国家自然科学基金(81172831)
- 作品数：9 被引量：19H指数：3
- 相关作者：胡安斌何晓顺朱晓峰刘芙蓉章诚更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰肾联合移植八例早期疗效观察被引量：1
- 2016年
- 目的探讨器官捐献胰肾移植术后受者早期疗效。方法8例胰肾联合移植手术，受者均为糖尿病肾病患者。供者8例，其中男性6例，女性2例，供者年龄为（26±10）岁（15-42岁）。供者中4例为中国过渡时期脑-心双死亡器官捐献，3例为国际标准化脑死亡器官捐献，1例为国际标准化心死亡器官捐献。供、受者血型相同。结果8例受者均于术后4～6h清醒，8～14h撤除呼吸机；术后2～3d从外科重症监护病房转回普通病房开始正常康复治疗。术后血清C肽、胰岛素水平在1～2周内达正常范围，血糖在术后2～3周恢复正常；肌酐在术后1～2周内降至正常范围。其中，1例受者术中出现十二指肠肠壁血肿，遂切除移植胰腺，其余受者均于2周内恢复胰腺及肾脏功能。结论器官捐献胰肾联合移植术后器官早期功能恢复良好，在术前严格评估下，年轻供者捐献器官可安全用于胰肾联合移植。
- 廖文尉章诚何晓顺朱晓峰王文静胡安斌
- 关键词：供者选择器官捐赠胰腺移植肾移植
- 同种异体胰岛移植治疗成人晚期糖尿病早期疗效观察被引量：4
- 2020年
- 目的探讨同种异体胰岛移植治疗成人晚期糖尿病的安全性和有效性。方法对4例成人受体施行了5例次同种异体胰岛移植。选用同血型成人脑死亡胰腺供体,在GMP实验室制备胰岛,通过门静脉途径将移植胰岛悬液30~60 min内注射移植入受者肝脏内。免疫抑制方案采用巴利昔单抗+他克莫司+吗替麦考酚酯三联,并应用肿瘤坏死因子(TNF)-α单抗抑制移植后炎症反应。术后暂时应用胰岛素控制血糖,并根据血糖情况调整胰岛素用量减量直至停用。结果4例晚期糖尿病患者共施行了5次胰岛移植,其中1例患者施行了2次胰岛移植。手术过程均顺利,术中血糖及门静脉压力稳定。术后继续应用外源性胰岛素控制血糖(4~12 mmol/L),4例次患者(包括2次胰岛移植患者)在第3~4周开始停用胰岛素,另外1例患者未完全停用胰岛素但用量较前减少74%。所有患者胰岛移植术后未再出现低血糖反应。3例患者C肽水平术后2~3周达到正常范围,1例患者(胰岛素未脱离)保持在0.45~0.6μg/L(0.15~0.2 nmol/L)。另外,1例患者在停用胰岛素半年后再次出现血糖升高,遂行第2次胰岛移植,再次移植后10 d停用胰岛素。3例次术后肝脏穿刺口出血,其中2例次即行超声射频消融止血,1例次出血自行停止,未发现其他并发症。结论同种异体胰岛移植治疗晚期糖尿病疗效确切,创伤小、安全性高,值得进一步推广,远期疗效及维护治疗方法尚需进一步观察。
- 胡安斌凌象超段金良廖文尉朱晓峰何晓顺刘芙蓉白芳
- 关键词：胰岛移植糖尿病早期疗效
- 半成熟树突状细胞在胚胎干细胞源性肝细胞移植中诱导耐受的研究被引量：2
- 2012年
- 目的在小鼠胚胎干细胞（ESC）源性肝细胞移植中，应用半成熟树突状细胞（smDC）诱导免疫耐受。方法绿色荧光蛋白（GFP）标记的129小鼠ESC按前期方法向肝细胞诱导分化，129小鼠smDC亦按前期方法由骨髓单核细胞诱导获得。smDC注入BALB／C小鼠3d后，再将ESC分化的肝细胞移植人BALB／C小鼠肝被膜下。检测肝转氨酶、外周血白细胞介素-2（IL）-2和IL-10水平变化，观察移植细胞生长及淋巴细胞浸润情况。结果移植后7d，smDC组肝功能指标丙氨酸转氨酶（ALT）为212．58U／L，较对照组512．27U／L明显改善（P〈0．05），7d和14d外周血IL-10水平较对照组明显升高，而IL-2水平较对照组明显降低（P〈0．05）。移植细胞存活率在14、21dsmDC组较对照组明显增高，CD4＋T细胞浸润较对照组明显减轻。结论在ESC源性肝细胞异基因移植中，smDC预输注可诱导部分免疫耐受，有望作为一种良好的移植耐受原应用于ESC分化细胞移植研究中。
- 胡安斌何晓顺付必莽商昌珍闵军蔡继业
- 关键词：树突状细胞胚胎干细胞肝细胞移植移植耐受
- 半成熟树突状细胞与Tregs水平对ESCs分化的肝细胞移植小鼠模型免疫耐受的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察半成熟树突状细胞（smDCs）在小鼠胚胎干细胞（ESCs）来源的肝细胞移植中诱导免疫耐受的作用及机制，并分析smDCs与调节性树突状细胞（regDCs）之间的关系。方法将绿色荧光蛋白（GFP）标记的129系小鼠ESCs按前期方法向肝细胞诱导分化，同时诱导129系小鼠骨髓单核细胞向smDCs和regDCs分化。将smDCs、regDCs分别预先输入BALB／c小鼠体内，3d后再将ESCs分化的肝细胞移植入BALB／e小鼠肝实质内。观察移植细胞生存时间、生长状况、局部免疫反应情况；检测分析受体血CD4＋T细胞Foxp3表达情况等。结果对照组小鼠肝实质内移植细胞仅生存1周，smDCs组与regDCs组生存时间可达4周，移植部位CD3＋T细胞浸润较对照组明显减轻；smDCs与regDCs在形态和表型方面相似，二者均中度表达MHC-11、CIMO、CD80、CD86；smDCs组受体小鼠外周血CD4＋T细胞Foxp3表达量明显升高由1．11％上升至5．38％；regDCs组Foxp3表达量亦有所升高达3．87％。结论smDCs能诱导ESCs源性肝细胞移植耐受，其机制可能与Foxp3＋ Tregs产生相关。smDCs与regDCs作用类似，且均中度表达MHC．Ⅱ、CD40等，推测为同一类型的耐受性树突状细胞。
- 章诚廖文尉蔡炳刘芙蓉柯琼朱晓峰何晓顺胡安斌
- 关键词：肝细胞移植调节性树突状细胞
- 上皮型钙黏蛋白对小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化的增强调控作用被引量：1
- 2012年
- 目的观察上皮型钙黏蛋白（E-cad）对小鼠胚胎干细胞（ESC）在体外向肝细胞分化的增强调控作用。方法将E-cad转染入BALB／c小鼠ESC使其稳定表达，再利用肝细胞生长因子（HGF）等诱导其向肝细胞分化。然后用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝细胞标记基因ALB、TAT、Cyp7a1的表达，用RIA法检测培养液ALB和尿素合成情况，显微镜观察分化细胞数量和黏附状态。结果（1）普通ESC在拟胚体（EB）形成后表达E-cad最强，其后表达降低至17d不再表达，而E-cad-ESC则稳定表达E-cad；（2）肝细胞标记基因ALB、TAT和Cyp7a1在E-cad—ESC组表达要早于或强于普通ESC组，ALB和尿素合成方面，E-cad-ESC组早于普通ESC组[普通ESC组，ALB最早出现于第11天，浓度为（0．20±0．03）mg／L，在17d达到最高为（3．71±0．45）mg／L；尿素最早出现于第12天，浓度为（8．01±1．21）μmol／L，在17d达到最高为（45．01±8．01）μmol／L。E-cad—ESC组，ALB最早出现于第9天，浓度为（0．19±0．03）mg／L，在17d达到最高为（5．52±0．82）mg／L；尿素最早出现于第10天，浓度为（5．90±1．21）μmol／L，在17d达到最高为（56．93±9．03）μmol／L]，差异有统计学意义；（3）普通ESC在分化后期表现为松散的细胞群落，分化细胞数量稀少，E—cad—ESC分化细胞数量明显增多，细胞黏附能力增强并呈紧密的多层生长。结论E—cad可增强ESC向肝细胞的分化作用，表现为分化细胞数量增多并呈多层生长，ALB及尿素合成能力增强，有望成为一种在ESC向肝脏方向分化研究中的重要调控因子。
- 胡安斌商昌珍闵军蔡继业何晓顺
- 关键词：胚胎干细胞上皮型钙黏蛋白细胞分化肝细胞
- Wnt/β－catenin信号调控EMT水平对小鼠胚胎干细胞向肝脏组织结构分化的影响被引量：7
- 2018年
- 目的在前期体外诱导小鼠胚胎干细胞（ESC）向肝系细胞分化基础上，从细胞上皮间质转化（EMT）角度研究ESC分化为肝脏组织结构的可行性。方法选用Balb/c小鼠ESC，首先利用肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）等体外诱导ESC向肝系细胞方向分化，然后在分化中期（13 d）、成熟期（17 d）两个时间点动态抑制细胞Wnt/β－catenin信号以降低其EMT水平。最后在分化系统中观察分化细胞保持三维组织结构生长情况，检测其中肝系细胞和血管标志物白蛋白（ALB）、血管内皮生长因子（VEGFR）等表达情况，综合判断有无肝脏组织形成，并研究该过程中EMT水平变化的规律和机制。结果ESC分化过程中，分化前期实验组EMT水平与对照组差别不明显，分化中、后期实验组EMT水平较对照组明显降低，分化第18天和20天，实验组上皮钙黏蛋白（E－cad）基因mRNA相对表达水平分别为0.61±0.15和0.47±0.05，对照组分别为0.07±0.05和0；实验组的ALB/AFP/CK8/CK19表达水平在同期内较对照组普遍偏高，标志物CD31/VEGFR1在分化中后期较对照组下降缓慢。在ESC培养上清液中，实验组ALB于第11天可检测到，浓度为（0.32±0.02）mg/L，而对照组ALB为（0.19±0.05）mg/L；实验组尿素于第13天开始检测到，浓度为（8.7±1.0）μmol/L，对照组尿素浓度为（3.1±1.2）μmol/L。ALB和尿素合成在ESC分化系统培养上清中浓度随分化时间延长而明显升高，并且实验组的ALB、尿素浓度值在相同的时间段内明显多于对照组。另外，实验组分化细胞可保持三维组织状态生长，对照组分化细胞最终呈单细胞状态。实验组可检测到肝系细胞标志物以及血管细胞标志物的表达，免疫荧光结果显示类肝细胞和血管结构紧密层状排列，HE染色提示有类肝小叶结构形成，而对照组无血管成分标志物表达。结论ESC向肝系细�
- 廖文尉章诚刘芙蓉凌象超蔡炳朱晓峰何晓顺胡安斌
- 关键词：胚胎干细胞EMT肝脏组织
- 上皮型钙黏蛋白诱导小鼠胚胎干细胞向类肝脏组织分化的研究
- 2012年
- 目的观察上皮型钙黏蛋白（E—cad）诱导胚胎干细胞（ESC）体外分化为类肝脏组织的作用。方法将E—cad转染入BALB／C系小鼠ESC并使其稳定表达，利用肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因子（TGF）等诱导其向肝细胞分化。于分化系统中检测肝细胞、胆管上皮细胞（BEC）和血管内皮细胞标记物的表达，并观察分化细胞形态。结果（1）E—cad在普通ESC中随分化而表达降低，并在17d时不再表达，而在E-cad—ESC中则稳定表达；（2）E-cad—ESC分化细胞在17d时表达肝细胞、BEC和血管内皮细胞标记物白蛋白（ALB）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）和血管内皮生长因子受体（VEGFR）等，而普通ESC则仅表达肝细胞和BEC标记物；（3）E—cad—ESC分化细胞黏附明显增强，至17d仍保持紧密的多层生长状态，并形成表达ALB、CK19和VEGFR等的脉管网络结构，而普通ESC则呈分散的单层细胞生长。结论稳定表达E-cad的ESC分化细胞黏附能力增强并呈多层生长，可形成一种由肝细胞、BEC和内皮细胞及其脉管网共同组成的类组织结构。
- 胡安斌商昌珍闵军蔡继业何晓顺
- 关键词：胚胎干细胞分化钙黏蛋白肝脏组织
- 胰岛移植治疗胰腺移植术后移植物失功一例被引量：3
- 2019年
- 近年,胰岛移植因其分离技术和移植方案的进步,已成为糖尿病晚期根治性治疗的有效方法,也成为胰腺移植失败后可靠的补救手段。我们对一例胰肾联合移植术后移植胰腺失功切除后患者,施行了补救性的同种异体胰岛移植,取得了较好疗效,现汇报并探讨如下。
- 胡安斌廖文尉凌象超朱晓峰刘芙蓉章诚何晓顺
- 关键词：胰岛移植胰腺移植
- 心脏死亡器官捐赠应用于腹部多器官移植二例被引量：2
- 2012年
- 目的探讨心脏死亡器官捐赠（DCD）应用于腹部多器官移植的可行性及疗效。方法2例乙型肝炎肝硬化、肝癌合并2型糖尿病患者接受保留自身胰腺的多器官（肝、胰和十二指肠）移植，供者为符合“中国心脏死亡器官捐献分类标准”中的中国三类（C-Ⅲ类）标准的2例男性捐献者。采取多器官联合切取法完整切取供者的肝脏、胰腺、十二指肠和部分空肠，利用供者的髂外、髂内动脉将供者的腹腔干和肠系膜上动脉成型为一个出口，与受者的腹主动脉行端侧吻合。受者的胰腺不切除，其门静脉与移植物的门静脉后壁行端侧吻合，供者的十二指肠降部与受者的上段空肠行侧侧吻合。结果2例的丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及胆红素总量等肝功能指标在术后2周达正常水平；术后7d血糖恢复正常；术后4d血淀粉酶和脂肪酶恢复正常；术后1～2周空腹血C-肽和胰岛素达正常范围。1例术后出现肠吻合口瘘，经穿刺引流，4周后痊愈。2例受者分别在术后8周和5周康复，肝功能及胰腺功能正常，未再使用胰岛素。结论符合C-Ⅲ类DCD供者的器官可用于腹部多器官移植，术后移植物功能良好。
- 胡安斌何晓顺欧阳杰李强朱晓峰
- 关键词：心脏死亡供者肝硬化肝移植胰腺移植
- 半成熟树突状细胞与调节性树突状细胞在减轻ESCs分化的肝细胞移植小鼠模型免疫损伤的共同机制研究
- 目的研究半成熟树突状细胞(smDCs)与调节性树突状细胞(regDCs)诱导胚胎干细胞(ESCs)分化的肝细胞移植小鼠模型免疫耐受的作用机制,并分析比较二者的分子表型及功能特点。方法体外培养绿色荧光蛋白(GFP)标记的1...
- 胡安斌章诚廖文尉朱晓峰何晓顺
- 关键词：ESCS肝细胞移植调节性树突状细胞TREGS移植耐受
