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醋酸甲羟孕酮(MPA)人工抗原的合成与单克隆抗体的制备被引量：5: 2008年; 为研制检测醋酸甲羟孕酮(MPA)的免疫学检测技术进行MPA单克隆抗体的制备与鉴定,研究分别采用碳二亚胺法、混合酸酐法将MPA偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)上制备免疫原(MPA-BSA)与包被原(MPA-OVA),通过BALB/c小鼠免疫、细胞融合、间接ELISA和阻断ELISA筛选、有限稀释法克隆亚克隆获得分泌MPA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、敏感性、亚类及稳定性进行鉴定。结果表明:成功合成2种人工抗原,MPA与BSA、OVA的偶联比分别为8:1、12:1;获得1株稳定分泌MPA单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株2G4H9,McAb腹水的间接ELISA效价为1:8×10~4,IgG1亚类,κ型轻链,腹水抗体IC_(50)为5.0 ng·mL^(-1),与甲地孕酮、盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和己烯雌酚交叉反应率为12.5%、<0.01%、<0.01%和<0.01%。作者认为:MPA单克隆抗体特异性和敏感性良好,杂交瘤细胞株性能稳定,为进一步研究MPA相关免疫学分析技术奠定了基础。; 杨泽晓张彦明林祥梅梅琳刘建韩雪清; 关键词：醋酸甲羟孕酮人工抗原单克隆抗体

醋酸甲羟孕酮人工抗原的合成与鉴定被引量：4: 2008年; 【目的】为建立醋酸甲羟孕酮(MPA)快速准确的免疫学分析技术,对MPA人工抗原的合成鉴定进行研究。【方法】将MPA肟化后与琥珀酸酐反应制得MPA半琥珀酸(MPA-HS),然后通过碳二亚胺法将MPA-HS与牛血清白蛋白(BSA)偶联合成人工抗原MPA-BSA,并采用紫外全波长扫描法、SDS-PAGE法、ELISA检测法和动物免疫试验对其进行鉴定。【结果】MPA与BSA的偶联比为8∶1时,合成的人工抗原MPA-BSA具有良好免疫原性与反应原性。【结论】成功合成了人工抗原MPA-BSA,为进一步的MPA免疫学分析技术研究奠定了基础。; 杨泽晓张彦明韩雪清林祥梅侯义宏黄新; 关键词：醋酸甲羟孕酮半抗原人工抗原

SPR生物传感器快速检测醋酸甲羟孕酮的初步应用研究: 动物源性食品中残留的醋酸甲羟孕酮（Medroxy progesterone acetate,MPA）对人类健康有潜在的危害。利用SPR生物传感器快速检测MPA。对抗原的固定条件、抗体的浓度以及芯片再生条件进行了优化,同时...; 黄强力王晶钰韩雪清林祥梅王慧煜梅琳; 关键词：醋酸甲羟孕酮 SPR生物传感器; 文献传递

极具应用前景的生物学检测技术--生物传感器被引量：17: 2008年; 生物传感器是近年逐渐发展起来的一种高新生物学分析检测技术,它将生物学或仿生学信号感应部件紧密连接或整合到传感系统内,具有特异、敏感、快速、便携以及操作简便等优点,发展非常迅速,并且被应用到医疗保健、食品工业、畜牧兽医等多个领域,已成为人们研究的热点之一。概述了生物传感器的概念与工作原理、分类、与主要领域的研究应用,分析了生物传感器的产业现状,优点与现存问题,并对其应用发展前景进行了展望。; 韩雪清杨泽晓林祥梅; 关键词：生物传感器

醋酸甲羟孕酮单克隆抗体制备及ELISA检测方法的建立被引量：3: 2009年; 建立饲料和食品中醋酸甲羟孕酮（MPA）残留快速、灵敏的检测方法。分别以碳二亚胺法、混合酸酐法合成MPA的人工抗原MPA-BSA、MPA-OVA为免疫原和包被原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗MPA单克隆抗体（McAb）,在Protein G Sepharose 4 Fast Flow纯化McAb基础上通过对ELISA反应条件的优化建立了MPA检测的间接竞争ELISA方法,并对MPA标品添加试样进行了初步应用。结果获得1株能稳定分泌抗MPA McAb的杂交瘤细胞株M68F9H9,分泌McAb腹水效价为1∶1×10^7,属于IgG1亚类,MPA半数抑制浓度（IC50）为5.0 ng/mL,具有良好特异性;以纯化McAb为基础建立的间接竞争ELISA,MPA最低检测限为0.16 ng/mL,线性检测范围为0.1-80 ng/mL;除与甲羟孕酮、甲地孕酮、盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和己烯雌酚交叉反应率分别为100%、25%、〈0.01%、〈0.01%和〈0.01%;MPA添加试样应用检测结果与进口试剂盒检测结果相符。; 韩雪清杨泽晓张彦明林祥梅刘建梅琳; 关键词：醋酸甲羟孕酮单克隆抗体 ELISA

SPR生物传感器快速检测醋酸甲羟孕酮的初步应用研究被引量：5: 2010年; 动物源性食品中残留的醋酸甲羟孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)对人类健康有潜在的危害。利用SPR生物传感器快速检测MPA,对抗原的固定条件、抗体的浓度及芯片再生条件进行了优化,同时对抗体的稳定性及特异性进行了分析。结果显示,该方法检测的最低限约为1 ng/mL。利用模拟标本进行平行测试表明,其与进口ELISA检测试剂盒结果基本一致。SPR生物传感器检测MPA,单个样品的检测时间小于5 min,非常适合现场的快速检测,具有广泛的应用前景。; 黄强力王晶钰韩雪清林祥梅王慧煜梅琳; 关键词：醋酸甲羟孕酮 SPR生物传感器

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国家质检总局科技计划项目(2006IK017)