国家自然科学基金(81272916)
- 作品数：6 被引量：45H指数：3
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- RNA结合蛋白38基因对人乳腺癌BT474细胞生物学特性的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察RNA结合蛋白38（RNPCI）基因过表达对人乳腺癌细胞BT474的生物学特性的影响。方法细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组，采用慢病毒转染法，利用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、平板克隆形成实验、Transwell小室实验观察其对BT474细胞生物学特性的影响。结果CCK-8实验显示，空白对照组、阴性对照组和实验组6d时吸光度（A）值分别为0．7147±0．0189、0．7708±0．0160、0．5568±0．0436（P〈0．05）。克隆形成实验显示，14d时细胞克隆形成数分别为（113．300±3．528）、（118．700±2．404）、（47．330±2．906）个（P〈0．01）。Transwell小室实验显示，实验组细胞24h迁移、侵袭实验中滤过膜细胞数分别为（61．670±4．842）、（14．670±1．856）个，均比空白对照组和阴性对照组降低（P〈0．01）。Westernblot法显示，过表达RNPCIa下调基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的蛋白表达（P〈0．01）。结论RNPCIa基因可以抑制BT474细胞的生物学特性。RNPCIa与MMP-2的相互作用关系在乳腺癌的侵袭和转移中起调节作用。
- 薛金秋梁秀清成琳石靓王莹丁强
- 关键词：乳腺癌增殖
- D-鼠李糖β常春藤甙通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231凋亡被引量：3
- 2014年
- 目的:观察D-鼠李糖β常春藤甙(简称D药)对乳腺癌细胞的杀伤作用,通过研究其对PI3K/AKT信号通路的影响,探索其抗肿瘤机制。方法:不同浓度D药作用于乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231 48 h后,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blot法检测D药作用MCF-7、MDA-MB-231后PI3K/AKT信号通路相关分子的蛋白表达。结果:20、30、40μg/ml D药作用细胞48 h后可以诱导细胞凋亡,凋亡率随浓度升高而增加。20μg/ml D药作用细胞48 h后,pPI3K、p-AKT蛋白表达减少,而总PI3K、总AKT蛋白的表达量无明显变化。PI3K抑制剂LY294002通过抑制细胞p-AKT的表达,从而增加D药引起的细胞凋亡。结论:D药可以通过抑制PI3K的磷酸化,进而影响磷酸化AKT的表达,最终诱导乳腺癌细胞凋亡。
- 成琳夏添松周文斌梁秀清薛金秋石靓王莹丁强
- 关键词：乳腺癌凋亡PI3K
- 环乳晕切口在乳腺癌保乳手术中的应用被引量：27
- 2013年
- 目的探讨环乳晕切口在乳腺癌保乳手术中的应用。方法对114例分别经环乳晕切口（A组）、肿块表面切口（B组）行乳腺癌保乳手术的患者的术后并发症、美容效果等方面进行分析。结果A组46例，占40．4％，B组68例，占59．6％。术后随访6—42个月，平均随访28个月。两组患者在术后乳头、乳晕感觉障碍以及局部复发、远处转移等方面差异无统计学意义（P〉0．05）；A组在乳房对称性、瘢痕等美容评价优于B组（P〈0．01）。结论经环乳晕切口行乳腺癌保乳手术不影响预后，并改善了患者乳房的美容效果。
- 张浩周文斌周茜刘晓安王水凌立君
- 关键词：乳腺癌保乳手术环乳晕切口
- 人乳腺癌ZR-75-1细胞中RNA结合蛋白38对孕激素受体表达的调节作用及其机制被引量：2
- 2016年
- 目的明确乳腺癌细胞株ZR-75—1中RNA结合蛋白38（RNPCI）的表达对孕激素受体（PR）表达的调节作用。方法采用慢病毒转染法过表达RNPCI基因，以实时荧光定量PCR（qRT—PCR）和Westernblot法检测RNPCI调节PR表达的情况；以放线菌素实验研究RNPCI调控PR表达的机制。采用免疫组化法检测80例乳腺癌组织中RNPCI蛋白和PR蛋白的表达。结果免疫组化检测结果显示，在PR蛋白表达阳性的29例乳腺癌组织中，RNPCI蛋白高表达16例；在PR蛋白表达阴性的51例乳腺癌组织中，RNPCI蛋白低表达41例。qRT—PCR检测结果显示，过表达RNPCI组和过表达对照组乳腺癌ZR-75-1细胞中，PRmRNA的相对表达量分别为1．764±0．028和1．001±0．037．差异有统计学意义（P〈0．01）；而干扰RNPCI组和干扰对照组乳腺癌ZR-75-1细胞中PRmRNA的相对表达量分别为0．579±0．007和1．000±0．002，差异有统计学意义（P〈0．01）。Westernblot法检测结果显示，在乳腺癌ZR-75—1细胞中，过表达RNPCI可使PR蛋白的表达增加；而敲除RNPCI的表达后，PR蛋白的表达减少。放线菌素实验结果显示，乳腺癌ZR-75—1细胞过表达RNCPl后，PRmRNA的稳定性增加，其半衰期由过表达对照组的4．0h增加为6．5h；而敲除RNPCI的表达后，PRmRNA的稳定性降低，其半衰期由干扰对照组的4．1h降为3．0h。结论RNPCI在调节乳腺癌ZR-75-1细胞PRmRNA和蛋白的表达中发挥重要作用。
- 娄培培李春莲夏添松石靓周旭婕王莹丁强
- 关键词：乳腺肿瘤孕激素受体
- shRNA干扰沉默RNPC1a基因对SUM1315细胞增殖、迁移及侵袭的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:研究RNPC1a基因对SUM1315细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:应用脂质体技术将RNPC1a短发夹RNA(shRNA)转染至SUM1315细胞,通过嘌呤霉素筛选出稳定细胞株,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测其干涉效率,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖情况,划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测其迁移和侵袭能力。结果:经qRT-PCR和Western blot方法证实稳定转染RNPC1a shRNA的SUM1315细胞中RNPC1a的mRNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P<0.05),同时RNPC1a干扰后细胞的增殖、迁移及侵袭能力均减弱(P<0.05)。结论:RNPC1a shRNA能有效地降低SUM1315细胞中RNPC1a基因的表达,RNPC1a基因沉默可以抑制SUM1315细胞的增殖、迁移及侵袭。
- 梁秀清潘红周文斌薛金秋成琳王莹丁强
- 关键词：SHRNA干扰生物学功能
- RNA结合蛋白38通过增加人表皮生长因子受体2的表达诱导乳腺癌BT474细胞对曲妥珠单抗的敏感性被引量：10
- 2016年
- 目的探讨敲除和过表达外源性RNA结合蛋白38（RNPC1）基因后，人表皮生长因子受体2（HER-2）阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗敏感性的变化。方法采用慢病毒转染法敲除和过表达RNPC1基因，采用实时荧光定量PCR法检测各组BT474细胞中RNPC1和HER-2mRNA的表达，Western blot法检测RNPC1和HER-2蛋白以及P13K／AKT蛋白的表达。以不同浓度的曲妥珠单抗处理各组BT474细胞，采用流式细胞术检测各组BT474细胞的凋亡率，细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测生长抑制率。以20μg/ml曲妥珠单抗处理各组BT474细胞，采用Western blot法检测各组BT474细胞中凋亡相关蛋白的表达。结果实时荧光定量PCR和Western blot法检测结果均显示，RNPC1过表达后，RNPC1和HER2mRNA及蛋白的表达均增高；而敲除RNPC1基因后，RNPC1和HER2mRNA及蛋白的表达均降低。RNPC1的过表达能减少BT474细胞中p-P13K和p-AKT蛋白的表达；RNPC1的敲除能增加p-P13K和p-AKT蛋白的表达。5、10、15、20和25μg／ml曲妥珠单抗处理敲除实验组BT474细胞48h后的生长抑制率分别为（9．67±1．18）％、（21．67±1．23）％、（30．33±1．25）％、（40．33±1．69）％和（53．00±1．63）％，均明显低于相应浓度曲妥珠单抗处理的敲除对照组[分别为（14．00±0．82）％、（27．67±1．25）％、（39．67±1．79）％、（53．67±1．50）％和（63．33±1．52）％，均P〈0．05]。5、10、15、20和25μg／ml曲妥珠单抗处理过表达实验组BT474细胞48h后的生长抑制率分别为（20．33±1．25）％、（35．38±2．05）％、（50．43±2．12）％、（65．35±2．08）％和（76．00±2．16）％，均明显高于相应浓度曲妥珠单抗处理的过表达对照组[分别为（13．67±1．24）％、（27．86±2．05）％、（39．72±1．69）％、（53．33±1．70）％和（62．68±2．07）％，均P〈0．05]。10、20和30μg/ml曲妥珠单抗处理敲除实验组BT474
- 李春莲周旭婕娄培培夏添松石靓王莹丁强
- 关键词：乳腺肿瘤人表皮生长因子受体2增殖凋亡
