广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0815011-6-3)
- 作品数：21 被引量：51H指数：4
- 相关作者：卢晟盛卢克焕许惠艳何若钢许丹娜更多>>
- 相关机构：广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室西藏农牧学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 胰岛素和半胱氨酸对猪孤雌胚早期体外发育的影响被引量：4
- 2009年
- 探讨在NCSU-23中添加不同浓度的胰岛素和/或半胱氨酸对猪孤雌胚体外发育的影响.结果表明,在试验1中,添加胰岛素的质量浓度为2.5μg/mL时,猪孤雌胚的卵裂率及囊胚率显著高于对照组(P<0.05);在试验2中,添加半胱氨酸的浓度为1.2 mmol/L时,猪孤雌胚囊胚发育率最高,但添加的浓度大于4.8 mmol/L时,猪孤雌胚的囊胚发育率显著降低(P<0.05);在试验3中,联合添加胰岛素和半胱氨酸时能显著提高猪孤雌胚的囊胚率(P<0.05).因此,在NCSU-23中添加一定浓度的胰岛素和/或半胱氨酸能提高猪孤雌胚发育到囊胚阶段的能力.
- 任子利赵彦玲田加运许丹娜潘天彪黄敏瑞卢晟盛卢克焕
- 关键词：孤雌激活早期胚胎胰岛素半胱氨酸
- 成熟液中不同来源促性腺激素对猪卵母细胞早期孤雌发育的影响被引量：6
- 2010年
- 为探讨不同来源的促性腺激素对猪卵母细胞早期孤雌发育的影响,将猪卵母细胞置于添加有不同来源促性腺激素(分别来自美国Sigma公司和中国科学院动物研究所)的成熟液中体外成熟40～44 h,成熟卵母细胞经化学孤雌激活后放入胚胎培养液中继续培养,分别于第48小时和第168小时统计卵裂率和囊胚发育率。结果发现,成熟液中同时添加0.5μg/mL中国科学院动物研究所生产的促性腺激素(FSH和LH)的卵裂率和囊胚发育率均略高于其他处理组,分别达到(65.68±24.13)%和(28.41±18.74)%;在囊胚细胞数方面,无论是添加中国科学院动物研究所还是Sigma公司生产的促性腺激素,均以添加浓度为0.5μg/mL时的囊胚细胞数最高。结果表明,两种来源促性腺激素对猪卵母细胞孤雌激活后早期发育的影响无显著差异,说明中国科学院动物研究所生产的促性腺激素(FSH和LH)能有效促进猪卵母细胞体外成熟和进一步孤雌发育效果,且以在成熟液中同时添加0.5μg/mL FSH和0.5μg/mL LH为宜。
- 兰宗宝韩晓慧梁世忠何若钢卢晟盛卢克焕
- 关键词：卵母细胞促性腺激素
- 猪卵母细胞和早期胚胎透明带杨氏模量变化
- 2010年
- 在39℃环境下,利用微管吸吮的方法,在倒置显微镜下,通过显微操作装置用显微玻璃管吸吮猪卵母细胞和早期胚胎来测定其透明带的杨氏模量。结果显示,从猪卵巢抽取的未经体外成熟培养的卵母细胞(GV期)一直到早期囊胚(未扩张囊胚)阶段,其透明带杨氏模量一直都无显著变化,均集中在20 kPa左右,但当发育到扩张囊胚期其透明带杨氏模量明显变大(P<0.05),且扩张囊胚中化学激活的明显大于体外受精的(P<0.05)。结果提示,在猪卵母细胞和早期胚胎发育进程中,其透明带的刚性在扩张囊胚期最大,这为通过某些理化方法来帮助扩张囊胚期的胚胎孵化,从而提高囊胚的孵化率并最终提高妊娠率提供了力学方面的理论参考。
- 赵彦玲宋立峰任子利杨绿峰卢晟盛卢克焕
- 关键词：卵母细胞胚胎透明带微管吸吮杨氏模量
- 利用单胚胎抑制消减杂交技术筛选猪MⅡ期卵母细胞转录本的研究
- 【目的】本研究旨在联合SMART(switching mechnanism at 5’ end of RNA transcript)和T7体外转录技术,建立单细胞体外转录体系;在此基础上,利用抑制消减杂交(SSH),筛选...
- 杨小淦刘红波卢晟盛陆阳清卢克焕
- 文献传递
- 猪手工体细胞核移植电融合/激活参数的优化被引量：4
- 2010年
- 通过对猪体细胞核移植中电融合及联合化学激活对猪重构胚发育能力进行探讨,为广西巴马小型猪的手工克隆搭建平台。利用手工克隆(HMC)技术对猪体细胞核移植胚胎采用不同的电融合方法和融合后化学激活不同时间,研究猪手工克隆胚胎的发育能力。结果表明:(1)对重构胚进行一步法电融合时,参数2(180V·mm-1,30μs×1次)与参数1(160·mm-1,30μs×1次)两组间的融合率差异显著(65.31%vs58.33%,P<0.05);(2)对重构胚进行两步法融合时,参数3(第一次:180V·mm-1,10μs×1次,融合60min后进行第二次融合;第二次:85V·mm-1,80μs×1次)和参数4(第一次:200V·mm-1,10μs×1次,融合60min后进行第二次融合;第二次:85V·mm-1,80μs×1次)两组间的总融合率差异不显著(75.88%vs81.20%,P>0.05);(3)采用参数4与采用参数2融合的重构胚其分裂率和囊胚率均差异不显著((79.98%vs72.66%)和(13.14%vs9.36%),P>0.05);(4)在电激活和CHX+CB联合激活4、5、6h这3组中,其分裂率和囊胚率均差异不显著(P>0.05)。相对而言,重构胚采用参数4的两步融合法和CHX+CB激活5h效果较好。
- 任子利赵彦玲杨小淦陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词：卵母细胞体细胞核移植
- 食蟹猴耳部成纤维细胞体外培养体系的初步建立被引量：5
- 2009年
- 建立食蟹猴耳部成纤维细胞的体外培养体系,为食蟹猴体细胞核移植、转基因技术及治疗性克隆做准备。通过组织块培养法进行原代培养,成功分离了食蟹猴耳部成纤维细胞;原代培养后用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化液消化细胞,用含10%FBS的DMEM对细胞进行培养,细胞在体外传至第25代;用含10%FBS和10%DMSO的DMEM为冷冻液对细胞进行冷冻保存,解冻传代后,细胞形态和生长速度没有明显变化;用细胞技术法绘制细胞的生长曲线显示,符合体外细胞生长规律;用吉姆萨染色法对不同代数细胞的染色体倍性进行分析,二倍体细胞所占比例为80%以上。
- 许丹娜许惠艳凌泽继卢晟盛谢莉萍卢克焕
- 关键词：食蟹猴体外培养
- 利用电极盘进行猪卵母细胞电激活
- 2009年
- [目的]研究不同电激活参数以及电脉冲联合6-DMAP对猪卵母细胞孤雌激活效果的影响。[方法]使用电极盘，测定不同场强（1．1、1．3、1．5、1．7、1．9kV／cm），不同脉冲时程（30、50、70、90、110ps），1次脉冲下猪卵母细胞囊胚率的变化。[结果]结果表明，脉冲强度以1．5和1．7kV／cm效果最好，在80胂时其猪卵母细胞囊胚率分别达到（22．35±5．16）％和（20．59±9．41）％；脉冲强度1．5kWcm，1次电脉冲后4h联合6-DMAP激活卵母细胞，当脉冲时程达到70和90μs时，囊胚率分别达到（21．65±9．95）％和（23．10±16．27）％。[结论]在试验条件下，使用电极盘的最适电激活参数为脉冲强度1．5-1．7kV／cm，脉冲时长80μs，1次脉冲电激活。
- 张玲黄友防何若钢卢晟盛许惠艳兰宗宝房慧伶潘天彪蓝海恩黄敏瑞卢克焕
- 关键词：卵母细胞孤雌激活
- EGF·Insulin和IGF-I对食蟹猴耳部成纤维细胞体外增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 探讨了培养基中不同浓度血清情况下，分别添加不同浓度的表皮生长因子（EGF）、胰岛素（Insulin）和胰岛素样生长因子-I（IGF-I）对食蟹猴耳部成纤维细胞体外增殖的影响，目的是寻找这3种物质促进体外培养成纤维细胞的最佳浓度，改善细胞体外培养系统，为以后体细胞及干细胞培养提供参考。将处于对数生长期的10～15代细胞进行常规消化混匀，计数，接种，培养24h后分别向孔中加入含5％和10％的两种血清浓度、添加不同浓度的EGF、Insulin和IGF-I的培养基，6d后分别向孔中加入MTT，然后用酶联免疫检测仪测定各孔在492nnl处的吸光度值（0D）。血清浓度为10％情况下，培养基中添加10ng／ml EGF、10μg／ml Isulin、100ng／ml IGF-I时，食蟹猴耳部成纤维细胞增殖能力最好。
- 许丹娜许惠艳凌泽继卢晟盛卢克焕
- 关键词：食蟹猴体外增殖
- 5-Aza-dc和TSA处理巴马小型猪体细胞对其表观遗传修饰和核移植效果的影响
- 【目的】探讨5-Aza-dc(5-氮-2-脱氧胞苷,DNA甲基化转移酶抑制剂)和TSA(Trichostatin A,去乙酰化酶抑制剂)对广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞表观遗传修饰及核移植胚胎早期发育的影响。【方法】分别用...
- 宁淑芳李青洋梁明明杨小淦陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词：巴马小型猪5-AZA-DCTSA
- 文献传递
- 转红色荧光蛋白基因细胞非侵入式人工智能检测与预测体系的建立
- 本研究利用激光光镊拉曼光谱结合基于主成分分析的BP人工神经网络(feed-forward backpropagation network)对新生巴马小型猪肾脏转红色荧光蛋白成纤维细胞进行了光谱分析、模式识别和预测。本实验...
- 刘红波杨小淦吕培茹左二伟王献伟胡林林宁淑芳陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词：转基因红色荧光蛋白主成分分析BP人工神经网络
- 文献传递
