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内生菌对植物次生代谢产物的转化被引量：15: 2014年; 近年研究发现许多药用植物中的活性成分产量低下或副作用大、不利于人体吸收,而内生菌存在于健康植物的组织或器官中,可以对植物次生代谢产物进行转化且具有条件温和、专一有效、收效率高等特点。本文主要对近几年内生菌对植物次生代谢产物转化的研究进行综述和展望,以期为内生菌资源的开发和利用提供参考价值。; 刘颖魏希颖; 关键词：内生菌植物次生代谢产物

基因组重排技术在微生物菌种选育中的应用被引量：7: 2013年; 对基因组重排育种技术的建立过程、自身的技术优势及其在微生物菌种选育方面的应用研究进行了综述.结果表明,该技术能大幅度提高微生物细胞的正向突变频率和速度,缩短菌种选育时间.目前基因组重排技术主要用于提高工业微生物菌种的代谢产率,增强菌株对环境的耐受性,提高底物利用率和范围等方面;未来随着生物信息学、基因组学等生物技术的发展,该技术将在药物微生物菌种选育研究中得到进一步应用.; 魏希颖王家稳刘清梅胡妍妍; 关键词：基因组重排育种

基于烟草瞬时表达体系对amiRNA沉默效果快速有效的预验证被引量：2: 2015年; amiRNA(artificial microRNA)作为一种诱导基因发生特异性沉默的技术已在多种植物中应用,但设计出的不同amiRNAs在所转化株系中的沉默效率难以预测,因此对amiRNA载体的沉默效率进行预验证是非常必要的。本实验以丹参(Salvia miltiorrhiza)的1个MYB类转录因子基因SmPAP1的mRNA序列为amiRNA作用对象,并挑选2个经在线软件WMD3(Web MicroRNA Designer)设计的amiRNAs,分别命名为amiRNA1-SmPAP1和amiRNA2-SmPAP1,然后通过农杆菌介导将构建的2个amiRNA载体和SmPAP1过表达植物载体在烟草叶片细胞中进行瞬时共表达。结果显示,amiRNA2的表达丰度约是amiRNA1的2倍;amiRNA2对靶标SmPAP1的沉默效率约是amiRNA1的2.5倍;SmPAP1在mRNA和蛋白水平上均与相应amiRNA的表达水平呈显著负相关。因此,amiRNA在烟草细胞中的瞬时表达可快速、有效地对不同amiRNA沉默效果进行预验证,从而为后续的植物遗传转化研究提供重要参考。; 王健

丹参SmPI1和SmPI2基因克隆及胁迫表达研究被引量：1: 2015年; 该研究从药用植物丹参中克隆了SmPI1和SmPI2蛋白酶抑制剂基因,采用生物信息学和实时荧光定量PCR方法对其序列及表达模式进行了分析。序列分析结果表明,丹参SmPI1和SmPI2基因分别含有一个长度为222bp和216bp的开放阅读框,编码73和71个氨基酸;2个编码蛋白都无跨膜结构域和信号肽,预测都定位于细胞质中;SmPI1和SmPI2蛋白与川桑、可可、苜蓿等植物的蛋白酶抑制剂基因相似性较高,分别为58%、52%、53%和54%、56%、51%。实时荧光定量PCR结果表明,SmPI1和SmPI2基因受茉莉酸甲酯(MeJA)和甘蓝黑腐病黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.Campestris,XC)显著诱导,说明丹参SmPI1和SmPI2基因可强烈响应这两类胁迫,可能参与丹参中两类胁迫分子途径相关的抗性反应。; 孔维维化文平王喆之; 关键词：丹参蛋白酶抑制剂

丹参环阿屯醇合酶基因克隆及表达分析被引量：8: 2013年; 以丹参cDNA为模板,克隆了丹参环阿屯醇合酶(cycloartenol synthase,CAS)基因的cDNA序列(SmCAS),对其序列进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR方法研究了该基因在丹参不同器官及不同胁迫处理下的表达模式。结果显示:该基因全长2 346bp,包含2 271bp开放阅读框,编码756个氨基酸。预测其编码蛋白分子量为86.16kD,具有氧化鲨烯环化酶超家族典型的DCTAE结构域和QW结构域。该基因推测的氨基酸序列与人参、田七、积雪草、甘草、拟南芥的相似性分别为83%、84%、83%、81%和80%。SmCAS基因在丹参根、茎、叶、花中均有表达,在花中表达量最高;而且SmCAS基因能够响应ABA、低温和干旱的诱导。; 李珍王东浩姚伟陈玉芹王喆之; 关键词：基因克隆丹参

丹参转录因子SmbHLH93的克隆及表达模式分析被引量：5: 2014年; 目的克隆丹参碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)类转录因子SmbHLH93,并初步探究该基因的功能。方法采用PCR和RT-PCR技术分别从DNA和c DNA水平克隆得到了SmbHLH93基因,进一步通过BD Walking获得了该基因的5’启动子区。生物信息学分析SmbHLH93蛋白的理化性质、结构特点和系统进化关系。结合启动子区分析软件和q PCR,研究SmbHLH93在丹参不同部位和环境诱导下的表达模式。结果获得SmbHLH93基因序列954 bp和5’启动子区1 583 bp,其中开放阅读框(ORF)657 bp,有3个内含子和4个外显子,编码218个氨基酸,含有b HLH和ACT_UUR-ACR-like结构域,无跨膜区域,可能定位于细胞核。表达模式分析结果显示该基因的表达量在根中最高,茎中最低,且随着花的形成逐渐降低。光和低温诱导SmbHLH93的高表达,而水杨酸(SA)抑制其表达。结论克隆得到丹参b HLH类转录因子新成员SmbHLH93,初步预测其参与了丹参花的发育过程和丹参次生代谢途径的调控。; 周宏骏武玉翠晋鑫鑫饶丽华王喆之; 关键词：丹参基因克隆生物信息学

丹参脂氧合酶基因(SmLOX)的克隆及其表达模式研究被引量：2: 2013年; 依据丹参转录组数据库得到的脂氧合酶基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法从丹参分离得到一个新的LOX基因,命名为SmLOX(GenBank注册号为JX297420)。该基因cDNA全长2607bp,包含一个长为2571bp的开放阅读框,编码856个氨基酸。序列分析表明,SmLOX编码的多肽具有LOX的序列保守元件,与猕猴桃LOX2编码蛋白高度同源,同源性达到71%。系统进化树分析表明,SmLOX与双子叶植物的LOX亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果表明,SmLOX基因在丹参不同组织器官中差异表达,其中叶中的表达量最高,并且其表达受茉莉酸甲酯和损伤处理的诱导,显示SmLOX基因可能在植物防御反应中发挥作用。; 李晋宋银王喆之; 关键词：丹参脂氧合酶基因克隆

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国家自然科学基金(31270338)