广东省科技计划工业攻关项目(2006B35501008)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 索拉非尼诱导K562细胞凋亡机制的研究
- 2011年
- 目的观察索拉非尼对BCR-ABL阳性人慢性粒细胞白血病细胞株K562的增殖、凋亡作用,探索多靶点抗肿瘤药物索拉非尼诱导K562细胞凋亡可能机制。方法 CCK-8法观察索拉非尼0、5、7.5、10、12.5、15、20μmol/L作用48 h后K562细胞增殖活力变化;AnnexinV/PI双染法观察索拉非尼0、5、10、15、20μmol/L对K562细胞株的早期凋亡诱导作用;PI单染法观察索拉非尼对K562细胞株晚期凋亡诱导作用。Hochest 33342染色法观察索拉非尼所致K562细胞凋亡形态学变化。免疫印迹法检测凋亡相关蛋白PARP变化。结果索拉非尼以浓度依赖的方式抑制K562细胞株增殖,诱导细胞凋亡及凋亡相关蛋白PARP剪切。结论 PARP剪切是执行凋亡功能的caspase途径活化的一个标记,提示索拉非尼诱导K562细胞凋亡的机制与caspase级联反应活化有关,多靶点抗肿瘤药物索拉非尼用于治疗慢性粒细胞白血病及伊马替尼耐药的慢性粒细胞白血病具有潜在的应用前景。
- 肖若芝陈琰王立琳何程明阮星星熊慕珺林东军
- 关键词：索拉非尼K562细胞细胞凋亡PARP
- 索拉非尼联合柔红霉素对白血病K562细胞的抑制作用被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨小分子Raf激酶抑制剂索拉非尼(sorafenib)联合柔红霉素(DNR)对白血病细胞K562及U937的抑制作用及可能的分子机制。方法:MTT法测定索拉非尼和柔红霉素单独作用于K562和U937细胞的抑制率及DNR IC10联合不同浓度索拉非尼作用于K562及U937的联合抑制率;流式细胞AnnexinⅤ/PI法测定单药及联合用药后K562细胞的凋亡率以及Hoechst33258染色法观察单药及联合作用后细胞凋亡形态的改变;West-ern blotting法测定索拉非尼、DNR及U0126对K562及U937p-ERK1/2的影响;根据金氏方程证明2种药物联合抑制率及凋亡是否有协同作用。结果:MTT法测定索拉非尼联合DNR对K562及U937均有协同抑制作用(q>1.15,P<0.01);流式细胞AnnexinⅤ/PI和Hoechst33258染色法,均证明索拉非尼联合柔红霉素能联合诱导K562细胞凋亡(q>1.15,P<0.05),两者有明显的一致性;K562细胞的基础pERK1/2蛋白水平明显高于U937细胞(P<0.01),索拉非尼和U0126都能够显著抑制K562细胞p-ERK1/2水平;U0126联合DNR存在协同抑制K562细胞的作用。结论:索拉非尼联合DNR作用于白血病细胞K562、U937存在协同抑制及凋亡诱导作用;DNR对U937的抑制作用明显高于K562;索拉非尼对K562的敏感性高于U937细胞;索拉非尼可能通过下调p-ERK1/2水平增加柔红霉素抗白血病细胞的效应。
- 肖若芝何程明王立琳阮星星陈琰林东军
- 关键词：索拉非尼柔红霉素白血病
- 索拉非尼通过下调细胞周期蛋白D1诱导急性髓细胞白血病细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的观察索拉非尼对U937、HL60细胞株和1例急性髓细胞白血病(AML)患者(AML-M2)白血病细胞的细胞周期蛋白D1(CCND1)表达情况的影响,探讨索拉非尼对白血病细胞的作用机制。方法常规培养U937、HL60细胞株,密度梯度离心法分离白血病患者的白血病细胞。将加有索拉非尼的细胞培养组设为实验组,将加有空白培养液的培养组设为对照组,常规MTT法检测细胞生长抑制率。使用Annexin V-FITC试剂盒,流式细胞术检测实验组及对照组0h、12h、24h、48h的细胞凋亡率。运用实时定量PCR(SYBR GreenⅠ荧光染料法)测定实验组和对照组在0h和24h两个时间点CCND1基因的表达量。结果索拉非尼各浓度均可抑制细胞生长,抑制率由1.27%升至89.88%。药物共同培养,实验组凋亡率高于对照组。实验组24h凋亡率在(19.89±5.73)%。定量PCR测定实验组CCND1表达下调达5.88倍,对照组CCND1表达上调达1.18倍。结论索拉非尼促进AML细胞凋亡和CCND1基因表达下调,CCND1基因参与了索拉非尼促进AML细胞凋亡的调控过程。
- 阮星星肖若芝王立琳何程明陈琰
- 关键词：细胞周期蛋白D1U937细胞HL-60细胞索拉非尼
- U0126增强索拉非尼对K562细胞增殖抑制、凋亡及诱导分化作用被引量：2
- 2011年
- 目的:观察索拉非尼、索拉非尼联合MEK激酶抑制剂U0126对人慢性粒细胞白血病K562细胞株增殖、凋亡及分化的影响,并初步探讨其机制。方法:CCK-8法观察索拉非尼、U0126单用及不同浓度索拉非尼联合10μmol/L U0126作用K562细胞48 h后细胞增殖活力变化;PI单染法及Hoechst 33342染色法观察索拉非尼、U0126单用及索拉非尼联合U0126对K562细胞株的凋亡诱导作用;细胞周期分析及联苯胺染色观察索拉非尼、U0126单用及低浓度索拉非尼联合U0126是否诱导K562细胞株向红系分化;采用免疫印迹法检测c-Myc蛋白表达。结果:MEK抑制剂U0126增强了索拉非尼对K562细胞增殖抑制、促凋亡及诱导分化作用。两药联用显著下调K562细胞c-Myc蛋白水平。结论:MEK抑制剂U0126增强索拉非尼对K562细胞增殖抑制、凋亡及诱导分化作用,这可能与其协同下调c-Myc蛋白有关。
- 陈琰肖若芝王立琳何程明阮星星熊慕珺林东军
- 关键词：索拉非尼U0126K562细胞
