阴性对照组,未转染任何siRNA的K562细胞作空白对照组,并检测3组细胞XIAP mRNA和XIAP蛋白表达水平.同时将实验组、阴性及空白对照组细胞暴露于不同浓度的依托泊苷（vp-16,0.01、0.1、1、10、100mg/L）及阿糖胞苷（Ara-c,0.1、1、10、100、1000、10 000mg/L）,用CCK-8法检测细胞抑制率变化.结果 与健康人PBMC比较,MOLT-4、HL-60、K562细胞XIAPmRNA及蛋白表达均增高（均P＜0.05）,其中K562细胞XIAPmRNA及蛋白表达水平最高,与MOLT-4、HL-60细胞比较差异有统计学意义（均P＜0.05）.K562细胞转染XIAP siRNA48 h后,与阴性对照组、空白对照组比较,实验组细胞XIAP mRNA及蛋白表达水平均明显下降（mRNA：0.37±0.10比1.41±0.13比1.00±0.12,蛋白：0.37±0.03比0.99±0.08比0.98±0.07,均P＜0.05）.在给予1 mg/L vp-16、10及100 mg/L的Ara-c后,实验组细胞抑制率与阴性对照组、空白对照组比较,差异有统计学意义（均P＜0.05）;在给予其他浓度vp-16和Ara-c后,3组细胞抑制率差异均无统计学意义（均P＞0.05）.结论 XIAP siRNA能特异性下调K562细胞XIAPmRNA和蛋白质水平的表达,增强K562细胞对化疗药物依托泊苷、阿糖胞苷的敏感性.
- 李丹尹松梅谢双锋聂大年李益清马丽萍王秀菊吴裕丹肖洁
- 关键词：小分子干扰白血病细胞
