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广西壮族自治区自然科学基金(2011GXNSFB018032)

作品数:8 被引量:25H指数:3
相关作者:梁家幸卢冰霞何颖苏乾莲李斌更多>>
相关机构:广西兽医研究所广西大学桂林市动物疫病预防控制中心更多>>
发文基金:广西壮族自治区自然科学基金公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 8篇会议论文

领域

  • 16篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 15篇病毒
  • 13篇乙型脑炎
  • 10篇乙型
  • 10篇脑炎
  • 8篇乙型脑炎病毒
  • 8篇脑炎病毒
  • 6篇猪流行性乙型...
  • 6篇流行性
  • 6篇广西分离株
  • 6篇分离株
  • 5篇E基因
  • 4篇猪细小病毒
  • 4篇细小病毒
  • 4篇RT-LAM...
  • 3篇原核表达
  • 3篇生物信息
  • 3篇生物信息学
  • 3篇特异
  • 3篇特异性
  • 3篇主要抗原域

机构

  • 15篇广西大学
  • 15篇广西兽医研究...
  • 1篇桂林市动物疫...

作者

  • 12篇李斌
  • 10篇秦毅斌
  • 10篇卢冰霞
  • 8篇赵武
  • 8篇苏乾莲
  • 8篇梁家幸
  • 7篇梁保忠
  • 7篇何颖
  • 6篇黄伟坚
  • 3篇姜佳佳
  • 3篇刘磊
  • 3篇李莹莹
  • 3篇闭炳芬
  • 2篇段群棚
  • 2篇刘芳
  • 1篇黎木兰
  • 1篇李茂宁
  • 1篇肖爱欢
  • 1篇陈忠伟
  • 1篇何苹萍

传媒

  • 2篇南方农业学报
  • 1篇中国动物检疫
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇西南农业学报
  • 1篇广西畜牧兽医
  • 1篇基因组学与应...
  • 1篇Agricu...

年份

  • 13篇2013
  • 3篇2011
8 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792 E基因主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定
2013年
对广西猪JEV FC792株的E基因主要抗原域Ⅰ、Ⅱ基因(Ea基因)进行原核表达及抗原性鉴定,为猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)诊断抗原和基因工程疫苗的研制奠定基础。结果:成功构建广西猪JEV FC792株Ea基因的克隆重组质粒pMD18-T-Ea及表达重组质粒pET32a-Ea,经SDS-PAGE及Western blot鉴定表明,JEV FC792株Ea蛋白在Rosetta(DE3)菌中成功进行融合表达,表达出约58 KDa的融合蛋白;经抗原性鉴定表明,表达的融合蛋白Ea能与猪JEV阳性血清抗体发生特异性反应,融合蛋白Ea具有良好的JEV抗原性。
卢冰霞李斌秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲梁保忠李莹莹姜佳佳杨盛斌黄伟坚
关键词:原核表达
广西猪乙型脑炎病毒的分离及初步鉴定被引量:4
2011年
【目的】了解广西猪乙型脑炎(JE)地方流行毒株特点,为有效防控广西猪JE奠定基础。【方法】对从广西各地猪场采集疑似JE病例猪的脑组织、流产胎儿、死胎、木乃伊胎、公猪精液、猪舍蚊子等靶组织样品进行猪乙型脑炎病毒(JEV)检测,并选择部分阳性样品进行JEV分离鉴定及病毒E基因遗传进化分析。【结果】在采集的465份JE疑似病料样品中,有72份为JEV阳性;通过接种BHK-21细胞、乳鼠及SPF鸡胚,分离获得两株JEV地方分离毒株,分别命名为GP株和LC株;遗传进化分析显示,GP株和LC株之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.9%和99.8%;两株分离株与疫苗毒株SA14-14-2的核苷酸同源性分别为99.7%和99.9%,氨基酸同源性分别为99.4%和99.6%,且均属GIII型JEV。【结论】广西受检猪群存在较严重的JEV感染,应引起重视并加强防控。
李茂宁秦毅斌卢冰霞赵武李斌梁家幸肖爱欢何颖苏乾莲梁保忠刘芳黄伟坚
关键词:E基因
猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析被引量:3
2013年
为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP 4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc 1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos 2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。
李斌卢冰霞秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲陈忠伟闭炳芬段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠黄伟坚
关键词:乙型脑炎病毒E基因克隆生物信息学
猪肾细胞系IBRS-2感染猪细小病毒的检测
本研究应用聚合酶链式反应技术对未接种猪细小病毒但出现类似猪细小病毒感染病变的日常培养猪肾细胞系IBRS-2进行检测,结果发现IBRS-2细胞感染了猪细小病毒。检测结果表明猪肾细胞系IBRS-2感染猪细小病毒较为常见,提示...
李斌梁家幸苏乾莲赵武秦毅斌何颖卢冰霞段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠
关键词:聚合酶链式反应猪细小病毒
文献传递
Construction and Preliminary Application of RT-LAMP Detection Method for Swine Japanese B Encephalitis Virus
2013年
[Objective] This study aimed to establish a rapid,sensitive and specific method using reverse transcription loop-mediated isothermal amplification(RT-LAMP) technology to detect swine Japanese B encephalitis virus(JEV).[Method] Four specific LAMP primers were designed according to six loci the conservative region of JEV E gene sequence. Positive JEV RNA sample was used as a template for one-step amplification,and the reaction conditions and reaction system were optimized.[Result] Experimental results showed that the established method had high sensitivity,with the detection limit of 0. 5pg; specificity experiments indicated that the method had high specificity and there was no amplification reaction for other viral pathogens. The coincidence rate between detection results of RT-LAMP and RT-Nested-PCR was 90. 9%. After RT-LAMP reaction,a chemiluminescent agent was added for visual observation,which greatly reduced the detection time. This method required no special equipment but only a water bath,which was a simple,sensitive and rapid detection method for swine Japanese B encephalitis virus and could be applied in primary laboratories.[Conclusion] An RT-LAMP detection method for swine Japanese B encephalitis virus was successfully established and preliminarily applied in clinical practice.
Bingxia LULei LIUYibin QINWu ZHAOJiaxing LIANGXuan GUOMulan LIBin LIYing HEQianlian SUBaozhong LIANGBingfen BIWeijian HUANG
关键词:猪流感病毒乙型脑炎病毒日本脑炎病毒套式PCR
猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用被引量:3
2013年
[目的]建立1种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。[方法]根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。[结果]该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5 pg;特异性试验表明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nested-PCR相比,2种方法检出率的符合率为90.9%。反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间。该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法。[结论]成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步应用。
卢冰霞刘磊秦毅斌赵武梁家幸郭旋黎木兰李斌何颖苏乾莲梁保忠闭炳芬黄伟坚
关键词:RT-LAMP敏感性特异性
猪肾细胞系IBRS-2感染猪细小病毒的检测
本研究应用聚合酶链式反应技术对未接种猪细小病毒但出现类似猪细小病毒感染病变的日常培养猪肾细胞系IBRS-2进行检测,结果发现IBRS-2细胞感染了猪细小病毒。检测结果表明猪肾细胞系IBRS-2感染猪细小病毒较为常见,提示...
李斌梁家幸苏乾莲赵武秦毅斌何颖卢冰霞段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠
关键词:聚合酶链式反应猪细小病毒
猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析
为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis ...
李斌卢冰霞秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲陈忠伟闭炳芬段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠黄伟坚
关键词:乙型脑炎病毒E基因克隆生物信息学
文献传递
猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用
【目的】建立一种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。【方法】根据JEVE基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进...
卢冰霞刘磊秦毅斌赵武梁家幸郭旋黎木兰李斌何颖苏乾莲梁保忠闭炳芬黄伟坚
关键词:RT-LAMP敏感性特异性
文献传递
猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792E基因主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定
为了猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)诊断抗原和基因工程疫苗的研制做准备,对广西猪JEVFC792株的E基因主要抗原域Ⅰ、Ⅱ基因(Ea基因)进行原核表达及抗原性鉴定。结果表明,成功构建广西猪JEV FC792株Ea基因的克隆...
卢冰霞李斌秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲梁保忠李莹莹姜佳佳杨盛斌黄伟坚
关键词:原核表达
文献传递
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