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大黄牡丹汤对肠道菌群的体外作用被引量：24: 2016年; 【目的】观察大黄牡丹汤对肠道菌群结构及功能的影响。【方法】分别采用16S r DNA测序法、平板计数法和气相色谱法考察大黄牡丹汤对肠道菌群及其分泌短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)功能的影响。【结果】16S r DNA测序结果表明拟杆菌属、埃希菌属细菌明显减少,乳杆菌属、乳球菌属、变形菌属细菌增多。平板计数结果表明大黄牡丹汤能显著抑制脆弱拟杆菌体外增殖(P<0.001)。气相色谱法检测结果表明大黄牡丹汤可显著抑制SCFAs的分泌(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】肠道菌群及其代谢产物可能是大黄牡丹汤发挥药效的靶点。; 郑彦懿温如燕罗霞周联; 关键词：拟杆菌属脆弱拟杆菌短链脂肪酸 DNA测序

羧甲基茯苓多糖对巨噬细胞极化的影响被引量：18: 2016年; 目的:探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CMP)对巨噬细胞活化、吞噬、分泌、一氧化氮(nitric oxide,NO)和炎症因子的影响。方法:体内实验,将Balb/c小鼠分为生理盐水组和CMP组,生理盐水组腹腔注射生理盐水,CMP组腹腔注射CMP溶液100 mg·kg^(-1),5 d后收集小鼠腹腔巨噬细胞,采用流式细胞术检测细胞吞噬功能。体外实验,将巨噬细胞RAW264.7分为空白组、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组和CMP低、中、高剂量组,并分别加入培养基,LPS(0.1 mg·L-1)和CMP(400,800,1 600 mg·L-1)共孵育48 h。流式细胞术检测巨噬细胞的活化标志分子CD86表达水平和吞噬功能,荧光显微镜观察巨噬细胞吞噬荧光微球情况。收集细胞上清液,Griess法检测NO分泌水平,流式细胞微珠阵列法(cytometric bead array,CBA)检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)的分泌水平。结果:体内实验结果显示,与生理盐水组比较,CMP组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均显著升高(P<0.05)。体外实验结果显示,与空白组比较,CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞表达CD86分子水平显著升高(P<0.05);荧光显微镜下观察到CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞吞噬2个以上荧光微球的数量明显增加,流式检测结果也表明CMP各剂量组和LPS组巨噬细胞吞噬率和吞噬指数显著升高(P<0.05);LPS诱导巨噬细胞分泌NO,IL-6,IL-10,MCP-1和TNF,然而CMP未见此效应,且NO,MCP-1和TNF分泌水平均低于空白组。结论:CMP可以刺激巨噬细胞活化,增强其吞噬功能,但不能促进巨噬细胞释放NO和炎症因子,因此推测其促进巨噬细胞向M2型极化。; 廖海锋邓向亮罗霞周园周联; 关键词：羧甲基茯苓多糖白细胞介素-6 白细胞介素-10 单核细胞趋化蛋白-1 肿瘤坏死因子

芦荟大黄素对结肠炎小鼠模型脾脏T细胞亚群的影响被引量：4: 2013年; 目的观察芦荟大黄素(Aloe-emodin,AE)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎小鼠模型脾脏T细胞亚群的影响。方法将40只BALB/c小鼠随机分为4组,即乙醇对照组、模型组、AE组及柳氮磺吡啶(SASP)组。后3组以TNBS灌肠制备小鼠结肠炎模型,8 h后给予生理盐水、AE(150 mg.kg-1)或SASP(260 mg.kg-1)灌胃治疗,连续6 d。每天进行疾病活动指数(DAI)评分,6 d后处死小鼠,评估各组结肠组织学损伤指数(TDI)及脏器指数,应用流式细胞仪检测各组小鼠脾脏CD4+/CD8+T细胞及Th1、Th2、Tc1、Tc2细胞亚群的变化情况。结果 AE灌胃治疗可明显降低TNBS结肠炎小鼠的DAI评分和TDI评分(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,AE组小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞水平明显降低,而CD8+细胞比例升高,CD4+/CD8+比值降低((P<0.05或P<0.001),脾指数下降;AE组小鼠脾脏的Th1细胞、Tc1细胞水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),而Th2细胞明显升高(P<0.001),Th1/Th2比值、Tc1/Tc2比值也明显降低(P<0.01)。结论芦荟大黄素可能通过调节CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的平衡,抑制Th1型/Tc1型细胞分化,诱导以Th2型为主的免疫反应,从而减轻TNBS结肠炎小鼠的炎症病理损伤。; 郭向华周联王青王丽虹郑冬生; 关键词：芦荟大黄素 T细胞亚群 TH1细胞 TH2细胞

参芪扶正注射液促进环磷酰胺处理小鼠肠道相关淋巴组织B细胞数量的恢复: 2016年; 目的考察参芪扶正注射液(SQFZ)对环磷酰胺(Cy)处理后小鼠肠道相关淋巴组织(GALT)B细胞数量恢复的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、Cy组和SQFZ组。Cy组和SQFZ组小鼠均腹腔注射Cy(100 mg/kg),对照组给予等量生理盐水;24 h后,SQFZ组小鼠灌服SQFZ 1 m L/只,其余2组给予等量的生理盐水,每天灌胃1次连续10 d;每天记录小鼠体质量。给药第10天处死小鼠,测定胸腺指数和脾指数;流式细胞术检测肠系膜淋巴结(MLN)和Peyer集合淋巴结(PP)淋巴细胞中B细胞比例及股骨骨髓细胞周期。体外实验中,小鼠淋巴细胞经SQFZ处理后,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测B细胞表达CD86分子水平;羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记法检测B细胞增殖。结果 SQFZ减少Cy处理小鼠体质量的下降,促进胸腺指数、脾指数、MLN和PP中B细胞数量恢复,但未见明显改善骨髓抑制状态。体外实验结果表明SQFZ可以增加小鼠淋巴细胞活性,提高小鼠B细胞活化和增殖比例。结论 SQFZ促进Cy处理后小鼠GALT中B细胞数量恢复,可能通过促进B细胞增殖而发挥作用。; 邓向亮黄容容温如燕罗霞周联; 关键词：参芪扶正注射液 B细胞环磷酰胺

大黄牡丹汤提取液对结肠炎小鼠的治疗及作用机制研究被引量：9: 2013年; 目的研究大黄牡丹汤提取液对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎小鼠的治疗作用。方法TNBS/乙醇溶液一次性灌肠建立结肠炎小鼠模型,大黄牡丹汤提取液低剂量(0.5 g.L-1)、中剂量(1 g.L-1)、高剂量(2 g.L-1)3个不同剂量灌胃治疗6 d,通过观察小鼠一般情况及结肠病理学变化,检测大黄牡丹汤提取液对结肠炎小鼠的治疗作用。用流式细胞术检测外周血、派氏结、肠系膜淋巴结中Treg细胞的变化,ELISA检测小鼠外周血白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子(TGF-β)的变化。结果与模型组比较,大黄牡丹汤提取液各组小鼠疾病活动指数(DAI)评分、大体评分、病理学评分都有降低趋势。中剂量组小鼠大体评分、病理学评分都明显降低(2.29±0.76,2.86±0.69 VS 5.86±0.90,5.86±1.07,P<0.05),外周血、肠系膜淋巴结、派氏结Treg细胞,外周血IL-10、TGF-β升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄牡丹汤提取液各剂量组对结肠炎小鼠均有一定的治疗作用,治疗的机制可能与提高Treg细胞水平有关。; 郑冬生王丽红邓向亮周联; 关键词：结肠炎 TREG细胞小鼠

大黄素影响调节性T细胞迁徙与抑制小鼠结肠癌发展相关性研究被引量：4: 2013年; 【目的】探讨大黄素抑制小鼠结肠癌发展与影响调节性T细胞(Tregs)迁徙的相关性。【方法】选用BALB/c小鼠随机分为阴性对照组、模型组和大黄素组(剂量为100 mg.kg-1.d-1),后2组采用右前肢腋窝皮下接种CT26细胞制备结肠癌模型;采用流式细胞仪检测Tregs在结肠癌小鼠外周血、引流淋巴结和肿瘤局部的相对比例,以及趋化因子受体CCR4在Tregs的表达量差异,并研究其与肿瘤大小的相关性。【结果】大黄素组的肿瘤质量显著低于模型组(P<0.05),抑瘤率达74%;大黄素组Tregs在肿瘤局部的比例及其CCR4+Tregs的比例显著低于荷瘤模型组(均P<0.01)。【结论】大黄素抑制小鼠结肠癌的发展与其影响Tregs的迁徙相关,其机制与大黄素降低了CCR4在Tregs上的表达有关。; 阮志燕王培训邓向亮王丽虹周联; 关键词：大黄素结肠癌中药疗法调节性T细胞小鼠

山药多糖促进小鼠巨噬细胞向M1型极化被引量：8: 2016年; 目的考察山药多糖对小鼠巨噬细胞极化的影响。方法在体外实验中,将RAW264.7细胞与山药多糖共孵育24 h,采用MTT法检测细胞活性;利用Griess试剂盒检测NO分泌水平;采用CBA法检测细胞因子分泌水平;采用流式细胞术检测细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达水平。在动物实验中,将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、山药多糖低剂量组（50 mg/kg）和高剂量组（200 mg/kg）,每天灌胃给药1次连续15 d;第11~15天除正常组外,其余小鼠腹腔注射氢化可的松。末次给药第2天取脾和胸腺称质量,计算免疫器官指数;利用流式细胞术检测腹腔巨噬细胞MHC-Ⅱ类分子表达水平。结果山药多糖剂量低于500μg/ml时对RAW264.7细胞活性无显著影响,但可以促进细胞分泌NO和细胞因子IL-6、TNF-α、MCP-1,提高细胞表达MHC-Ⅱ类分子的水平。动物实验结果显示山药多糖可以恢复免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞MHC-Ⅱ类分子表达水平。结论研究表明山药多糖可以促进巨噬细胞向M1型极化。; 邓向亮马忠华胡明华马方励赖小平罗霞周联罗爽郑永艳; 关键词：山药多糖巨噬细胞

参芪扶正注射液调节环磷酰胺化疗后小鼠腹腔巨噬细胞功能的研究被引量：1: 2015年; 目的考察参芪扶正注射液对环磷酰胺化疗小鼠巨噬细胞吞噬功能和杀伤肿瘤细胞活性的影响。方法将小鼠随机分为对照组、环磷酰胺组以及参芪扶正注射液低、中、高剂量(10、20、40 m L/kg)组。除对照组外,其余各组小鼠均ip环磷酰胺100 mg/kg。参芪扶正注射液组小鼠ig给予10、20、40 m L/kg参芪扶正注射液,对照组和环磷酰胺组ig给予等量生理盐水,1次/d,连续5 d。称定胸腺和脾脏质量,计算免疫器官指数;ELISA法检测小鼠血清IL-2水平;流式细胞仪检测巨噬细胞吞噬荧光微球的数量和比例,计算吞噬率和吞噬指数;流式细胞仪检测CFSE标记的H22细胞中PI阳性细胞的比例。结果参芪扶正注射液可以不同程度地恢复环磷酰胺化疗小鼠的胸腺指数和脾指数;显著提高环磷酰胺化疗小鼠血清IL-2水平;减少小鼠巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数;不同程度地提高环磷酰胺化疗后小鼠巨噬细胞对H22细胞的杀伤活性。结论参芪扶正注射液可改善环磷酰胺化疗后小鼠免疫抑制状态,对巨噬细胞吞噬和杀伤活性均有调节作用。; 邓向亮廖海峰温如燕罗霞周联; 关键词：参芪扶正注射液环磷酰胺巨噬细胞

芦荟大黄素对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞及其HMGB1转位的抑制作用被引量：8: 2013年; 目的:研究芦荟大黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导的小鼠腹腔巨噬细胞的增殖、吞噬及高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)转位的影响。方法:常规分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,以不同浓度芦荟大黄素(终浓度为10 mol/L,20 mol/L,40 mol/L,80 mol/L)或联合1 g/ml的LPS处理细胞,以MTT法检测细胞增殖;以中性红吞噬试验和免疫荧光染色法分别检测细胞的吞噬功能和细胞内HMGB1的转位情况。结果:(10～80)mol/L浓度范围内的芦荟大黄素无细胞毒性,但可呈剂量依赖性抑制LPS介导的细胞增殖,且在24h后达到高峰;各浓度组芦荟大黄素处理细胞24h后,可明显降低小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力,与LPS组相比有显著差异性;免疫荧光检测显示伴随芦荟大黄素浓度的增高,细胞核内的HMGB1的绿色荧光逐渐增强,而胞质内的HMGB1荧光不断减弱;各浓度组芦荟大黄素呈明显剂量依赖性的降低细胞质HMGB1蛋白灰度值,与LPS组相比有显著差异性。结论:芦荟大黄素可以抑制LPS介导的小鼠腹腔巨噬细胞的增殖、吞噬及HMGB1转位,并呈剂量依赖性。; 郭向华周联王青; 关键词：芦荟大黄素高迁移率族蛋白B1 小鼠巨噬细胞

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国家教育部博士点基金(20124425110010)

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