“首都临床特色应用研究”专项(Z111107058811107)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 相关作者：张斌陈虎李倩扈江伟徐曼更多>>
- 相关机构：军事医学科学院附属医院解放军第307医院军医进修学院更多>>
- 发文基金：“首都临床特色应用研究”专项国家高技术研究发展计划军队临床高新技术重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用组织贴壁法从整根脐带分离培养间充质干细胞及其生物学特性的检测被引量：1
- 2012年
- 目的建立从整根脐带分离培养间充质干细胞(UC-MSCs)的技术,并对其生物学特性进行检测。方法用组织贴壁法分离UC-MSCs,并通过传代进行纯化和扩增培养,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测UC-MSCs表面抗原及细胞周期;在特定诱导体系中,检测UC-MSCs向脂肪、成骨及软骨分化的潜能;用RT-PCR检测多能干细胞标志多能干细胞标志Oct-4,Sox-2,Nanog mRNA水平。结果成功建立了UC-MSCs分离培养的方法;贴壁细胞均表达CD73、CD90及CD105,不表达造血细胞表型CD34、CD45和HLA-DR;细胞倍增时间为(24.04±0.49)h,G0～G1期和S+G2+M期所占比例分别为81.56%和18.44%;UC-MSCs能够向脂肪、成骨和软骨分化;表达Oct-4,Sox-2,Nanog基因。结论组织贴壁法是一种较好的分离培养UC-MSCs的方法,培养的细胞为更原始的间充质干细胞,增殖能力强。
- 张颢张斌程梅陶艳玲扈江伟徐曼陈虎
- 关键词：脐带间充质干细胞分化
- WT1为靶点的DC肿瘤疫苗研究进展
- 2012年
- WT1基因在小儿肾癌中首次被发现,随后的研究中大量数据显示WT1基因在血液系统肿瘤和实体瘤中存在高表达,这提示WT1作为肿瘤免疫治疗新靶点的可行性。树突状细胞(DC)在诱导肿瘤抗原特异性效应和记忆性细胞过程中的作用,以及在人体内呈递抗原的能力,使其成为肿瘤免疫治疗的基础。随着目前DC研究的不断进步,以WT1为靶点的DC肿瘤疫苗也日趋成熟,有的已成功应用于临床。
- 金悦陈虎张斌
- 关键词：WT1基因树突状细胞肿瘤疫苗
- Th17细胞与移植物抗宿主病关系的研究进展被引量：5
- 2013年
- Th17细胞是一种新发现的不同于Th1、Th2的CD4+T细胞亚群,IL-17是其主要的效应分子,已被证实在多种自身免疫病和炎性疾病中发挥关键作用。移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植术后最主要和最严重的并发症之一,是供者T细胞介导的组织炎性损伤,CD4+T细胞是启动GVHD的关键。近年来关于Th17细胞在GVHD发生过程中发挥作用的研究得出了不一致的结论,深入研究Th17的作用将可能为GVHD的临床治疗提供新的路径。现就CD4+T细胞和Th17细胞与GVHD关联性的研究进展进行综述。
- 李倩张斌陈虎
- 关键词：造血干细胞移植移植物抗宿主病TH17细胞CD4+T细胞
- 重组腺病毒载体Ad5-hTRX-EGFP的构建及其表达被引量：4
- 2012年
- 本研究旨在构建并制备人硫氧还蛋白(hTRX)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因腺病毒载体Ad-hTRX-EGFP,感染HEK293细胞,为基因治疗提供实验基础。设计含有NotⅠ和EcoRⅤ酶切位点的引物,PCR扩增hTRX,将扩增产物连接到带有EGFP标记的pDC316-mCMV穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-hTRX-EGFP,利用Lipofectamine2000脂质体的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHG lox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-hTRX-EGFP共转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒pAd-hTRX-EGFP,并在其中包装扩增病毒,用氯化铯高速梯度离心、纯化病毒,测定病毒颗粒数及滴度。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,用流式细胞仪测定感染HEK293细胞的效率,Western blot方法验证细胞表达hTRX蛋白。结果显示,重组腺病毒质粒经PCR和NotⅠ、EcoRⅤ酶切鉴定,证实含有hTRX基因,测序结果和设计片段的序列一致。重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达5.558×1010pfu/ml。病毒成功感染HEK293细胞,MOI=100时,感染效率达92.25%。经Western blot方法验证表明,感染后的HEK293细胞高表达hTRX蛋白。结论:应用细胞内同源重组方法成功构建了含hTRX基因的重组腺病毒载体,制备获得高滴度的病毒,能高效感染HEK293细胞并表达目的蛋白,为后续研究奠定了基础。
- 扈江伟王军徐曼苏永锋孔维霞盛红霞张斌陈虎
- 关键词：人硫氧还蛋白腺病毒载体增强型绿色荧光蛋白
- 人脐带间充质干细胞对血液恶性肿瘤细胞增殖的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨脐带间充质干细胞(UC-MSCs)体外对白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤8种血液肿瘤细胞株增殖的影响。方法用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记肿瘤细胞,UC-MSCs与肿瘤细胞以不同比例体外共培养作为实验组,以肿瘤细胞单独培养作为对照组,流式细胞仪检测3 d后肿瘤细胞的平均荧光强度及分裂的代次。结果 UC-MSCs对HL60、THP1、K562、RPMI8226细胞增殖起抑制作用;对Raji及NCIH929细胞增殖起促进作用;对Jurkat细胞仅在1∶1时起促进作用;而对于U937细胞,在UC-MSCs与U937比例为2∶1时起抑制作用,1∶4及1∶16时起促进作用,1∶1时无明显影响。结论UC-MSCs对不同血液肿瘤细胞株增殖的作用不同。对4株白血病细胞系无明显的促进作用,对淋巴瘤细胞株及多发性骨髓瘤细胞株具有促进和抑制的双向作用,U937细胞株可能是进一步研究这种对立现象的良好模型。
- 庞一琳汤永永李倩谢婧臧学峰刘婷婷张斌陈虎
- 关键词：间充质干细胞血液肿瘤细胞增殖
