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三种方法进行结核分枝杆菌-乙胺丁醇药物敏感性试验的比较被引量：3: 2015年; 目的比较3种以细菌培养为基础的药物敏感性试验（简称“药敏试验”）方法检测结核分枝杆菌对乙胺丁醇的药物敏感性。方法采用改良罗氏培养基比例法（L-J法）、 Bactec MGIT 960检测系统法（960法）和微孔板Alamar blue显色法［最低抑菌浓度法（MIC法）］同步对126株结核分枝杆菌临床分离株进行乙胺丁醇药敏试验，比较分析3种方法的药敏试验结果。试验数据采用SPSS 17.0软件进行分析处理。Kappa值在0.4～0.75为一致性较好，Kappa值≥0.75为一致性极佳，Kappa值＜0.4为一致性差。结果 3种方法总体一致率为75.4%（95/126）。若以L-J法测定结果为判断标准，则960法和MIC法的敏感度、特异度和一致率分别为62.8%（49/78）、100.0%（48/48）、77.0%（97/126）和82.1%（64/78）、97.9%（47/48）、88.1%（111/126），MIC法与L-J法一致性极佳（Kappa=0.76），而960法与L-J法比较显示一致性较好（Kappa=0.56）。若以960法测定结果为判断标准，则L-J法和MIC法的敏感度、特异度和一致率分别为100.0%（49/49）、62.3%（48/77）、77.0%（97/126）和98.0%（48/49）、77.9%（60/77）、85.7%（108/126），L-J法和MIC法均显示与960法有较好一致性（Kappa≥0.70）。若以MIC法测定耐药结果为判断标准，则L-J法和960法的敏感度、特异度和一致率分别为98.5%（64/65）、77.0%（47/61）、88.1%（111/126）和73.8%（48/65）、98.4%（60/61）、85.7%（108/126）。3种方法的不一致性主要表现在MIC值4.0～16.0μg/ml的药物浓度范围。结论 3种方法对乙胺丁醇进行药敏试验具有较好的一致性，但也存在一定差异。L-J法和960法均与MIC法具有较高一致性，且MIC法性价比更高，适于耐乙胺丁醇结核病的早期诊断。; 孙庆赵丽丽陈燕赵秀芹吴移谋万康林; 关键词：结核分枝杆菌乙胺丁醇微生物敏感性试验

中国6个省份结核分枝杆菌耐药状况及影响因素分析被引量：39: 2016年; 目的分析北京、吉林、新疆、陕西、湖南、河南6省份结核分枝杆菌耐药性数据，了解耐药性结核病分布特征及影响因素。方法在6省份采用问卷调查收集背景资料，并使用比例法药物敏感性试验对4种一线抗结核药物（异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇）进行检测，再利用SPSS 20.0软件分析其危险因素。结果总体耐药率和耐多药率分别为23.42%和13.51%。北京、吉林、湖南、河南、陕西、新疆分离株耐药率分别为21.50%、12.24%、36.27%、42.86%、27.78%、24.39%，耐多药率分别为4.67%、8.16%、24.51%、26.53%、15.28%、14.15%。χ^2检验结果显示，各省份间单种药物耐药率、总体耐药率和耐多药率差异均有统计学意义（P=0.000）。单因素分析结果显示，结核病的复发、治疗史与耐药结核病的产生具有明显的相关性，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论我国耐药结核病的形势非常严峻，调查地区结核病耐药性存在明显差异，应针对各地区主要的危险因素加强预防干预。; 宋艺万李陈双双徐永娟刘志广赵秀芹刘海灿吴移谋万康林管茶香刘民; 关键词：结核分枝杆菌耐药结核病耐多药结核病

乳腺炎奶牛双重感染抗热分枝杆菌和象分枝杆菌的鉴定及药敏试验研究被引量：1: 2018年; 目的对疑似分枝杆菌感染乳腺炎奶牛进行病原及药敏谱调查。方法采集1头患乳腺炎奶牛的牛奶，采用4% NaOH预处理，接种于L-J培养基分离培养。阳性培养物利用抗酸染色和多位点PCR方法进行初步鉴定，采用16S rRNA、hsp65、ITS,和SodA基因的多位点序列分析进行种的鉴定，利用Alamar blue显色法对分离菌株进行27种药物的药敏试验。结果从1头患乳腺炎奶牛的牛奶中同时分离获得2株抗酸染色阳性培养物，经PCR鉴定为非结核分枝杆菌，多位点序列分析鉴定为抗热分枝杆菌和象分枝杆菌。药敏试验表明这2株菌对利福平和异烟肼等大多数抗结核药物耐药，但对阿米卡星、莫西沙星、左氧氟沙星、乙胺丁醇、链霉素、妥布霉素、环丙沙星和利奈唑胺等敏感。结论乳腺炎奶牛中分离了抗热分枝杆菌和象分枝杆菌，有其独特的药敏谱特征，为其感染防治提供了科学依据。; 李文彬纪凌云徐冬蕾徐冬蕾刘海灿赵秀芹吴移谋; 关键词：非结核分枝杆菌奶牛乳腺炎

针对gyrA基因突变的反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌喹诺酮耐药性的研究被引量：2: 2015年; 目的建立快速检测结核分枝杆菌喹诺酮耐药性的反向斑点杂交(reverse dot blot hybridization,RDBH)技术,并观察其效果。方法针对结核分枝杆菌gyr A基因序列及常见的突变位点,分别设计1条野生型和7条突变型探针,建立RDBH技术,对临床分离结核分枝杆菌菌株进行喹诺酮耐药性检测,以比例法药敏试验和DNA测序做对照。结果应用比例法药敏试验、DNA测序、RDBH三种方法分别检测59株喹诺酮耐药株和51株喹诺酮敏感株,与比例法相比,RDBH试验灵敏度和特异度分别为69.49%(41/59)、100%(51/51),符合度为83.63%;而RDBH与DNA测序结果比较,敏感度和特异度分别为97.56%(40/41),98.55%(68/69),符合度达98.18%。结论RDBH技术检测结核分枝杆菌喹诺酮耐药具有良好的灵敏度、特异度和符合度。; 郭倩李桂莲魏剑浩赵丽丽赵秀芹吴移谋万康林; 关键词：结核分枝杆菌喹诺酮耐药反向斑点杂交

微孔板Alamar blue显色法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的研究被引量：1: 2015年; 目的评价微孔板Alamar blue显色法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的可行性。方法用微孔板Alamar blue显色法对78株结核分枝杆菌检测氧氟沙星的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线确定氧氟沙星的最佳耐药阈值,并和传统的药物敏感性实验罗氏培养基比例法进行比较。结果微孔板Alamar blue显色法获得结果平均时间为8d,氧氟沙星的最佳耐药阈值为2μg/mL,以罗氏培养基比例法为金标准,氧氟沙星的灵敏度和特异度分别为88.6%和94.1%。结论微孔板Alamar blue显色法是一种简便、敏感、快速的药物敏感性检测方法,可用于结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性的快速检测。; 郑玉红郭倩李超魏剑浩赵丽丽蒋毅赵秀芹万康林李桂莲; 关键词：结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性

耐多药结核分枝杆菌中embB基因突变与乙胺丁醇耐药的相关性研究被引量：7: 2015年; 目的研究耐多药结核分枝菌中emb B基因突变与乙胺丁醇耐药的相关性。方法比例法检测84株耐多药结核分枝杆菌的乙胺丁醇(EMB)耐药性,基因测序检测emb B基因的突变,χ2检验分析二者之间的相关性。结果84株耐多药结核分枝杆菌中有43株(51.2%)对EMB耐药,41株(48.8%)对EMB敏感,57株耐多药菌株(67.9%)的emb B基因发生突变。在43株EMB耐药菌株中,emb B基因突变的菌株为40株(93.0%),而41株EMB敏感菌株中,emb B基因突变的菌株为17株(41.5%),emb B基因在耐药菌株中的突变频率远高于敏感菌株(χ2=25.58,P=0.00)。emb B306是最常见的突变位点,其在耐药菌株的突变率也高于敏感菌株(χ2=12.37,P=0.00),emb B基因和emb B306位点检测EMB耐药的敏感度、特异度和准确性分别为93.0%和65.1%,58.5%和73.2%,76.2%和69.0%。结论 EMB耐药的产生与emb B基因和emb B306突变有关,二者用于检测EMB耐药有一定的参考意义。; 刘志广孙庆刘海灿肖彤洋赵秀芹万康林赵丽丽; 关键词：耐多药结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变

间隔区寡核苷酸分型技术用于结核分枝杆菌多重感染的初步研究被引量：2: 2015年; 目的初步评价间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)技术在鉴定结核分枝杆菌多重感染中的应用。方法选取结核分枝杆菌临床分离株,5μm孔径滤膜过滤法制备单个细菌菌悬液,平板接种37℃培养,选取生长良好的单个菌落培养增菌,提取基因组DNA,Spoligotyping进行基因分型鉴定,比较临床分离株与相应的单克隆分离株的分型结果。结果共选取32株结核分枝杆菌临床分离株,获得306个单克隆分离株。Spoligotyping分型鉴定结果显示30株结核分枝杆菌临床分离株与相应的单克隆分离株的分型结果一致,2株临床分离株的单克隆分离株呈现了多种基因型,多重感染率为6.25%。结论 Spoligotyping可用于快速,有效地区分结核分枝杆菌多重感染。; 吴小翠王晓樱魏剑浩刘海灿赵秀芹夏远志楼永良吕建新万康林; 关键词：结核分枝杆菌间隔区寡核苷酸分型

中国西南地区结核分枝杆菌临床分离菌株一线药物耐药状况调查被引量：14: 2017年; 目的了解西南地区结核分枝杆菌临床分离株的耐药表型及其影响因素情况,为结核病的预防和控制提供基础参考数据。方法选取中国西南4个地区(贵州、广西、四川和重庆)2006—2013年从结核病患者痰标本中分离培养的500株结核分枝杆菌,用比例法药物敏感试验对4种一线抗结核药物进行药物敏感性检测,用SPSS22.0中的χ~2检验和Logistic回归进行统计学分析。结果 500株结核分枝杆菌临床分离株,对INH、RFP、EMB和SM的耐药率分别为30.40%、26.00%、9.80%和24.40%,总体耐药率和耐多药率分别是40.60%和27.20%;贵州、四川、广西和重庆的总耐药率和MDR率分别为64.10%和46.15%、59.54%和51.90%、28.88%和14.97%、20.19%和3.85%。χ~2检验结果显示,各地区间菌株对4种药物的耐药率、总体耐药率和耐多药率差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,地区和病例类型是结核病耐药及耐多药发生的影响因素(P<0.05)。结论西南地区,特别是贵州和四川的耐药结核病、尤其是耐多药结核病的流行状况严峻。应加强结核分枝杆菌耐药性监测,以指导临床用药和预防控制耐药结核病的发生和流行。; 陈杏李雨晴万李刘海灿赵秀芹管茶香万康林袁秀琴; 关键词：结核分枝杆菌耐药性 LOGISTIC回归分析

耐多药结核分枝杆菌耐药相关基因突变特征分析被引量：22: 2014年; 目的了解中国耐多药结核分枝杆菌耐药相关基因的分子特征。方法对138株耐多药结核分枝杆菌和45株敏感菌的耐药相关基因inhA、katG和oxyR-ahpC间隔区(异烟肼)、rpob(利福平)、gyrA(氧氟沙星)和rrs(卡那霉素)进行序列测定,分析其基因突变特点。结果 138株耐多药结核分枝杆菌中,14.4%的菌株inhA基因发生突变,72.5%菌株的katG基因发生突变,15.9%菌株的oxyR-ahpC基因发生突变,同时考虑这3种基因,异烟肼耐药相关基因突变检出率可达90.6%;94.2%菌株的rpoB基因发生突变,74.5%菌株的gyrA基因发生突变,61.1%菌株的rrs基因发生突变,主要的突变位点为katG315(66.7%),inhA-15(9.4%),oxyR-ahpC-10(5.1%),rpoB516(13.8%),526(26.1%)和531(49.3%),gyrA90(21.6%)和94(51%),rrs1401(61.1%)。结论我国耐多药结核菌异烟肼、利福平、氧氟沙星和卡那霉素耐药相关基因最常见突变为katG315、inhA-15,rpoB531、526和516,gyrA94和90,rrs1401。; 陈燕赵丽丽孙庆赵秀芹吴移谋万康林; 关键词：结核分枝杆菌耐多药基因突变

山西省某医院发现的携带碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌的流行特征研究(英文)被引量：2: 2014年; 目的肺炎克雷伯菌是一类重要的引起院内感染的病原微生物,可导致机体多个器官和组织受累。本研究主要是针对携带有碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌进行分子特征和流行状况的评价。方法本研究中所用菌株是2008-2012年分离自山西省长治某医院的标本,通过琼脂扩散和E纸条试验来分析菌株的药敏状况。碳青霉烯酶的产生情况经Carba NP试验来确认,而碳青霉烯酶基因的测定及确证由PCR和DNA测序完成。最后,将碳青霉烯类抗生素耐药菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)研究。结果 1 297株临床分离的肺炎克雷伯菌中,有9株对碳青霉烯类抗生素的耐药株,它们都是产A组碳青霉烯酶、肺炎克雷伯菌的碳青霉烯酶(KPC-2)基因阳性,而其它的检测基因均为阴性。尽管9株菌都属于MLST中的ST11型,但就PFGE分析发现,可能存在两次院内感染的传播:分别在2010和2012年。结论携带KPC-2基因的耐药肺炎克雷伯菌已经在医院内传播,加强院内严密监控和制定严格的感染控制措施已是刻不容缓。; 庞慧弓艳娥袁敏蒋毅郭步平龚林李水仙李娟万康林; 关键词：肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶药物敏感性试验脉冲场凝胶电泳多位点序列分型

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国家科技重大专项(2013ZX10003002-001)

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